Ebook_Praticas_Bioquimica_Estrutural

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Renato Massaharu Hassunuma
Tatiane Andrea Lionete
Patrícia Carvalho Garcia
Sandra Heloísa Nunes Messias 
Práticas de 
Bioquímica Estrutural
Renato Massaharu Hassunuma
Professor Titular da Universidade Paulista - UNIP, campus Bauru
Tatiane Andrea Lionete
Técnica de Laboratório da Universidade Paulista - UNIP, campus Bauru
Patrícia Carvalho Garcia
Coordenadora do Curso de Biomedicina da Universidade Paulista - UNIP, campus Bauru
Sandra Heloísa Nunes Messias 
Coordenadora Geral do Curso de Biomedicina da Universidade Paulista – UNIP 
1ª. Edição / 2018
Bauru, SP
Práticas de 
Bioquímica Estrutural
© Renato Massaharu Hassunuma.
Conselho Editorial:
BIOMÉDICA ANA LAURA SENEDA
Mestranda em Bases Gerais da Cirurgia pela Faculdade de Medicina de Botucatu – UNESP
BIOMÉDICA KELLY COLUSSI PINHEIRO PRECIPITO
Especialista em Reprodução Humana Assistida pela Associação Instituto Sapientiae
Capa e Design: 
Renato Massaharu Hassunuma
CIP – Brasil. Catalogação na Publicação
H355p
Práticas de Bioquímica Estrutural / Renato 
Massaharu Hassunuma, Tatiane Andrea Lionete, 
Patrícia Carvalho Garcia, Sandra Heloísa Nunes 
Messias. – Bauru. Canal 6, 2018.
79 f. : il. color
ISBN: 
1. Bioquímica Estrutural. 2. Química prática
de laboratório. 3. Aparelhos e técnicas de
laboratório. I. Hassunuma, Renato Massaharu. II.
Lionete, Tatiane Andrea. III. Garcia, Patrícia
Carvalho. IV. Messias, Sandra Heloísa Nunes. V.
Título
CDU: 542.2
978-85-7917-467-4
Rua Machado de Assis, 10-35
Vila América | CEP 17014-038 | Bauru, SP
Fone/fax (14) 3313-7968 | www.canal6.com.br
Nossos sinceros agradecimentos a Prof. Aziz Kalaf Filho, Diretor da Universidade Paulista - UNIP, campus Bauru e Prof. Dr. Paschoal
Laércio Armonia, Diretor do Instituto de Ciências da Saúde da Universidade Paulista – UNIP, pelo apoio fornecido ao Curso de
Biomedicina da Universidade Paulista - UNIP, campus Bauru no desenvolvimento de eventos, publicações e projetos de extensão.
Agradecemos a colaboração da Auxiliar Técnica de Laboratório Nilceneia Adriana de Souza Gonzales, Auxiliar de Laboratório Maria
Alice dos Reis e Técnico de Laboratório Áudio/Visual Leandro Cardoso de Barros da Universidade Paulista – UNIP, campus Bauru por
todo apoio no desenvolvimento deste livro.
