GL, UR, AU) ou ultravioletas (Fosfato UV, URÉIA UV). REAÇÕES CINÉTICAS Classificação: ✓De tempo fixo, contínua e de dois tempos. A velocidade da formação do produto é medida durante um intervalo de tempo pré-estabelecido pelo fabricante, que pode ser em horas, minutos ou segundos. Em alguns casos a formação do produto está diretamente relacionada à temperatura. Devem ser realizadas preferencialmente em aparelhos que possuam cubetas termostatizadas, a fim de se obter resultados mais precisos. TIPOS DE REAÇÕES CLASSIFICAÇÃO DAS REAÇÕES CINÉTICAS De tempo fixo: a velocidade de formação do produto é medida durante um intervalo de tempo fixo. São semelhantes às reações de ponto final, ou seja, a velocidade de formação do produto é medida após um tempo fixo, em que a reação enzimática é interrompida, adicionando um reagente próprio. Contínua: a velocidade da reação é medida em intervalos de tempo pré-estabelecidos. (no mínimo 3 intervalos). CLASSIFICAÇÃO DAS REAÇÕES CINÉTICAS De dois tempos: é uma variação da reação cinética contínua. Nesses casos, faz-se uma leitura em 30s e outra em 90s. Para calcular a [ ] do analito, emprega-se o ΔA obtido entre as leituras fotométricas entre C-B ou D-C. Serve para diminuir o tempo de reação e a influência de interferentes, como é o caso da creatinina. CLASSIFICAÇÃO DAS REAÇÕES CINÉTICAS EXEMPLO PRÁTICO! Kit de AST cinético de ponto final. Duração do teste: cerca de 1h e 30 min. Kit de AST cinético. Duração do teste: cerca de 5 minutos. Como escolher entre um kit de reação de ponto final e cinético?? SITUAÇÃO: Determinação bioquímica de AST/TGO de 200 amostras 200 em 1h e 30min. 200 em 16,7h BRANCO X PADRÃO CÁLCULOS ❖ Absorbância do padrão = 0,36 ❖ Concentração do padrão = 100mg/dL ❖ Absorbância da amostra desconhecida = 0,40 ❖ Concentração da amostra desconhecida = ???? 0,36 --------- 100mg/dL 0,40 ---------- X X = 0,40 x 100 100 (fator) 0,36 0,36 X = 111,0 mg/dL BRANCO E PADRÃO Dúvidas?