RESUMAO BROMATOLOGIA - UNIDADE 1

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BROMATOLOGIA - Unidade 1 
Disciplina direcionada para métodos e técnicas de determinação da composição químicas dos alimentos e 
avaliação da qualidade desses baseada na Agência Nacional de Vigilância Sanitária, do Ministério da Saúde 
e do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. O termo bromatologia significa Ciência dos 
Alimentos. 
A fiscalização dos alimentos e de muitas importâncias uma vez que assim é garantido a qualidade dos 
alimentos, bem como sua conservação e higienização correta. A bromatologia estuda a composição química 
dos alimentos, aspectos físicos, potenciais tóxicos, ação no organismo, valor nutricional, adulterastes, 
contaminantes entre outros desde a produção, coleta, transportes até o consumidor final mantendo controle 
rigoroso de qualidade do alimento. 
ALIMENTOS 
Alimento fisiológico: Material nutritivo introduzido no organismo e que preenche as necessidades de 
manutenção, crescimento, funcionamento e restauração dos tecidos (OMS, 1984, p. 20). 
Alimento comportamental: Material biológico identificado pelo indivíduo ou pelo grupo como sendo 
próprio para cumprir as funções fisiológicas acima descritas e geralmente consumido para esse fim, ou às 
vezes por motivos sociais ou outros motivos (religiosos, culturais etc.) (OMS, 1984 p. 20). 
Os alimentos que causam mal, gerando a intoxicação alimentar estão relacionados a qualidade do alimento, 
em alguns casos a indústria precisa realizar um recall de certo lote por uma característica impropria. 
Alimentos são divididos em “Alimentos aptos para consumo” e “Alimentos não aptos para consumo” de 
acordo com as leis regulatórias vigentes, possuindo ou não substâncias autorizadas ou não autorizadas para 
consumo seguro. 
- Alimentos contaminados: contém agentes vivos, vírus, bactérias, parasitas e também substâncias 
químicas minerais ou orgânicas (metais pesados, defensivos agrícolas) independente da toxicidade e/ou 
componentes naturais tóxicos (nitrato) em razões maiores do que o permitido pela legislação. 
- Alimentos alterados: deterioração organolépticas (cor, odor, textura, sabor) por causas naturais, 
químicas, físicas ou biológicas. (Odor carne em deterioração, latas estufadas, fermentação mel). 
- Alimentos falsificados: iguais a um alimento legítimo porém não são fabricados pelos fabricantes 
autorizados, e mesmo tendo qualidade igual ou superior não são aptos para consumo uma vez que a 
fiscalização não ocorre devidamente em muitos casos. 
- Alimentos adulterados: alimentos com seus princípios ativos retirados ou substituídos parcialmente ou 
totalmente por outro estranho a sua formulação. A adição de qualquer substância que vise dissimulação, 
ocultação das alterações e escassez de qualidade da matéria prima e até os erros cometidos durante a 
elaboração do alimento entram nesse caso. 
Ex.: pimenta do reino com folhas, vinagre e suco de limão com ácido sulfúrico, leite com água e até giz, 
amido, goma, dextrina, glicose, vinho com açúcar. 
ANÁLISE DE ALIMENTOS, CLASSIFICAÇÃO E ESTATÍSTICA 
A análise dos alimentos é primordial para órgãos governamentais, indústrias universidades e institutos de 
pesquisa em prol da qualidade, processos, matéria-prima, determinação de validade, venda e distribuição. 
- Qualidade: checagem de matéria-prima até o produto final. 
- Fiscalização: métodos analíticos precisos e exatos para apurar e controlar o cumprimento da lei. 
- Pesquisa: explorar a composição dos alimentos, responsável por desenvolver, adaptar e atualizar os 
métodos analíticos para que fiquem cada vez mais exatos, precisos, sensíveis, rápidos e baratos. 
Métodos de análise: existem 2 tipos de análises, a qualitativa e quantitativa. Primeira serve para 
determinar se existe presença de algum componente naquela porção de alimento sem levar em consideração 
a quantidade. Respostas são positiva, negativa, reagente ou não reagente. 
Algumas pesquisas desse tipo são: 
• Prova de Éber: verifica a presença de gás sulfídrico. 
• Glicídios por cromatografia descendente em papel: identifica os tipos de açúcares presentes. 
