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bases analiticas III A cromatografia é uma técnica que se baseia na diferença de afinidade entre uma fase estacionária e uma fase móvel dos solutos que compõem uma solução complexa. A respeito dessa técnica, assinale a alternativa correta. Resposta Selecionada: Corretae. A HPLC ou cromatografia líquida de alta performance, permite a avaliação do tempo de retenção do analito na coluna ou a sua eluição em um segundo solvente, aplicado posteriormente. Após a saída do analito do sistema de HPLC, este passa por um sistema de detecção acoplado ao aparato, o que permite sua identificação. Respostas: a. Na cromatografia por coluna, quanto menor a afinidade do analito pela fase estacionária, mais lentamente ele migra pela coluna. b. Na cromatografia planar, a fase estacionária pode ser constituída de uma resina depositada sobre uma placa e a fase móvel, um solvente ou mistura de solventes no estado líquido. Quanto maior a afinidade do analito pela fase móvel, menor a distância percorrida pelo analito na placa. c. O fenômeno de adsorção diz respeito ao estabelecimento de interações intermoleculares entre as partículas do analito e a fase móvel. d. O gás de arraste constitui a fase estacionária na cromatografia gasosa. Corretae. A HPLC ou cromatografia líquida de alta performance, permite a avaliação do tempo de retenção do analito na coluna ou a sua eluição em um segundo solvente, aplicado posteriormente. Após a saída do analito do sistema de HPLC, este passa por um sistema de detecção acoplado ao aparato, o que permite sua identificação. Feedback da resposta: Resposta: E Comentário: Na cromatografia líquida de alta performance (HPLC), a amostra é aplicada em um sistema e atinge a fase estacionária, contida em uma coluna. Se o analito apresentar afinidade suficiente pela fase estacionária, ficará retido na coluna e será retirado desta quando da aplicação de um solvente (fase móvel) com maior afinidade pelo analito. A grande vantagem da HPLC é que, quando o analito sai do aparato, ele pode ser identificado pelo sistema de detecção (espectrômetro de massa). Pergunta 2 0,4 em 0,4 pontos Correta Você realizou a cromatografia em papel do extrato aquoso de uma planta amazônica. Para isso, aplicou-se o extrato na base do papel de cromatografia e, após a secagem, o papel foi acondicionado em cuba contendo uma mistura de metanol e acetona. Após a corrida, foram identificadas 4 bandas, cujos fatores de retenção foram, 0,2, 0,4, 0,7 e 0,85. A respeito desse experimento, avalie as afirmativas a seguir e assinale a alternativa correta. I. No experimento acima, o papel de cromatografia constitui a fase estacionária e a solução de metanol e acetona, a fase móvel. II. A banda com fator de retenção de 0,2 migrou mais pelo papel de cromatografia do que a banda com fator de retenção de 0,7. III. A banda com fator de retenção 0,85 apresenta maior afinidade pela fase móvel do que a banda com fator de retenção 0,4. Estão corretas somente as afirmativas: Resposta Selecionada: Corretac. I e III Respostas: a. I e II b. II e III Corretac. I e III d. I, II e III e. Nenhuma das afirmativas está correta. Feedback da resposta: Resposta: C Comentário: Afirmativa I: A fase estacionária é aquela que não migra pelo aparato de cromatografia. No exemplo, é o papel de cromatografia. A fase móvel, por sua vez, migra pela fase estacionária. No caso, a solução de metanol e acetona. Afirmativa III: O fator de retenção é o quociente entre a distância percorrida pela amostra e a distância total percorrida pelo solvente. Quanto maior o fator de retenção, mais a banda migrou pela fase estacionária. Portanto, a banda com fator de retenção 0,85 migrou mais pelo papel de cromatografia do que a banda com fator de retenção 0,4, pelo fato de apresentar maior afinidade pela fase móvel. Pergunta 3 0,4 em 0,4 pontos Correta A eletroforese é um processo que permite a separação de partículas em diâmetro coloidal com base na aplicação de uma carga elétrica sobre a amostra. A respeito dessa técnica, assinale a alternativa incorreta. Resposta Selecionada: Corretad. Ao final da corrida, quanto mais distante do ponto de aplicação, maior a migração da macromolécula e, portanto, maior seu tamanho. Respostas: a. É muito utilizada para isolar moléculas biológicas (proteínas, DNA e RNA). b. Ao se ligar a cuba de eletroforese em uma fonte de eletricidade, a corrente elétrica flui pelo tampão, do polo negativo (ânodo) para o polo positivo (cátodo). As amostras aplicadas na extremidade do gel que está próxima ao ânodo sofrem ação da corrente elétrica e atravessam o gel em direção ao polo positivo. c. Na eletroforese, a separação de macromoléculas é feita