Prof. Dr. Renato Massaharu Hassunuma
Bióloga Tatiane Andrea Lionete
Profa. Dra. Patrícia Carvalho Garcia
Profa. Dra. Sandra Heloísa Nunes Messias 
Agradecimentos
Sumário
Introdução ............................................................................................................................. ....................................................... 6
Atividade 1: Medição do pH de diferentes soluções ...................................................................................................................... 7
Atividade 2: Calibração de um pHmetro ............................................................................................................................. .......... 17
Atividade 3: Estabelecendo a curva de titulação da glicina utilizando solução de ácido clorídrico .............................................. 27
Atividade 4: Estabelecendo a curva de titulação da glicina utilizando solução de hidróxido de sódio .......................................... 33
Atividade 5: Reação de Biureto ............................................................................................................................. ........................ 39
Atividade 6: Teste de Desnaturação Proteica ............................................................................................................................. ... 45
Atividade 7: Teste de Barfoed ............................................................................................................................. .......................... 49
Atividade 8: Reação de Tollens ............................................................................................................................. ....................... 54
Atividade 9: Teste de Fehling ............................................................................................................................. ........................... 59
Atividade 10: Reação de Saponificação ............................................................................................................................. ............ 64
Atividade 11: Reação de formação de sabão insolúvel ................................................................................................................... 69
Atividade 12: Pesquisa de insaturações: adição de iodo ................................................................................................................ 73
Este livro foi desenvolvido como material de apoio para aulas práticas e no desenvolvimento de eventos na área de Bioquímica
Estrutural para o Curso de Biomedicina da Universidade Paulista - UNIP, campus Bauru. Em cada capítulo é apresentada uma sugestão
de atividade prática, sendo indicados o material utilizado e a sequência de procedimentos realizados. Desta forma, propomos a
utilização deste livro como um material complementar de ensino que possa ser utilizado por professores e alunos em sala de aula ou no
desenvolvimento de atividades práticas laboratoriais.
Introdução
6
Medição do pH de diferentes soluções 
Atividade 1
Nesta primeira atividade será medido o 
pH de diferentes soluções. Será utilizado 
o seguinte material:
▪ 2 mL de solução de ácido clorídrico 
(HCl) a 5M
▪ 2 mL de solução de hidróxido de 
sódio (NaOH) a 5M
▪ 60 mL de solução tampão de ácido 
acético e acetato de sódio de pH 4
▪ 60 mL de água destilada
▪ 2 provetas de 50 mL
▪ 6 béqueres de 50 mL
▪ 2 pipetas de Pasteur
▪ 1 caneta de tinta permanente 
(marcador para retroprojetor)
▪ 6 tiras de teste de pH
▪ 1 estante para tubo de ensaio
▪ gaze
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
8
Primeiramente, será verificado o pH da 
água destilada. 
Utilizando a caneta de tinta 
permanente, identifique que o primeiro 
béquer de 50 mL será utilizado para 
depositar a água.
Utilize a pisseta com água destilada para 
colocar 20 mL do líquido na proveta de 
50 mL. 
Transfira a água da proveta para o 
béquer de 50 mL. 
Imerja a tira de teste de pH dentro da 
água destilada durante 3 a 5 segundos.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
9
Verifique o pH da água, comparando as 
cores da tira de teste de pH com as cores 
da tabela presente na caixa. 
Não deixe a tira secar antes de comparar 
com a tabela de cores.
Anote o resultado do pH considerando o 
padrão de cores que mais se aproximar 
das cores da tira.
Anote o resultado na Ficha de 
Resultados da Atividade 1: Medição do 
pH de diferentes soluções.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
10
Meça o pH de uma solução de ácido 
clorídrico.
Utilize a caneta de tinta permanente 
para identificar que o segundo béquer 
de 50 mL será utilizado para medir o pH 
da solução de ácido clorídrico.
Coloque 20 mL de água destilada no 
béquer, conforme explicado 
anteriormente.
Utilize a pipeta de Pasteur para 
transferir 1mL da solução de ácido 
clorídrico a 5M para o béquer contendo 
água destilada.
Verifique o pH da solução de ácido 
clorídrico, conforme apresentado 
anteriormente.
Anote o resultado na Ficha de 
Resultados da Atividade 1: Medição do 
pH de diferentes soluções.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
11
Meça o pH de uma solução de hidróxido 
de sódio.
Utilize a caneta de tinta permanente 
para identificar que o terceiro béquer de 
50 mL seráutilizado para medir o pH da 
solução de hidróxido de sódio.
Coloque 20 mL de água destilada no 
béquer, conforme explicado 
anteriormente.
Utilize a pipeta de Pasteur para 
transferir 1 mL da solução de hidróxido 
de sódio a 5M para o béquer contendo 
água destilada.
Verifique o pH da solução de hidróxido 
de sódio, conforme apresentado 
anteriormente.