• Reação de Lugol: verifica a presença de amido e dextrina. 
• Corantes artificiais orgânicos por cromatografia ascendente em papel: identificar os corantes artificiais. 
A quantitativa avalia a quantidade de um componente em questão, utilizando o calculo de massa, 
concentração, resultado em valor numérico. 
• Glícidios redutores em glicose: determina a quantidade de açúcares redutores (glicose, frutose, manose, 
galactose e lactose). 
• Extrato etéreo: verifica a concentração de gorduras totais. 
• Perda por dessecação: determina a umidade. 
• Determinação de protídeos pelo método de Kjeldahl: determina a concentração de proteína. 
A análise dos alimentos e realizada para determinas a composição de um alimento de forma específica ou 
diversa. Por exemplo, porção centesimal que abrange quantidade de determinado nutriente em 100 gr do 
alimento. 
Análise é feita a partir de 2 métodos: convencional ou instrumental. Na primeira utiliza apenas vidrarias e 
reagente sem equipamentos sofisticados, utilizado para gravimetria e volumetria. Já o segundo utiliza 
recursos mais sofisticados, sempre que possível é escolhido pela sua rapidez e praticidade. 
O método de análise dos alimentos e algo que deve ser escolhido de forma muito atenta, uma vez que cada 
alimentos tem uma composição e são muito complexos, em alguns casos um tipo de métodos pode não 
fornecer dados tão confiáveis quanto outro, precisando ser levado em conta alguns pontos: 
- Quantidade relativa do componente desejado: quantidade do componente x peso da amostra. 
Componentes podem ser classificados como maiores sendo + de 1%, menores sendo 0,01% a 1% e traços 
(ppm e ppb). Para os maiores o método convencionais pode ser utilizado, e para menores seria necessário 
métodos mais específicos e sofisticados, instrumental, 
- Exatidão requerida: quanto o componente está presente e mais de 10% da amostra o convencional 
oferece 99,9% de exatidão, menos que isso é aconselhável o método mais sofisticado, instrumental. 
- Composição química da amostra: complexidade da amostra verificada, ou seja, quantidade de certa 
substância com potencial de interferência. Para esses deve-se utilizar a separação dos interferentes em 
algumas situações antes da análise. 
- Recursos disponíveis: apesar da determinação do melhor motoro deve-se levar em consideração o custo 
deste, quando muito complexo, ou dependendo do ripo de reagente, necessidade pessoal da análise, este 
pode ser um fator limitante para a análise, precisando então utilizar outro métodos. 
Ambos os métodos (convencional ou instrumental) são análises quantitativas, depende de uma medida física 
porém está normalmente é realmente reconhecida no momento da amostragem: 
- Amostragem: obtenção de parcela propicia e pequena do alimentos mas com representatividade 
adequada do conjunto da amostra. A dificuldade da coleta depende da homogeneidade da amostra. Para as 
próximas etapas já e necessário conhecer a quantidade da amostra. 
- Sistema de processamento da amostra: preparação da amostra antes de análise (moagem! Filtração de 
partículas, retirada de bases). 
- Reação química ou mudança física: para obtenção de uma solução própria para análise pode ser 
utilizada água ou solvente orgânico para extração do componente de importância. Essa substância 
utilizada não pode interferir nos demais processos e nem na amostra. 
- Separação: processo onde é retirada qualquer substância que é capaz de interferir no momento da análise. 
Esse processo pode ser realizado de duas maneiras, uma e a transformação dessa substância interferente 
em uma espécie inócua (que não causa nenhum dano) através de oxidação, redução ou complexação. E a 
segunda e isolando fisicamente a substância, transformando em uma fase separada pode meio de extração 
com solvente e cromatografia. 
- Medidas: qualquer processo analítico quantitativo é planejado para gerará uma quantidade, dessa forma 
nesseprocesso é gerada a quantidade relativa de certo componente na amostra. 
- Processamento de dados e avaliação estatística: última etapa do processo, garante o resultado da 
maneira mais próxima possível da realidade possibilitando o conhecimento de qualquer grau de incerteza 
dele atrás de médias, desvios e variações tudo para indicar com a maior preciso possível o quão exato é 
aquele valor referente a determinado estudo. 
