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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO FACULDADE DE MEDICINA VETERINÁRIA BIOTECNOLOGIA DA REPRODUÇÃO ANIMAL BIOMARCADORES DO DESENVOLVIMENTO OOCITÁRIO Daniel Loureiro Amazonas Elvira Kelli de Almeida Cruz Kaique Grota de Almeida Marcelo Victor Francischinelli Sonvezzo Quélvia Alves dos Santos Samyres Karoline Lemes Pinheiro Duarte Cuiabá- MT Novembro de 2022 INTRODUÇÃO Ovulação de um oócito Fertilização Desenvolvimento embrionário Desenvolvimento fetal Liberação de oócitos maturos para fertilização. Síntese e secreção de fatores de crescimento e hormônios Unidade funcional do ovário Imagem: Ilustração esquemática do folículo ovariano e foliculogênese BIOMARCADORES → Esses biomarcadores são principalmente RNA reguladores de proteínas, receptores, fatores de crescimento, junções comunicantes e proteases que estão envolvidas no complexo processo de maturação do oócito. Alterações moleculares Aprimoramento de meios de fertilização in vitro Aprimoramento de cultura de embriões Produção e Qualidade de blastocistos Ácido Oleico Ácidos graxos: reprodução, crescimento, visão e desenvolvimento cerebral. Ômega-9 insaturado Fonte de energia Funções metabólicas e estruturais 10 e 25% do total de ácidos graxos: Suínos, bovinos e ovinos AÇÃO ? Ácidos graxos em direção a gotículas lipídicas Organização da membrana plasmática nas células foliculares; Regulador do estresse oxidativo Sinalização celular Glutationa (GSH) A glutationa GSH é uma molécula constituída pelos aminoácidos ácido glutâmico, cisteína e glicina. Apresenta-se de duas formas: reduzida, como um grupo sulfidril (GSH), predominante (99,5%) na célula, ou oxidada, como um dissulfeto (GSSH) (Anderson, 1985). GSG tem forte ação antioxidante, importante para a proteção das células do estresse oxidativo, e tem ainda um papel muito importante na biotransformação e eliminação de substâncias químicas do organismo. A importância da síntese de GSH durante a maturação oocitária in vivo foi relatada em várias espécies: * camundongos (Calvin et al., 1986), * hamsters (Perreauld et al., 1988), * suínos (Yoshida et al., 1993; Abeydeera et al.,1998; Jeong &Yang, 2001; Brad et al., 2003), * bovinos (Takahashi et al., 1993; De Matos et al., 1995, 1996; De Matos & Furnus, 2000), * búfalos (Gasparrini et al., 2000, 2003), ovinos (De Matos et al., 2002b) e *caprinos (RodrigézGonzález et al., 2003), E o aumento de sua concentração também foi relacionado com o desenvolvimento e a maturação oocitária no ovário, principalmente na proximidade do tempo da ovulação, e ao pico de LH, fazendo um estoque para proteger o oócito durante e após a fecundação (Perreauld et al., 1988). A [ ] intracelular de GSH durante a maturação oocitária. Após a fecundação [ ] 10%. Sugerindo que esta enzima seja mais importante durante a fecundação que no desenvolvimento embrionário. A síntese e a estocagem da GSH intracelular no oócito, durante a maturação, é importante para a sua competência, auxiliando no processo de fecundação, principalmente na descondensação da cabeça do espermatozóide. No entanto, na FIV a GSH não deve estar no meio extracelular, pois inibe a ligação dos gametas, processo dependente de ROS. Análise da GSH nas diferentes fases da MIV Posteriormente à fecundação, a GSH intracelular restante auxilia no desenvolvimento inicial do embrião, até que ele adquira capacidade de produção de suas próprias proteínas (transição materno-zigótica). Portanto, o estímulo da GSH durante a MIV é importante para que o oócito prepare seu estoque intracelular para enfrentar os processos de FIV e CIV inicial. Embriões com alta concentração intracelular de GSH suportam melhor o estresse oxidativo que ocorre normalmente na PIV. Ribonucleoproteína A2/B1 (hnRNPA2B1) Ribonucleoproteína hnRNPA2B1 consiste em uma proteína que faz parte da maturação meiótica do oócito Foi encontrada em vesículas germinativas Em estudo realizado por Lee et al 2018 constatou-se que essa proteína preenche os critérios para ser um fator de competência GV (vesícula germinativa) Análise proteômica de vesículas germinativas no modelo de gato doméstico. Teste de imunofluorescência Western blotting e espectrometria de massas em oócito de gatas; Proteína hnRNPA2B1 expressa nos oócitos em vesícula germinativa (VG) Inibição da proteína Resultado da inibição Conclusão do estudo
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