Anote o resultado na Ficha de 
Resultados da Atividade 1: Medição do 
pH de diferentes soluções.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
12
A seguir, meça o pH da solução tampão 
de ácido acético e acetato de sódio.
Utilize a caneta de tinta permanente 
para identificar que o quarto béquer de 
50 mL será utilizado para medir o pH da 
solução tampão.
Coloque 20 mL da solução tampão no 
béquer.
Verifique o pH da solução tampão, 
conforme apresentado anteriormente.
Anote o resultado na Ficha de 
Resultados da Atividade 1: Medição do 
pH de diferentes soluções.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
13
Meça o pH de uma solução de ácido 
clorídrico a 5M em solução tampão de 
ácido acético e acetato de sódio.
Utilize a caneta de tinta permanente 
para identificar que o quinto béquer de 
50 mL será utilizado para medir o pH da 
solução de ácido clorídrico em solução 
tampão.
Coloque 20 mL da solução tampão no 
béquer.
Utilize a pipeta de Pasteur para colocar 
1 mL de ácido clorídrico a 5M no béquer 
contendo a solução tampão.
Verifique o pH, conforme apresentado 
anteriormente.
Anote o resultado na Ficha de 
Resultados da Atividade 1: Medição do 
pH de diferentes soluções.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
14
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
15
Meça o pH de uma solução de hidróxido 
de sódio a 5M em solução tampão de 
ácido acético e acetato de sódio.
Utilize a caneta de tinta permanente 
para identificar que o sexto béquer de 
50 mL será utilizado para medir o pH da 
solução de hidróxido de sódio em 
solução tampão.
Coloque 20 mL da solução tampão no 
béquer.
Utilize a pipeta de Pasteur para colocar 
1 mL de hidróxido de sódio a 5M no 
béquer contendo a solução tampão.
Verifique o pH, conforme apresentado 
anteriormente.
Anote o resultado na Ficha de 
Resultados da Atividade 1: Medição do 
pH de diferentes soluções.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
16
Solução testada pH Classificação da solução quanto ao pH
Água destilada
Solução de ácido clorídrico
Solução de hidróxido de sódio
Solução tampão
Solução de ácido clorídrico em solução tampão
Solução de hidróxido de sódio em solução tampão
Ficha de resultados da atividade 1:
Medição do pH de diferentes soluções 
Calibração de um pHmetro
Atividade 2
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
Nesta atividade um pHmetro será 
calibrado, sendo utilizado o seguinte 
material:
▪ 1 pHmetro
▪ 20 mL de uma solução tampão pH 7
▪ 20 mL de uma solução tampão pH 4
▪ Água destilada (volume suficiente 
para pelo menos 3 lavagens do 
eletrodo)
▪ 1 béquer de 200 mL
▪ 3 béqueres de 50 mL
▪ Papel toalha (quantidade suficiente 
para pelo menos 3 secagens do 
eletrodo)
▪ 1 caneta de tinta permanente
18
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
19
Primeiramente, lave o eletrodo do 
pHmetro utilizando a água destilada da 
pisseta. O eletrodo deve estar 
posicionado sobre um béquer de 200 mL 
para coletar a água da lavagem do 
eletrodo.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
20
Seque o eletrodo do pHmetro utilizando 
uma folha de papel toalha limpa e 
dobrada.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
21
Usando uma caneta de tinta 
permanente, identifique um béquer de 
50 mL para ser utilizado para uma 
solução tampão de pH 7.
Coloque 20 mL da solução tampão pH 7 
no béquer de 50 mL devidamente 
identificado.
Inicie a calibração do pHmetro, 
inserindo o eletrodo no béquer que 
contém a solução tampão.
A sigla CAL indica que o aparelho está 
sendo calibrado (do inglês Calibration
Mode Indicator).
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
22
O aparecimento dos 4 traços na tela do 
pHmetro indica que o aparelho está 
pronto para receber a segunda solução 
para calibragem.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
23
Repita o processo de lavagem e secagem 
do eletrodo, conforme explicado 
anteriormente.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
24
Usando uma caneta de tinta 
permanente, identifique um béquer de 
50 mL para ser utilizado para uma 
solução tampão de pH 4.
