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Inaê Fernanda de Luccas Magalhães Lima RA: 8064525 – 6º Semestre Biomedicina INTRODUÇÃO AO HEMOGRAMA Um hemograma completo é um exame médico que avalia as células que constituem o sangue. Nele podem ser obtidas muitas informações, tais como: o número de cada tipo de célula do sangue (dividido em 3 tipos de glóbulos vermelhos, glóbulos brancos e plaquetas), sua forma e tamanho e a concentração média de hemoglobina. Deste modo, é possível avaliar a condição geral de saúde de uma pessoa. As células sanguíneas analisadas por hemograma completo são divididas em três categorias: O Leucograma é a porção do exame que analisa as células da série branca, ou seja, os leucócitos (ou glóbulos brancos), neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos que tem uma importante função relacionada ao sistema imunológico, combatendo infecções e microrganismos. O Eritrograma, diz respeito à série vermelha das células sanguíneas, que são as hemácias (ou eritrócitos, conhecidos como glóbulos vermelhos). Nessas análises, foram medidos o volume e o tamanho das hemácias, o peso e a concentração de hemoglobina, proteína presente nas hemácias responsável pelo fornecimento de oxigênio. Por fim, o último tipo de célula avaliada no hemograma são as plaquetas. Essas células sem núcleo são essenciais para a coagulação do sangue e podem parar o sangramento por aglomeração. Coleta de sangue com agulha e seringa 1.1 Materiais utilizados - EPI – luva, jaleco e máscara; - Luva - Algodão - Álcool 70% - Seringa - Agulha - Garrote - Blood Stop (curativo) 1.2 Procedimentos Para realização da coleta sanguínea com seringa e agulha é importante ficar atentado a metodologia e segui-la rigorosamente. O primeiro passo é colocar a agulha na seringa sem retirar a capa protetora, ajuste o garrote e escolha a veia, em seguida faça a assepsia do local com algodão umedecido em álcool 70% ou álcool iodado 1%, após desinfetar não toque mais no local. Retire a capa da agulha e realize a punção, solte o garrote assim que o sangue começar a fluir na seringa, colete aproximadamente 10ml de sangue, oriente o paciente a pressionar com algodão a parte puncionada, mantendo o braço estendido e sem dobrar. Separe a agulha da seringa e descarte no Desparck, logo após transfira o sangue para o tubo adequado, no caso foi utilizado o tubo EDTA, deixe que o sangue escorre delicadamente pela parede do tubo, a fim de evitar hemólise da amostra. E por fim descarte a seringa no mesmo local da agulha. https://www.infoescola.com/exames-medicos/eritrograma/ Em relação a coleta com tudo a vácuo o procedimento de coleta será o mesmo o que diferencia é o material usado. Os tubos a vácuo podem ser feitos de vidro ou plástico e possuem vários tamanhos, cada um é fabricado para receber um volume específico de sangue. Os tamanhos variam ente 3, 5, 7 e 10ml e suas tampas são codificadas através de cores, o que ajuda a identificar qual tipo de anticoagulante será encontrado no mesmo 1. ESFREGAÇO SANGUÍNEO 1.1 Materiais: - EPI – luva, jaleco e máscara; - Lâmina de microscopia, de vidro e com uma borda fosca e limpa; - Lâmina ou lamínula(outra lâmina de vidro ou de plástico, um pouco menor que a lâmina onde será feito o esfregaço); - Amostra sanguínea; 1.2 Procedimentos Para realizar um exame microscópico satisfatório e importante confeccionar um esfregaço de boa qualidade, ele deve ser fino, regular, contínuo, livre de falhas e paradas, sem falhas na cauda, para que aja boa distribuição das celular. Uma camada única sobre a superfície da lâmina garante que o elemento celular sanguíneo, quando fixado e tratado com corante, adquira morfologia e coloração adequada para o estudo microscópico detalhado. O primeiro passo para realizar esfregaço é fazer a limpeza de duas lâminas com gaze, para retirar resíduos de gordura ou outros materiais. Em seguida com um capilar ou pipeta, deve-se colocar uma gota de sangue de 2cm aproximadamente, e usar a outra lâmina como extensora. Encostar a lâmina extensora na gota de sangue usando um ângulo de 45º, fazer um leve movimento para trás, com o intuído de que o sangue se difunda ao longo da borda da lâmina. Faça um movimento uniforme e contínuo para frente e espere o esfregaço secar completamente. 