AMOSTRAGEM, COLETA E GARANTIA DE QUALIDADE DE AMOSTRA 
O estudo para composição de cada alimento é realizado a partir de uma amostra pequena comparada ao 
material total do estudo, de forma que pode ocorrer algumas variações no resultado final, sendo assim é 
necessário algumas considerações na seleção da amostragem. 
- Finalidade da inspeção: Qual objetivo da inspeção do alimento? Para aceitação ou rejeição? Avaliação 
de qualidade média do alimento? Uniformidade? Tudo isso deve ter verificado. 
- Natureza do lote: Tamanho, forma de armazenamento, divisão em sublotes. 
- Natureza do material em teste: homogeneidade, tamanho unitário (porção ou unidade), todo contexto de 
produção e o custo da análise deve ser levado em consideração. 
- Natureza dos procedimentos de teste: significância da análise, se os procedimentos são destrutivos, 
tempo para realização e recursos financeiros. 
A amostragem é uma sequência de processos que gente que a amostra seja representativa. A junção de 
incrementos irá gerar uma amostra bruta que deverá ser reduzida através de processos conduzidos que 
assegure a representatividade da substância, gerando a amostra de laboratório. Essa redução que será 
homogeneizado, pesada e analisada. 
Resumindo: COLETA AMOSTRA BRUTA, ELABORAÇÃO AMOSTRA DE LABORATÓRIO, 
PREPARO DA AMOSTRA PARA ANÁLISE. 
Aspectos fundamentais para amostragem: amostra deve representar a composição mais exata possível 
do produto comparado ao universo e não deve causar prejuízos econômico significativos, e em uma possível 
análise de contraprova a segunda deve garantir a representatividade da primeira. 
- Coleta da Amostra Bruta: replicação em menor proporção do universo considerado repetindo 
precisamente esse universo. 
 * amostras fluidas: líquidas ou pastosas, coleta após homogeneização em frascos de mesmo volume, 
coleta do início, meio e fundo do recipiente. 
 * amostras sólidas: materiais que diferente em textura, densidade e tamanho das partículas, amostra 
deve ser constituídas por várias porções de pontos diferentes, depois moagem e homogeneização. 
A quantidade coletada poderá depender do acondicionamento do matéria, granel, embalado e tamanho de 
lote. Embalagem única pode ser utilizada total, lotes maiores de 10% a 20% da embalagem ou 5% a 10% do 
peso do alimento. 
- Redução da amostra bruta, preparo da amostra de laboratório: 
 * alimentos secos: pó ou granulados, redução pode ser feita manualmente ou por quarteamento (divisão 
em grupos de mesmo tamanho). 
 * alimentos líquidos: agitação para mistura do líquido, retirada do inícios, meio e fundo do 
reservatório, e misturar novamente. 
 * alimentos semisólidos: queijo e chocolate, ralar e realizar quarteamento. 
 * alimentos úmidos: carne, peixe, vegetais, picar/moer e misturar, caso necessário realizar quarteamento e 
manter a amostra sob refrigeração. 
 * alimento semiviscoso ou pastoso: pudim e molhos, liquidificar e separar para análise. Atentar-se a 
emulsões pois elas podem dividir em duas fases quando liqüidificadas (molhos para salada). 
 * alimentos líquidos contendo sólidos: compostas de frutas, enlatados, vegetais em salmoura, 
liquidificar e separar para análise. 
 * alimentos com emulsão: manteigas e margarinas, aquecer até 35 graus celsius em recipientes com 
tampa e depois homogeneizar agitando, segregar posteriormente a quantidade necessária para amostra. 
 * frutas: maiores cortadas longitudinalmente e transversalmente (4 partes), as duas opostas devem ser 
descartadas e as demais liqüidificadas para homogeneização, as menores totalmente liqüidificadas. 
- Preparo da amostra para análise: Existem 3 maneiras de realizar o preparo da amostra para análise. 
 * desintegração mecânica: secos e úmidos, para secos moagem em moinho Wiley, para úmidos 
moedores de carnes ou liquidificador. 
 * desintegração enzimática: para amostras vegetais através das celulases, outro alimentos que pode 
utilizar o processo são de alto peso moléculas (proteínas, polissacarídeos). 
 * desintegração química: utilização de agentes químicos como ureia, piridina, detergentes, serve para 
solubilizar os componentes. 