Coloque 20 mL da solução tampão pH 4 
no béquer de 50 mL devidamente 
identificado.
Inicie a calibração do pHmetro, 
inserindo o eletrodo no béquer que 
contém a solução tampão.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
25
O aparecimento do ícone “Meas” (do 
inglês Measurement Mode Indicator), 
indica o final da calibragem e que o 
equipamento está pronto para ser 
utilizado.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
26
Repita o processo de lavagem e secagem 
do eletrodo, conforme explicado 
anteriormente.
Estabelecendo a curva de titulação da glicina 
utilizando solução de ácido clorídrico
Atividade 3
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
28
Será verificada a ação do ácido 
clorídrico sobre o pH de uma solução de 
glicina, sendo utilizado:
▪ 1 pHmetro
▪ 20 mL de solução de glicina
▪ 25 mL de ácido clorídrico (HCl) a 
0,5M
▪ 1 béquer de 50 mL
▪ 1 bureta de 25 mL
▪ 1 proveta de 50 mL
▪ 1 suporte para bureta
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 etiqueta de papel
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
29
Utilize a caneta permanente para 
identificar um béquer de 50 mL que será 
utilizado para uma solução de glicina a 
0,1M.
Coloque 20 mL da solução de glicina a 
0,1M no béquer identificado.
Coloque 25 mL de ácido clorídrico a 
0,5M em uma bureta de 25 mL 
utilizando uma proveta.
Utilize uma etiqueta e uma caneta de 
tinta permanente para identificar o 
suporte da bureta que será utilizada 
para a solução de ácido clorídrico a 
0,5M. 
Coloque o béquer sobre o suporte da 
bureta.
Insira o eletrodo do pHmetro
(anteriormente calibrado, lavado e seco) 
no béquer.
HASSUNUMA et al.Práticas de Bioquímica Estrutural
30
Abra devagar a torneira da bureta, para 
deixar gotejar a solução de ácido 
clorídrico a 0,5M sobre a solução de 
glicina.
Anote o pH indicado a cada 1 mL de 
solução de ácido clorídrico despejada na 
Ficha 1 de resultados da atividade 3: 
Estabelecendo a curva de titulação da 
glicina utilizando solução de ácido 
clorídrico.
Utilize os dados obtidos para 
desenvolver um gráfico na Ficha 2 de 
resultados da atividade 3: Estabelecendo 
a curva de titulação da glicina 
utilizando solução de ácido clorídrico.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
31
Quantidade 
inserida de HCl
pH
1 mL
2 mL
3 mL
4 mL
5 mL
6 mL
7 mL
8 mL
9 mL
10 mL
Ficha 1 de resultados da atividade 3: 
Estabelecendo a curva de titulação da glicina utilizando solução de ácido clorídrico
Quantidade 
inserida de HCl
pH
11 mL
12 mL
13 mL
14 mL
15 mL
16 mL
17 mL
18 mL
19 mL
20 mL
Quantidade 
inserida de HCl
pH
21 mL
22 mL
23 mL
24 mL
25 mL
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
32
Ficha 2 de resultados da atividade 3: 
Estabelecendo a curva de titulação da glicina utilizando solução de ácido clorídrico
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
pH
Volume de ácido clorídrico a 0,5M
Estabelecendo a curva de titulação da glicina 
utilizando solução de hidróxido de sódio
Atividade 4
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
34
Será verificada a ação do hidróxido de 
sódio sobre o pH de uma solução de 
glicina, sendo utilizado:
▪ 1 pHmetro
▪ 20 mL de solução de glicina
▪ 25 mL de hidróxido de sódio (NaOH) 
a 0,5M
▪ 1 béquer de 50 mL
▪ 1 bureta de 25 mL
▪ 1 proveta de 50 mL
▪ 1 suporte para bureta
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 etiqueta de papel
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
35
Utilize a caneta permanente para 
identificar um béquer de 50 mL que será 
utilizado para uma solução de glicina a 
0,1M.
