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Exercício de Biorreatores 1) Processo Descontínuo-Alimentado (Fed-Batch) Um biorreator está sendo operado de forma descontínuo-alimentada, com uma vazão de alimentação de meio de cultura F. Desejando-se que o tempo de geração (tempo de duplicação) das células se mantenha constante desde o início do cultivo, calcule F como função do tempo. Despreze uma eventual fase lag (de adaptação), o coeficiente de manutenção (mS) e a variação de volume. Esboce a curva de X e S em função do tempo para as primeiras horas de cultivo. Considere válido o modelo de Monod, com velocidade específica de crescimento máxima = 0,5h-1 e KS=0,3g/L. Dados: concentração do substrato limitante na alimentação: 200 g/L; Yx/s= 0,4 g/g. Condições iniciais: V=1000 L; Xo=0,5 g/L; So=2 g/L. 2) Processo Contínuo E. coli é cultivada em estado estacionário (processo contínuo) sob condições aeróbicas com limitação por glicose. Quando o sistema é operado a D=0,2h-1, com concentração de substrato na alimentação de 5 g/L, determine a concentração de glicose no efluente. Considere válidos os modelos de Monod, com µmax=0,25h-1 e KS=100 mg/L, e de Pirt, com YX/S=0,4 g/g e mS = 0. 3) Processo Contínuo Considere um determinado bioprocesso contínuo operando inicialmente em estado estacionário, em um biorreator com 10 litros de volume útil, empregando-se uma vazão de alimentação de meio de 2 L/h. A partir de um determinado instante (t=0h), a vazão da bomba foi alterada acidentalmente para 8 L/h, de maneira a se obter os resultados indicados na tabela abaixo: t (h) 1 2 3 4 5 6 7 X (g/L) 4,02 2,70 1,81 1,21 0,81 0,54 0,36 Tendo em vista tais resultados, calcule as condições vigentes no estado estacionário anterior à alteração na vazão da bomba de alimentação (concentração celular e concentração do substrato limitante). Calcule também a concentração do substrato limitante na alimentação. Admitir válida a cinética de Monod, com KS=0,5 g/L e o Modelo de Pirt com mS=0 e YX/S=0,4 g/g. 4) Operações de bioprocessos Relacione as formas de operações típicas de bioprocessos: descontínuo (A), fed-batch (B), contínuo (C) e perfusão (D) aos respectivos gráficos que indicam comportamentos da concentração de substrato limitante (S), concentração de células (X), volume de reação (V) e concentração de produto (P). 5) Operações de bioprocessos Bioprocessos (processos com microrganismos, células animais ou vegetais) são sistemas multifásicos, operados em biorreatores de diferentes configurações. Como resultado de vários requerimentos da célula viva, em relação ao ambiente (reacional), não existem biorreatores universais. No entanto, algumas regras básicas podem ser estabelecidas para a escolha e projeto de tais equipamentos. Examine as alternativas a seguir sobre a construção e a operação de biorreatores e assinale a única incorreta. (A) O material para a construção de biorreatores deve possuir rugosidade superficial mínima, para evitar depósito de material biológico, que poderá resultar em incrustações, dificultando a limpeza do biorreator. (B) Quanto ao tipo de mistura, biorreatores podem ser agitados mecânica-, hidraúlica- ou pneumaticamente; em todos os casos, devem permitir adequado controle e instrumentação, bem como facilidade na ampliação de escala da produção. (C) A opção preliminar por um determinado tipo de configuração de biorreator depende de uma série de fatores, incluindo o tipo de célula, seu estado metabólico, sua morfologia, o meio de cultivo, o processo bioquímico de conversão e as exigências de esterilização. (D) De acordo com o tipo e forma do agente do bioprocesso, os biorreatores podem ser operados com células livres ou imobilizadas. No primeiro caso, a opção deve recair obrigatoriamente em um sistema não dotado de agitação mecânica, a fim de não comprometer a atividade metabólica das células. 6) Operações de bioprocessos Considere o equipamento principal (o biorreator), onde as conversões irão ocorrer e a biomolécula de interesse será produzida. A mistura reacional, constituída de meio de cultivo e células, será então processada em biorreator, onde deverão ser mantidas as condições ótimas para o agente biológico expressar o máximo de sua atividade metabólica. Neste equipamento, vários fenômenos químicos, físicos e, naturalmente, biológicos ocorrem. Pode-se encontrar uma grande variedade de configurações de biorreatores. Neste contexto, avalie as afirmativas a seguir. I. Os biorreatores agitados mecanicamente são, sem dúvida, os mais estudados e utilizados industrialmente. Embora não necessariamente ideais, tais equipamentos apresentam versatilidade e fornecem bons resultados para uma grande gama de bioprocessos. Isto é particularmente importante para as companhias farmacêuticas, pois