Conservação da amostra: para resultados mais precisos e corretos as amostras devem ser frescas e 
analisadas o mais rápido possível, garantido a composição original, em casos de não possibilidade de manter 
os processos acima, seguir os métodos abaixo: 
- Inativação enzimática: conservar em estado natural os componentes da amostra. 
- Diminuição das mudanças lipídicas: durante a preparação das amostrar pode ocorrer essa mudança, 
sendo assim resfriar ou congelar rapidamente a amostra caso está não vá ser usada na sequência. 
- Controle do ataque oxidativo: manter em baixas temperaturas durante a estocagem reduzindo a 
mudança da composição. 
- Controle do ataque microbiológico: existem vários métodos para este caso, congelamento, secagem, 
conservadores e até mesmo a combinação deles. A escolha vai depender do tipo de alimento. 
Resumindo, as amostras devem ser armazenadas de forma que não ocorra qualquer tipo de alteração nelas. O 
tipo de recipiente pode ser virado nos casos de alimentos gordurosos, úmidos e líquidos e plástico para 
líquidos. 
É essencial que esse recipiente seja envolto em invólucro de plástico ou papel resistente lacrado para evitar 
alteração da amostra, alem de vedação hermética pra que seja evidente qualquer ruptura do lacre. 
Garantia de confiabilidade dos resultados: Essa garantia irá depender de alguns fatores como 
especificidade, exatidão, precisão e sensibilidade. 
- Especificidade: relacionado a eficiência do método para mensurar o composto de relevância, 
independente da existência de substâncias interferentes, não sendo computado ou sendo descontado. 
- Exatidão: mensura quão próximo o resultado da análise está do resultado já definido real. Resultado 
obtido é comparado com outro já definido como exato através de outros métodos de análise. 
- Precisão: definida pela variação de valores obtidos na medida do composto pesquisado, desvio padrão e 
média, utilizando amostras de contraprova. 
- Sensibilidade: considera menor quantidade do componente, onde é possível mensurar sem erro. 
Proporção entre sinal e ruído 2:1. 
Pontos críticos do controle de qualidade em análises: pontos que são importantes e podem desnatas a 
análise dos alimentos. 
- Coleção e preparação da amostra: cuidado com a amostragem. Tamanho e método de coleta segue 
padrões determinados para garantir a sua representatividade, devemos também nos atentar pois o alimento 
e um produto perecível podendo estragar ou sofrer mudanças no processo (perda umidade, decomposição, 
separação de fases, ataque insetos, contaminação) e para o controle disso deve ser seguido o processo de 
amostragem correto (a documentação, o controle de contaminação, a estocagem e o transporte do alimento 
ou da amostra para o laboratório). 
- Método de análise: além de prático, rápido e econômico o método deve ser exatos preciso, específico e 
sensível. 
 * métodos oficiais: realizados de acordo com a legislação vigente, vistoriado por agência reguladoras. 
 * métodos padrões ou de referência: utilizado pela maioria dos laboratórios quando não existe 
método oficial, estudos colaborativos. 
 * métodos rápidos: utilizados para complementar um teste exato para determinas se existe ou não 
necessidade de método adicional. 
 * métodos de rotina: modificação dos métodos oficiais ou padrões por necessidade. 
 * métodos automatizados: realizado atravésde equipamentos. 
 * métodos modificados: adaptação dos métodos oficiais ou padrões para determinada situação, como 
remover substância interferentes. 
São necessários procedimento para verificar a aplicabilidade dos métodos de rotina, automatizados e 
modificados: 
- Erros na análise de alimentos: erros podem ser determinados, em qual etapa ocorreu o erro, ou 
indeterminados, não podendo ser aferidos ou corrigido. No primeiro caso existe uma lista de motivos 
como erro de métodos, operacionais, pessoais e oriundos de instrumentos e reagentes. 
- Instrumentação: instrumentos tendem a desgastar e deteriorar com o tempo, alem da falta de 
manutenção, calibragem e padronização a tecnologia pode apresentar falhas de uso como falta de 
verificação de uma balança analítica. 
- Analistas: habilidade do responsável por analisar uma amostra de maneira precisa e exata os 
componentes presentes em baixíssimas concentrações. As habilidades do analista e mensurada através de 
exames inter e intralaboratoriais de uma mesma amostra, confirmando os resultados de outros 
laboratórios. 
Mensuração da eficiência do método analítico: verificação de qual eficiente foi o método. 