Coloque 20 mL da solução de glicina a 
0,1M no béquer identificado.
Coloque 25 mL de hidróxido de sódio a 
0,5M em uma bureta de 25 mL 
utilizando uma proveta.
Utilize uma etiqueta e uma caneta de 
tinta permanente para identificar o 
suporte da bureta que será utilizada 
para a solução de hidróxido de sódio a 
0,5M. 
Coloque o béquer sobre o suporte da 
bureta.
Insira o eletrodo do pHmetro
(anteriormente calibrado, lavado e seco) 
no béquer.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
36
Abra devagar a torneira da bureta, para 
deixar gotejar a solução de hidróxido de 
sódio a 0,5M sobre a solução de glicina.
Anote o pH indicado a cada 1 mL de 
solução de hidróxido de sódio despejada 
na Ficha 1 de resultados da atividade 4: 
Estabelecendo a curva de titulação da 
glicina utilizando solução de hidróxido 
de sódio.
Utilize os dados obtidos para obter um 
gráfico na Ficha 2 de resultados da 
atividade 4: Estabelecendo a curva de 
titulação da glicina utilizando solução 
de hidróxido de sódio.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
37
Quantidade 
inserida de NaOH
pH
1 mL
2 mL
3 mL
4 mL
5 mL
6 mL
7 mL
8 mL
9 mL
10 mL
Ficha 1 de resultados da atividade 4: 
Estabelecendo a curva de titulação da glicina utilizando solução de hidróxido de sódio
Quantidade 
inserida de NaOH
pH
11 mL
12 mL
13 mL
14 mL
15 mL
16 mL
17 mL
18 mL
19 mL
20 mL
Quantidade 
inserida de NaOH
pH
21 mL
22 mL
23 mL
24 mL
25 mL
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
38
Ficha 2 de resultados da atividade 4: 
Estabelecendo a curva de titulação da glicina utilizando solução de hidróxido de sódio
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
pH
Volume de hidróxido de sódio a 0,5M
Reação de biureto
Atividade 5
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
40
Será utilizado o seguinte material:
▪ 8 mL do reagente de biureto (CuSO4
em solução alcalina)
▪ 1 mL de solução de albumina a 10%
▪ 1 mL de solução de glicina ou 
fenilalanina a 1%
▪ 1 mL de leite não fervido
▪ 1 mL de leite fervido
▪ 1 mL de solução de amido a 1%
▪ 1 mL de óleo de cozinha
▪ 1 mL de suco de fruta
▪ 8 tubos de ensaio
▪ 8 béqueres de 50 mL
▪ 1 pipeta graduada de 2 mL
▪ 8 pipetas de Pasteur
▪ 1 pera de sucção
▪ 1 estante para tubos de ensaio
▪ 1 caneta de tinta permanente
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
41
Utilize uma caneta de tinta permanente 
para identificar 8 tubos de ensaio e 
deposite-os na estante para tubo de 
ensaio.
Em cada tubo de ensaio será depositado 
1 mL do reagente de biureto (CuSO4 em 
solução alcalina), utilizando uma pipeta 
de 2 mL e uma pera de sucção 
(lembrando que a válvula S succiona o 
líquido, a válvula E escoa o líquido, a 
válvula A retira o ar e o bulbo menor 
retira a gota residual da pipeta).