por tamanho. Corretad. Ao final da corrida, quanto mais distante do ponto de aplicação, maior a migração da macromolécula e, portanto, maior seu tamanho. e. Quanto maior a concentração de agarose no gel de eletroforese, mais lenta é a migração das macromoléculas. Feedback da resposta: Resposta: D Comentário: A alternativa D está incorreta pois, quanto mais distante do ponto de aplicação, maior a migração da macromolécula e, portanto, menor seu tamanho. Pergunta 4 0,4 em 0,4 pontos Correta A escolha do gel adequado é essencial para o êxito da corrida de eletroforese. A respeito das características do gel de eletroforese, assinale a alternativa correta. Resposta Selecionada: Corretaa. Os géis precisam ter sua concentração ajustada de acordo com o tamanho médio das macromoléculas que se deseja separar. Respostas: Corretaa. Os géis precisam ter sua concentração ajustada de acordo com o tamanho médio das macromoléculas que se deseja separar. b. O gel de agarose é mais utilizado na separação de proteínas e o de acrilamida, na separação de moléculas de DNA. c. As partículas que constituem o soluto da solução tampão também migram pelo gel de eletroforese e são retidas por ele. d. Os géis de acrilamida permitem que a corrida seja feita a seco, ou seja, sem a necessidade de uma solução tampão. e. Os géis de agarose, mas não os de acrilamida, permitem a separação de moléculas de diâmetro coloidal. Feedback da resposta: Resposta: A Comentário: Quanto maior a concentração do gel, mais estreita a malha do gel e mais difícil é a migração das moléculas maiores. Portanto, quanto maior o tamanho da molécula que se deseja separar, menor deve ser a concentração do gel e vice-versa. Pergunta 5 0,4 em 0,4 pontos Correta A espectrofotometria é uma técnica muito utilizada no laboratório clínico e nas análises físico-químicas. A respeito dessa técnica, avalie as afirmativas a seguir e assinale a alternativa correta. I. Na espectrofotometria na região do visível deve-se operar com filtros cuja cor seja igual à da solução colorida a ser analisada. Portanto, se a solução apresentar a cor vermelha, deve-se usar um filtro que seleciona somente as ondas luminosas vermelhas. II. Absorbância é a capacidade que as moléculas têm de absorver a luz de determinado comprimento de onda. A absorbância depende da concentração da substância absorvente e da espessura da cubeta através da qual passa a luz. III. A espectrofotometria pode ser usada para quantificar metabólitos e outras moléculas de importância clínica em amostras biológicas. Estão corretas somente as afirmativas: Resposta Selecionada: Corretab. II e III Respostas: a. I e II Corretab. II e III c. I e III d. I, II e III e. Nenhuma das afirmativas está correta. Feedback da resposta: Resposta: B Comentário: Afirmativa II: Quanto maior a concentração das moléculas de soluto e quanto maior o caminho que a luz percorre, maior será a absorbância, ou seja, mais luz será absorvida. Afirmativa III: A espectrofotometria é muito utilizada para quantificar analitos em amostras biológicas. É um dos principais métodos analíticos utilizados nas análises clínicas. Pergunta 6 0,4 em 0,4 pontos Correta A Lei de Lambert-Beer estabelece a relação entre a absorbância e a concentração do absorvente na amostra. Assinalea alternativa incorreta a respeito da lei de Lambert-Beer. Resposta Selecionada: Corretae. A espessura da amostra, representada pela largura da cubeta que contém a solução, não interfere no valor da absorbância. Respostas: a. A absorbância de uma determinada espécie química é diretamente proporcional à concentração dessa substância na amostra quando está sob incidência de um feixe luminoso de determinado comprimento de onda. b. O coeficiente de absortividade molar indica o quanto de luz, de determinado comprimento de onda, um mol de determinada substância pode absorver. c. Verifica-se uma relação linear entre absorbância e a concentração da espécie química absorvente, e uma relação logarítmica entre a transmitância do absorvente e a concentração. d. Para se calcular a concentração de determinada substância a partir da sua absorbância é preciso antes descontar a absorbância do solvente e de outras espécies químicas que podem estar presentes na solução. Corretae. A espessura da amostra, representada pela largura da cubeta que contém a solução, não interfere no valor da absorbância. Feedback da resposta: Resposta: E Comentário: A alternativa E está incorreta pois a largura da cubeta influi no valor da absorbância pois, quanto maior o caminho da luz, mais luz será absorvida pelas moléculas. Pergunta 7 0,4 em 0,4 pontos Correta A determinação da absorbância a 400 nm, de uma espécie química, é de 0,840. Sabendo que a absorbância do branco foi de 0,120, e o coeficiente de absortividade molar, de 2·103 L·mol-1·cm-1, qual a concentração dessa espécie química na amostra? Considere a largura da cubeta 1 cm. Resposta Selecionada: Corretab. 