2. Coloração das lâminas 2.1 Materiais: - Lâminas contendo o esfregaço; - Água deionizada; - Kit de panótipo rápido (Solução 1 – Solução de Ciclohexadienos a 0,1%; Solução 2 – Solução de Azobenzenosulfônicos a 0,1%; Solução 3 – Solução de Fenotiazinas a 0,1%). - Cuba de Coplin 2.2 Procedimento A técnica de coloração do esfregaço utiliza corantes hematológicos, podendo ser classificados em corantes ácidos: onde os sais ácidos são corados e a base é incolor (eosina), corantes básicos: sais com base corada e ácido incolor (azul de metileno) e corantes neutros: apresentam base e ácidos corado. Um corante muito utilizado na hematologia é o panótico que é baseado no princípio de coloração rápida de Romanowsky, a técnica consiste na ação de um fixador no caso o Metanol, e duas soluções corantes, eosina como corante ácido e azul de metileno como básico. É necessário mergulhar a lâmina do esfregaço nos reagentes utilizados por 60 segundos cada, logo após deixar secar em temperatura ambiente para realizar a leitura no microscópio com objetiva de 100x (é necessário fazer uso do óleo de imersão). 3. Resultados e conclusão A coleta sanguínea é essencial para realizar vários exames laboratoriais, o sangue coletado foi usado para confeccionar as lâminas de esfregaço. O principal objetivo do esfregaço é avaliar as anormalidades morfológicas de eritrócitos, neutrófilo ou demais leucócitos, usado também para contagem de plaquetas e pesquisas hemoparasitas. 4. Referências HOFFBRAND, A. V.; MOSS, P. A. H. Fundamentos em Hematologia. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2013. DEL GIGLIO, A.; KALIKS, R. Princípios de hematologia clínica. Barueri, SP: Manole, 2007. Estridge, Barbara H. Técnicas básicas de laboratório clínico 5ed- Porto Alegre: Artmed, 2011 Bain, Barbara J. Células sanguíneas: Um guia prático/ Barbara J. Bain 4ed- Porto Alegre: Artmed, 2007 DOSAGEM DE HEMOGLOBINA (Hb) Materiais Para o exame: - Padrões de concentrações conhecidas (utilizamos a concentração de 10 g/dl) - Líquido de Drakin: Bicarbonato de Sódio - 1,0g - Cianeto de Potássio - 52,0mg - Ferrocianeto de Potássio - 198,0mg - Água destilada - 1000,0ml 1. Procedimentos 1º passo: em um tubo de ensaio pipetar 5,0 ml de reativo de Drakin 2º passo: colocar 20µl de sangue total (homogenizado) 3º passo: incubar 10 minutos á temperatura ambiente 4º passo: fazer a leitura em espectrofotômetro em 540 nm zerando o aparelho com Drakin 5º passo: utilizar um cálculo específico determinado na bula do teste: hemoglobina (g/dL)= abs do teste/ abs do padrão x 10. 6º passo: obter um valor de resultado e comparar com os valores de referência (Homens: de 14 a 18 g/dl; Mulheres: de 12 a 16 g/dl; Crianças até um ano: 11 a 12 g/dl; Recém-Nascido: de 14 a 19 gIdl). 2. Resultados e conclusão O exame de dosagem de hemoglobina é muito importante para o cuidado e “manutenção” da nossa saúde. Todos os alunos fizeram, participaram desse teste e obtiveram êxito (mesmo que alguns tenham feito mais de uma vez para conseguir obter o resultado esperado). Foi muito bom pra todos, pois nunca havíamos tido contato direto com esse tipo de exame e, como vamos trabalhar com isso no futuro, é sempre bom praticar e aprender melhor. Conclui-se que esse exame é de extrema importância e sem ele seria muito mais difícil obter certos diagnósticos e tratamentos a partir do mesmo. Todos os estagiários gostaram muito dessa prática. 