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
42
Utilizando uma pipeta de Pasteur, 
coloque 1 mL de cada uma das soluções 
descritas a seguir nos tubos de ensaio 
contendo o reagente de biureto:
▪ Tubo 1: água
▪ Tubo 2: albumina a 10%
▪ Tubo 3: glicina ou fenilalanina a 1%
▪ Tubo 4: leite sem ferver
▪ Tubo 5: leite fervido
▪ Tubo 6: amido a 1%
▪ Tubo 7: óleo de cozinha
▪ Tubo 8: suco de fruta
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
43
Observe a mudança na coloração dos 
tubos de ensaio e anote os resultados na 
Ficha de resultados da atividade 5: 
Reação de biureto.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
44
Número 
do tubo
Solução testada Descrição Resultado
1
2
3
4
5
6
7
8
Ficha de resultados da atividade 5:
Reação de biureto
Teste de Desnaturação Proteica
Atividade 6
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
46
Será utilizado o seguinte material:
▪ 10 mL de albumina a 10%
▪ 2 mL de solução de ácido clorídrico 
(HCl) a 5M
▪ 2 mL de solução de hidróxido de 
sódio (NaOH) a 5M
▪ 2 mL de etanol gelado
▪ 2 mL de solução saturada de sulfato 
de amônio (NH4)2SO4
▪ 1 pipeta graduada de 5 mL
▪ 5 pipetas de Pasteur
▪ 1 pera de sucção
▪ 5 tubos de ensaio
▪ 1 estante para tubos de ensaio
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 conjunto bico de Bunsen, tripé e 
tela de amianto
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
47
Utilize uma caneta de tinta permanente 
para identificar 5 tubos de ensaio.
Com uma pipeta graduada de 5 mL e 
uma pera de sucção deposite 2 mL de 
albumina a 10% em cada tubo, sendo 
que nos tubos 2 a 5 serãoacrescentadas 
ainda as seguintes soluções:
▪ Tubo 2: 2 mL de solução de ácido 
clorídrico a 5M
▪ Tubo 3: 2 mL de solução de 
hidróxido de sódio a 5M
▪ Tubo 4: 2 mL de etanol gelado
▪ Tubo 5: 2 mL de solução saturada de 
sulfato de amônio 
O tubo 1 deve ser fervido em conjunto 
bico de Bunsen, tripé e tela de amianto.
Anote os resultados na Ficha de 
resultados da atividade 6: Teste de 
desnaturação proteica.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
48
Número 
do tubo
Elemento testado Descrição Resultado
1
2
3
4
5
Ficha de resultados da atividade 6:
Teste de desnaturação proteica
Teste de Barfoed
Atividade 7
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
50
Será utilizado o seguinte material:
▪ 4 mL do reagente de Barfoed
(diluição de 66 g de acetato de cobre 
II (CuC4H6O4) em 10 mL de ácido 
acético glacial e posterior diluição 
em 1 L de água destilada)
▪ 1 mL de solução de glicose a 5%
▪ 1 mL de solução de lactose a 5%
▪ 1 pipeta graduada de 2 mL
▪ 5 pipetas de Pasteur
▪ 1 pera de sucção
▪ 2 tubos de ensaio
▪ 1 estante para tubos de ensaio
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 conjunto bico de Bunsen, tripé e 
tela de amianto
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
51
Utilize uma caneta de tinta permanente 
para identificar os 2 tubos de ensaio.
Com uma pipeta graduada de 2 mL e 
uma pera de sucção deposite 2 mL do 
reativo de Barfoed em cada tubo, sendo 
acrescentadas ainda as seguintes 
soluções:
▪ Tubo 1: 2 mL de solução glicose a 5%
▪ Tubo 2: 2 mL de solução lactose a 5%
Ferva os dois tubos em conjunto bico de 
Bunsen, tripé e tela de amianto.
Anote os resultados na Ficha de 
resultados da atividade 7: Teste de 
Barfoed.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
52
Analise os resultado e faça as devidas 
anotações na Ficha de resultados da 
atividade 7: Teste de Barfoed.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
53
Número 
do tubo
Elemento testado Descrição Resultado
1
2
Ficha de resultados da atividade 7:
Teste de Barfoed
Reação de Tollens
Atividade 8
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
55
Será utilizado o seguinte material:
▪ 1 mL de nitrato de prata (AgNO3) a 
5% 
▪ 5 gotas de amônia (NH3) diluída 1:2
▪ 0,5 mL de solução de glicose a 5%
▪ 2 pipetas graduadas de 2 mL
▪ 1 tubo de ensaio
▪ 1 pera de sucção
▪ 1 estante para tubos de ensaio
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 termômetro
▪ 1 conjunto bico de Bunsen, tripé e 
tela de amianto
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
56
Utilize uma caneta de tinta permanente 
para identificar o tubo de ensaio.