3,6·10-4 mol/L. Respostas: a. 4,2·10-4 mol/L. Corretab. 3,6·10-4 mol/L. c. 0,42 mol/L. d. 0,36 mol/L. e. 0,84 mol/L. Feedback da resposta: Resposta: B Comentário: Os dados fornecidos no enunciado foram: Absorbância da amostra: A = 0,840 Absorbância do branco: A = 0,120 Absorbância, da amostra, descontado o branco: A = 0,840-0,120 = 0,720 Coeficiente de absortividade molar: ɛ = 2·103 L·mol-1·cm-1 O cálculo deve ser realizado utilizando-se a lei de Lambert-Beer: q7comentário.JPG Pergunta 8 0,4 em 0,4 pontos Correta Duas amostras de urina apresentam pH 4,0 e 6,0, respectivamente. Assinale a alternativa correta a respeito dessas amostras. Resposta Selecionada: Corretad. A concentração de íons H+ nas amostras de pH 4,0 e de pH 6,0 é, respectivamente, de 10-4 mol/L e 10-6 mol/L. Respostas: a. A amostra de pH 4,0 é ácida e a amostra de pH 6,0 é básica. b. A concentração de íons H+ na amostra de pH 6,0 é maior do que a concentração de íons H+ na amostra de pH 4,0. c. A única maneira de se determinar o pH de uma amostra de urina é com o uso do pHmetro. Corretad. A concentração de íons H+ nas amostras de pH 4,0 e de pH 6,0 é, respectivamente, de 10-4 mol/L e 10-6 mol/L. e. As duas amostras de urina apresentam pH básico. Feedback da resposta: Resposta: D Comentário: O pH pode ser definido como o valor negativo do logaritmo da concentração molar dos íons H+ em solução, ou seja: pH = -log[H+]. Portanto, na amostra de pH 4,0, temos: q8comentário.JPG Pergunta 9 0,4 em 0,4 pontos Correta Os indicadores ácido-base são muito utilizados para se determinar o pH aproximado de uma amostra, de maneira rápida e acessível. A respeito dos indicadores ácido-base, assinale a alternativa correta. Resposta Selecionada: Corretac. As fitas de pH possuem pequenos quadrados impregnados de diferentes indicadores ácido-base secos. A leitura das diferentes cores permite a dedução do pH aproximado da solução. Respostas: a. O papel de tornassol assume a cor avermelhada em pH básico. b. Os indicadores ácido-base são constituídos de um ácido fraco em equilíbrio com sua base conjugada, ou de uma base fraca em equilíbrio com seu ácido conjugado. Necessariamente, o ácido e a base que estão em equilíbrio apresentam a mesma cor. Corretac. As fitas de pH possuem pequenos quadrados impregnados de diferentes indicadores ácido-base secos. A leitura das diferentes cores permite a dedução do pH aproximado da solução. d. Todos os indicadores ácido-base apresentam ponto de viragem no mesmo pH, portanto, apenas indicam se determinada amostra é ácida ou básica. e. Se, ao adicionar fenolftaleína a uma solução, não houver mudança de cor, significa que a amostra tem pH neutro. Feedback da resposta: Resposta: C Comentário: Cada indicador tem seu ponto de viragem de cor em uma faixa de pH específica. Portanto, ao se submeter a amostra aos diferentes indicadores contidos na fita de pH, é possível deduzir o pH aproximado da amostra. Pergunta 10 0,4 em 0,4 pontos Correta Além de vários fluidos biológicos serem soluções tamponadas, também é muito comum o uso de soluções tampão durante os procedimentos laboratoriais. A respeito das soluções tampão, avalie as afirmativas a seguir e assinale a alternativa correta. I. Soluções tampão são soluções aquosas que apresentam pH neutro, independentemente da adição de ácidos ou de bases. II. O sangue é uma solução tamponada, o que garante que seu pH seja mantido entre 7,35 e 7,45. O principal sistema tampão do sangue baseia-se na dissociação do ácido carbônico em íons H+ e HCO3-. III. Soluções tampão são úteis quando se necessita adicionar ácidos ou bases na amostra, e não se deseja que haja grande alteração do pH desta. Estão corretas somente as afirmativas: Resposta Selecionada: Corretab. II e III Respostas: a. I e II Corretab. II e III c. I e III d. I, II e III e. Nenhuma das afirmativas está correta. Feedback da resposta: Resposta: B Comentário: Afirmativa I: O pH do sangue é ligeiramente alcalino e mantido pelo sistema tampão ácido carbônico/bicarbonato. O gás carbônico (CO2) proveniente da respiração sofre ação da anidrase carbônica, que o converte em ácido carbônico (H2CO3). Esse ácido carbônico dissocia em H+ e HCO3-, e o equilíbrio da dissociação depende da concentração de íons H+ em solução, o que garante que o pH seja mantido na faixa adequada. Afirmativa III. Soluções tampão conseguem manter o pH em determinada faixa, mesmo quando são adicionados ácidos e/ou bases às mesmas. Sábado, 12 de Junho de 2021 16h51min47s GMT-03:00 OK