- Material de referência: utilização de um resultado de um método já estabelecido para comparação. O que 
limita esse caso é que alguns alimentos não possuem material de referência. 
- Relações interlaboratoriais: serve para corroborar ou invalidar um novo ou diferente método analítico. 
Teste em diferente laboratórios. 
- Iniciação ao controle de qualidade: os cálculos podem ser utilizados para informar a exatidão ou precisão 
dos resultados gerado pelo novo método proposto. 
UMIDADE E CINZAS EM ALIMENTOS 
Teor de água: quanto mais fresco o alimento mais cheio de água ele é, de forma que o faz estragar mais 
rápido também. 
Esse teor de água e um dos índices mais utilizados em análise de alimento, alem da importância econômica, 
revela o grau de perecibilidade dele. Água em excesso também é um fator importante para o crescimento 
microbiano e instabilidade químicas, fisiológicas do alimento. 
O teor de água pode ser mensurado no alimento porém não é tão possível saber a sua distribuição e se está 
ligada aos demais componentes do alimento, quando está ligada esteja não fica disponível para micro-
organismos evitando a deterioração. 
Formas de água presentes no alimento: 
* Água livre: ligada de maneira fraca aos substratos do alimento, capacita o crescimento microbiológico e 
reações químicas. 
* Água combinada ou ligada: ligação forte sendo assim sua eliminação é mais difícil, não ficando 
disponível para micro-organismos, demorando a deterioração. 
A água livre e a forma mais importante para entendimento da perecibilidade do alimento. 
Umidade: umidade está relacionada a estabilidade, qualidade e compilação, quando excessivo pode 
influenciar: 
* Estocagem: alta umidade deterioração mais rápida e proliferação de fungos, toxinas como aflatoxina. 
* Embalagem: algumas embalagens podem estragar caso o alimento seja muito úmido, o escurecimento dos 
vegetais e brutas desidratadas e oxidação do ovo em pó são maiores na presença de umidade, luz e 
oxigênio pelas embalagens. 
* Processamento: o percentual de umidade é muito importante na fabricação de diversos produtos (trigo). 
Para descobrir a umidade de um alimento e um método denominado dessecação em estufa a 105 graus 
celsius. 
Umidade % = Pi - Pf x 100 
 Pi 
Pi = peso da amostra em gramas 
Pf = peso da amostra seca em gramas (pulverização da amostra, seca em estufa 3 horas 105 graus, 
resfriamento e pesagem). 
É um método que pode ocorrer falhas pela questão da secagem, não evaporação total da água e assim 
podendo resultar em algo incorreto. Além disso produtos com ato temor de açúcar ou gorduras devem ser 
secos em estufas, embalados a vácuo e não exceder a temperatura de 70 graus celsius, o que acaba sendo 
dificultosos pela questão de algumas estufas não chegarem a esse resultado. 
 Outras formas de verificação da umidade dos alimentos: 
* Secagem por radiação vermelha: mais efetivo e repúdio na secagem de amostras individuais, o que pode 
acabar sendo lento quando houver inúmeras amostras. 
* Secagem em fornos de microondas: rápida podem não é um método padrão. Precisa misturar a mostra 
em cloreto de sódio e óxido de ferro. 
* Secagem em dissecadores: vácuo para a absorção de água. Processo demorado, podendo levar até meses 
para um resultado eficiente em temperatura ambiente, aquecido a 50 graus celsius pode acelerar. 
* Destilação: demorado e bastante específico, a vantagem é que a amostra e protegida contra oxidação e 
redução ocorridas na decomposição delas. 
* Métodos químicos: Karl Fischer, método utilizado em amostras não compatíveis com secagem a vácuo, a 
limitação é que a amostra e o reagente devem ser protegidos da umidade atmosférica. A análise pode ser 
feita visualmente pela alteração de cor ou por mensuração eletromagnética. 
* Métodos físicos: absorção de radiação infravermelha, cromatografia gasosa, ressonância nuclear 
magnética, índice de refração, densidade, condutividade elétrica e constante dielétrica. 
Atividade da água: relacionar o teor de água livre com o grau de perecibilidade de um alimento. 