Com uma pipeta graduada de 2 mL 
coloque 1 mL de solução de nitrato de 
prata a 5% no tubo de ensaio 
identificado.
Com uma pipeta de Pasteur coloque 5 
gotas de amônia diluída em 1:2 no tubo 
de ensaio com o nitrato de prata. Agite o 
tubo e o precipitado se dissolverá.
Com uma outra pipeta de 2 mL adicione 
0,5 mL de solução de glicose a 5% e 
agite.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
57
Aqueça o tubo de ensaio em banho-
maria no conjunto bico de Bunsen, tripé 
e tela de amianto à uma temperatura de 
70 oC (use o termômetro para controlar 
a intensidade da chama e a temperatura 
da água do banho-maria) durante 2 
minutos.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
58
Observe a formação de uma superfície 
espelhada no interior do tubo de ensaio.
Teste de Fehling
Atividade 9
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
60
Será utilizado o seguinte material:
▪ 2 mL de solução de Fehling A 
(dissolução de 34,65 g de sulfato de 
cobre II pentaidratado (CuSO4.5H2O) 
em água e diluição a 500 mL)
▪ 2 mL de solução de Fehling B 
(dissolução de 125 g de hidróxido de 
potássio (KOH) e 173 g de tartarato 
duplo de sódio e potássio 
(NaKC4H4O6.4H2O) em água e 
diluição a 500 mL)
▪ 0,5 mL de solução de glicose a 5%
▪ 0,5 mL de solução de sacarose a 5%
▪ 4 pipetas graduadas de 1 mL
▪ 1 béquer de 250 mL
▪ 2 tubos de ensaio
▪ 1 pera de sucção
▪ 1 estante para tubos de ensaio
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 conjunto bico de Bunsen, tripé e 
tela de amianto
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
61
Utilize uma caneta de tinta permanente 
para identificar os 2 tubos de ensaio.
Utilize as pipetas graduadas de 1 mL 
para colocar 1 mL de solução de Fehling
A e 1 mL da solução de Fehling B em 
cada tubo de ensaio. Adicione em cada 
tubo as seguintes soluções:
▪ Tubo 1: 0,5 mL de glicose a 5%
▪ Tubo 2: 0,5 mL de sacarose a 5%
Aqueça os dois tubos de ensaio em 
banho-maria em um béquer de 250 mL 
no conjunto bico de Bunsen, tripé e tela 
de amianto durante 1 minuto.
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62
Analise os resultado e faça as devidas 
anotações na Ficha de resultados da 
atividade 9: Teste de Fehling.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
63
Número 
do tubo
Elemento testado Descrição Resultado
1
2
Ficha de resultados da atividade 9:
Teste de Fehling
Reação de Saponificação
Atividade 10
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65
Será utilizado o seguinte material:
▪ 3 mL de óleo vegetal
▪ 20 mL de hidróxido de potássio 
(KOH) a 10% em álcool
▪ 1 proveta de 50 mL
▪ 1 pipeta de Pasteur
▪ 1 Erlemeyer de 125 mL
▪ 2 béqueres de 50 mL
▪ 1 bastão de vidro
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 conjunto bico de Bunsen, tripé e 
tela de amianto
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
66
Utilize a pipeta de Pasteur para inserir 3 
mL de óleo de soja em um Erlenmeyer
de 125 mL. Utilize a proveta para 
colocar 20 mL de hidróxido de potássio 
a 10% em álcool no mesmo Erlenmeyer.
Aqueça o Erlenmeyer no conjunto bico 
de Bunsen, tripé e tela de amianto 
durante 5 minutos.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
67
Utilize o bastão de vidro para colocar 
uma gota da solução preparada no 
Erlenmeyer em um béquer de 50 mL 
com água.