3. Referências ARCHANGELO, PROF. POP - AULA PRÁTICA DE HEMOGRAMA (ERITROGRAMA), disponível em: http://www.profbio.com.br/aulas/hemato1_pop_01.pdfLEMOS, MARCELA. Hemoglobina alta ou baixa: o que significa e valores de referência, disponível em: https://www.tuasaude.com/hemoglobina/ HEMATÓCRITO O hematócrito também pode ser denominado Ht ou Hct e é considerado um parâmetro laboratorial que indica a percentagem de glóbulos vermelhos no volume total de sangue. É muito importante para a identificação e diagnosticar certas condições, como anemia. Além dos glóbulos vermelhos, o sangue também contém glóbulos brancos e plaquetas. Quando as células sanguíneas amadurecem, são produzidas e liberadas no sistema circulatório. Os glóbulos vermelhos representam cerca de 40% do volume sanguíneo. Contém hemoglobina, uma proteína que transporta oxigênio dos pulmões para todos os tecidos do corpo. 1. Materiais - Tubo capilar - Massa ou fogo para tapar um dos lados do capilar - Mini Centrífuga - Régua específica 2. Procedimentos 1º passo: Preencher um tubo capilar com sangue até ¾ da sua altura; 2º passo: Fechar uma das extremidades com massa apropriada ou na chama de uma lamparina; 3º passo: E, por fim, colocar o capilar na centrífuga e programar o tempo e velocidade indicada para a análise ( utilizamos 1000rpm por 5 minutos); 4º passo: fazer a interpretação do resultado em uma escala de leitura onde se limitam as marcas de 0 a 100, observando na escala o limite de separação da massa dos eritrócitos com o plasma; 5º passo: emitir o resultado que é expresso em porcentagem de eritrócitos em relação ao sangue total. 3. Resultados e conclusão http://www.profbio.com.br/aulas/hemato1_pop_01.pdf https://www.tuasaude.com/hemoglobina/ Essa prática teve um bom resultado, pois todos os alunos participaram e seguiram corretamente todas as orientações da professora. Mesmo com poucas dificuldades no começo, todos tiveram bons resultados. Esse é um exame/teste muito importante e muito usado nos laboratórios, hoje em dia. 4. Referências Manual de Diagnóstico Laboratorial das Coagulopatias Hereditárias e Plaquetopatias. Ministério da Saúde, 2010. REIS, P.R.M. et all. Avaliação da determinação do tempo de protrombina em amostras de sangue colhidas por duas diferentes técnicas. Bras Patol Med Lab, v. 41, n. 4, p. 251-5. Agosto, 2005. CONTAGEM DIFERENCIAL DE LEUCÓCITOS 1. Materiais - Sangue; - Microscópio; - Esfregaço corado com o panótico; - Contador; - Óleo de imersão. 2. Procedimento Técnico 1º passo: Colocar a lâmina corada no microscópio; 2º passo: Focar no campo ideal, com a lente x100. Sendo indispensável o óleo de imersão; 3º passo: Realizar a contagem de 100 leucócitos, e marcar a quantidade de cada com a ajuda do contador. Seguir um padrão na hora de observar a lâmina. 3. Avaliação dos resultados Em uma das contagens realizadas foi obtido: -Neutrófilos segmentados: 65% -Neutrófilos bastonetes: 0% -Basófilos: 2% -Monócitos: 11% -Linfócitos: 20% -Eosinófilos: 2% OBS: Os valores obtidos podem ser em porcentagem ou em mm³ Indicando normalidade com base nos seguintes valores de referência: -Neutrófilos bastonetes: 3 a 5% ou 150 a 400/mm³ -Neutrófilos segmentados: 55 a 65% ou 3.000 a 5.000/mm³ -Eosinófilos: 2 a 4% ou 100 a 300/mm³ -Basófilos: 0 a 1% ou 50 a 80/mm³ -Monócitos: 4 a 8% ou 200 a 650/mm³ 4. Conclusão O método de análise do esfregaço sanguíneo através do microscópio é utilizado para identificar doenças relacionadas com a maturação das células e com a produção delas. Através da identificação das células é possível descobrir se o paciente está sofrendo por exemplo de uma leucemia, ou algum outro distúrbio proveniente da falta de homeostasia celular.
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