diferentes substâncias podem ser produzidas no mesmo biorreator durante o seu tempo de vida. Adicionalmente, os investimentos em capital para a construção destes equipamentos são normalmente recuperados na comercialização do primeiro produto. II. Apesar de sua flexibilidade, pois podem ser empregados para uma grande gama de processos realizados pela célula viva, os biorreatores agitados mecanicamente apresentam certas desvantagens, como por exemplo: demandam grande aporte de energia para a agitação mecânica, tendem a afetar a morfologia celular, são de difícil escalonamento e têm de ser cuidadosamente projetados para produzir adequada mistura e aeração. III. Nos biorreatores agitados pneumaticamente, a potência necessária para se atingir o grau de mistura desejável no sistema reacional, a fim de se produzirem altas taxas de transferência de massa e calor, é suprida pela energia cinética do líquido, por meio de sua circulação pelo movimento das bolhas gasosas, isto é, pneumaticamente. Este tipo de biorreator, conhecido na literatura inglesa como airlifit (com circulação interna ou externa) ou coluna de bolhas (bubble column), é aplicado a sistemas biológicos suscetíveis às forças cisalhantes, tão intensas em biorreatores agitados mecanicamente. Assinale: (A) se apenas a afirmativa I estiver correta. (B) se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas. (C) se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas. (D) se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas. (E) se todas as afirmativas estiverem corretas. 7) Operações de bioprocessos Bioprocessos podem ser operados por batelada simples, batelada alimentada e processo contínuo. A eleição por uma destas formas de operação deve ser feita criteriosamente, levando-se em conta, fundamentalmente, a fisiologia do agente do bioprocesso. Com base nestas informações, considere as afirmativas a seguir. I. A operação de um bioprocesso contínuo em um reator de mistura completa sem reciclo celular resulta, no estado estacionário, em constante modificação na composição química do meio sendo retirado. II. Em um cultivo contínuo com reciclo celular em estado permanente, um aumento da vazão de alimentação levará o cultivo a um estado transiente, antes que um novo estado permanente seja atingido. III. Em um cultivo contínuo sem reciclo celular em estado permanente, uma diminuição da vazão de alimentação levará o cultivo a um estado transiente, antes que um novo estado permanente seja atingido. Assinale: (A) se apenas a afirmativa I estiver correta. (B) se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas. (C) se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas. (D) se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas. (E) se todas as afirmativas estiverem corretas. 8) Operações de bioprocessos Os processos levados a cabo por microrganismos podem ser operados em batelada simples, batelada alimentada e continuamente. A eleição de uma destas formas de operação deve ser feita criteriosamente, levando-se em conta, fundamentalmente,a fisiologia do agente do bioprocesso. Com base nestas informações, considere as alternativas a seguir e indique a única incorreta. (A) A batelada alimentada visa contornar os clássicos fenômenos de inibição por substrato, resultando em um aumento nos níveis de produção de substâncias produzidas por fermentação. (B) A batelada simples caracteriza-se pela manutenção das condições ambientais durante o curso de um bioprocesso. As concentrações dos componentes do meio, no estado estacionário, permanecem constantes. (C) Em uma operação de um processo contínuo em um biorreator de mistura completa sem reciclo celular, no estado estacionário, as condições ambientais permanecem constantes. (D) Em um cultivo contínuo com reciclo celular em estado permanente, um aumento da vazão de alimentação levará o cultivo a um estado transiente, antes que um novo estado permanente seja atingido. (E) Em um cultivo contínuo sem reciclo celular em estado permanente, uma diminuição da vazão de alimentação levará o cultivo a um estado transiente, antes que um novo estado permanente seja atingido. 9) Balanço de massa de células no cultivo A partir do balanço de massa de células nos cultivos fed-batch e contínuo é obtida a mesma equação dX/dt = (µ - D).X. Porém, para chegar a essa equação nos 2 cultivos são aplicados raciocínios matemáticos diferentes. Nesse sentido, desenvolva matematicamente os cálculos para o processo fed-batch e contínuo partindo da equação abaixo: Variação de massa celular = (Massa celular que entra - Massa celular que sai) + (Massa celular que é produzida) - (Massa celular que é consumida/morta) Fed-batch Contínuo Final da equação: dX/dt = (µ - D).X
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