Analise os resultado e faça as devidas 
anotações na Ficha de resultados da 
atividade 10: Reação de saponificação.
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68
Elemento testado Descrição Resultado
Ficha de resultados da atividade10:
Reação de saponificação
Reação de formação de sabão insolúvel
Atividade 11
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70
Será utilizado o seguinte material:
▪ 6 mL da solução de sabão preparada 
na Atividade 10: Reação de 
saponificação em Erlemeyer de 125 
mL
▪ 5 gotas de cloreto de sódio a 35%
▪ 5 gotas de cloreto de cálcio a 10%
▪ 5 gotas de ácido clorídrico a 0,1M
▪ 3 tubos de ensaio
▪ 1 pipeta graduada de 2 mL
▪ 3 pipetas de Pasteur
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 estante para tubo de ensaio
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
71
Utilize uma caneta de tinta permanente 
para identificar os 3 tubos de ensaio.
Utilize a pipeta de Pasteur para inserir:
▪ Tubo 1: 5 gotas de cloreto de sódio a 
35%
▪ Tubo 2: 5 gotas de cloreto de cálcio a 
10%
▪ Tubo 3: 5 gotas de ácido clorídrico a 
0,1M
Analise os resultado e faça as devidas 
anotações na Ficha de resultados da 
atividade 11: Reação de formação de 
sabão insolúvel.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
72
Número 
do tubo
Elemento testado Descrição Resultado
1
2
3
Ficha de resultados da atividade 9:
Reação de formação de sabão insolúvel
Pesquisa de insaturações: adição de iodo
Atividade 12
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
74
Será utilizado o seguinte material:
▪ 5 mL de óleo de soja
▪ 5 mL de margarina fundida
▪ 26 gotas de lugol
▪ 6 gotas de amido a 1%
▪ 2 tubos de ensaio
▪ 2 pipetas graduadas de 5 mL
▪ 2 pipetas de Pasteur
▪ 1 estante para tubo de ensaio
▪ 1 caneta de tinta permanente
▪ 1 conjunto bico de Bunsen, tripé e 
tela de amianto
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
75
Utilize uma caneta de tinta permanente 
para identificar os 2 tubos de ensaio.
Utilize a pipeta graduada de 5 mL para 
inserir:
▪ Tubo 1: 5 mL de óleo de soja
▪ Tubo 2: 5 mL de margarina fundida
Utilize a pipeta de Pasteur para inserir 
10 gotas de lugol nos Tubos 1 e 2.
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76
Aqueça os tubos de ensaio em banho-
maria em um béquer com água no 
conjunto bico de Bunsen, tripé e tela de 
amianto até o desaparecimento do 
coloração provocada pelo lugol.
HASSUNUMA et al. Práticas de Bioquímica Estrutural
77
Retire os tubos de ensaio do banho-
maria e aguarde o resfriamento das 
soluções. Após atingirem a temperatura 
ambiente, utilize a pipeta de Pasteur 
para adicionar 3 gotas de amido a 1% em 
cada tubo de ensaio e mais 3 gotas de 
lugol.
Analise os resultado e faça as devidas 
anotações na Ficha de resultados da 
atividade 12: Pesquisa de insaturações: 
adição de iodo.
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78
Número 
do tubo
Elementos testados Descrição Resultado
1
2
Ficha de resultados da atividade 12:
Pesquisa de insaturações: adição de iodo
Este livro foi desenvolvido como material de apoio para aulas práticas e no desenvolvimento de eventos na área de Bioquímica
Estrutural para o Curso de Biomedicina da Universidade Paulista - UNIP, campus Bauru. Em cada capítulo é apresentada uma sugestão
de atividade prática, sendo indicados o material utilizado e a sequência de procedimentos realizados. Desta forma, propomos a
utilização deste livro como um material complementar de ensino que possa ser utilizado por professores e alunos em sala de aula ou no
desenvolvimento de atividades práticas laboratoriais.