Aa = P 
 Po 
P = pressão de valor de água na amostra 
Po = pressão de valor de água fora do alimento (mesma temperatura) 
Geralmente a atividade da água é determinada de maneira instrumental, e é essencial que a temperatura da 
amostra seja medida por a Aa é influenciada diretamente por ela, maior temperatura da amostra maior a 
aridade da água. 
Valor máximo de atividade da água é 1. Quando dado 1 significa água pura, dessa forma os resultados 
ficaram sempre abaixo disso pelos solutos da composição do alimento. 
Quanto maior a atividade da água maior a perecibilidade do alimento. Alimentos com grau acima de 
0,85 são aqueles preferidos por micro-organismos causadores de doenças a saúde, abaixo de 0,6 são seguros. 
Teor de sais minerais: alimentos possuem cinzas, resíduos inorgânicos não sendo de origem vegetal pu 
animal, podendo ser pelo uso de inseticidas, agrotóxicos, estanho e outros. Esse teor e utilizado para fins 
nutricionais e também de segurança. A determinação do teor de cinzas ocorre pela queima da matéria 
orgânica entre 550 a 570 graus celsius e a sua transformação em CO2, H2O e NO2. 
- Constituição de cinzas: são considerados macronutriente os minerais em quantidade acima de 100 mg 
presentes em alta concentração nos alimentos (K, Na, Ca, P, S, Cl e Mg). Já os abaixo de 100 mg são 
micronutrientes aparecendo em pequenas quantidades nos alimento ( Al, Fé, Cu, Mn e Zn). Traços (Ar, I, 
F, Cr, Co e Cd). O conteúdo das cinzas irá depende do alimento em si e do método utilizado para sua 
determinação. 
- Funções dos minerais no organismo: Rigidez dos ossos, dentes, compostos do metabolismo, enzimas, 
vitaminas e hormônios, comportamento dos íons mantendo equilíbrio osmótico, equilíbrio ácido-base, e 
são partes dos tecidos brancos. Sua deficiência pode gerar doenças. 
- Determinação dos minerais nos alimentos: é um indicativo de propriedades dos alimentos, exemplo, 
índice de refinação para açúcar e farinhas, propriedades funcionais, conteúdo de fibras em geleias e 
qualidade. A quantidade de cinzas insolúveis em ácido pode significar areia nos alimentos. Essa 
determinação também serve para verificar os minerais que devem ser ingeridos pela dieta e aqueles que 
são maléficos a saúde, indicam também a pureza ou adulteração de determinado alimento. 
A técnica para quantidade de cinzas normalmente é por incineração da amostra seca com temperatura de 500 
a 600 graus celsius em mufla (estufa de alta temperatura). 
• 525 oC: frutas e seus produtos derivados, vegetais, carnes, açúcar e açucarados. 
• 550 oC: cereais, leites e derivados (exceto a manteiga, que utiliza 500 oC), peixes e frutos do mar no geral, 
temperos, condimentos e vinho. 
• 600 oC: grãos e ração. 
Cinza% = N x 100 
 P 
N= peso das cinzas 
P= peso da amostra 
O manuseio do recipiente com cinzas deve ser muito cuidadoso uma vez que as cinzas são muitos levar e 
podem voar, o ideal é cobrir com vidro de relógio durante o processo. 
Dependendo da cinza a pesagem deve ser feita imediatamente após a incineração, uma vez que a cinza é 
capaz de absorver umidade do ambiente. 
É uma técnica simples e útil porém demorada e pode ser limitada pelas reações entre metais e volatilização 
deles em temperaturas altas como Ar, Hg e Pb, devendo ser submetido a processo como cinza úmida. 
O processo de cinza úmida e mais rápido, porém não tão prática sendo utilizada para grandes amostras e 
utiliza um ou mais ácidos no processo sendo comum a mistura. 
Para alcances mais precisos de determinação de cinzas: 
• Todos os materiais utilizados para a determinação das cinzas devem ser os mais puros e inertes possíveis. 
Para isso, é recomendada a utilização de quartzo, platina e polipropileno. 
• A limpeza também é fundamental para garantir a redução de interferentes e a adsorção dos elementos, ou 
seja, a retenção de moléculas da amostra na superfície do material. 
• É necessário utilizar reagentes puros. 
• A preservação do ar do laboratório contra contaminantes é vital. 
• Devem-se reduzir ao mínimo possível as manipulações durante as etapas do processo. 
• Devem-se utilizar análises interlaboratoriais a título comparativo.