Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
RELATÓRIO: ATIVIDADE CATALITICA DA AMILASE SALIVAR 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. O processo de digestão inicia-se na boca com a mastigação, que quebra grandes partículas alimentares. As glândulas salivares, incluindo as parótidas, submaxilares e sublinguais, secretam proteínas serosas e mucosas, como a amílase salivar, essenciais na hidrólise do amido. A produção contínua de saliva, estimulada pelo sistema nervoso parassimpático, aumenta significativamente na presença de alimentos, atingindo até 40 vezes mais. Este líquido lubrifica e protege o tubo digestivo, permitindo o deslizamento fácil do alimento. A amílase salivar é sintetizada nas glândulas parótidas, contribuindo para a quebra do amido, presente principalmente em alimentos vegetais. A produção diária de saliva é aproximadamente 1,5 litros. - Materiais utilizados. Pera de borracha; Pisseta com agua destilada; 6 tubos de ensaio; Pipeta de vidro de 5ml; Estante para os tubos de ensaio; Cronometro; Erlenmeyer; Proveta; Balao volumetrico de 100ml; Banho-maria; Banho de gelo; Bequer; Papel Toalha; Solucao de amido a 1%; Solucao de HCl 1:2. 2. Responda as Perguntas: a)Qual a composição bioquímica do amido? O amido é um polissacarídeo composto por cadeias de amilose e/ou amilopectina. A amilose consiste em unidades de glicose unidas por ligações glicosídicas α-1,4, enquanto a amilopectina é formada por unidades de glicose com ligações glicosídicas α-1,4 e α-1,6. O amido é uma molécula complexa composta por várias moléculas de glicose. b)Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido? No procedimento de hidrólise química do amido, o HCl (ácido clorídrico) é utilizado para proporcionar um ambiente ácido, desencadeando a quebra das ligações glicosídicas entre as unidades de glicose no amido. O aquecimento acelera a reação de hidrólise, aumentando a taxa de quebra das moléculas de amido. O resfriamento posterior é realizado para interromper a reação e estabilizar os produtos formados. Em resumo, o HCl cria um ambiente ácido para iniciar a hidrólise, o aquecimento acelera o processo, e o resfriamento posterior controla e interrompe a reação, permitindo a análise dos produtos resultantes da quebra do amido. c)Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose. A amilase inicia a sequência de transformações na molécula da amilose através da hidrólise das ligações glicosídicas α-1,4, promovendo a quebra da amilose em unidades menores. Isso resulta na formação de oligossacarídeos, dextrinas, maltose e glicose. Durante essa reação, a estrutura helicoidal da amilose interage com o iodo, gerando uma coloração azul. As ligações glicosídicas α-1,4 são quebradas, levando à produção de maltose, glicose e amilopectina. A maltose é composta por duas unidades de glicose unidas por uma ligação glicosídica, enquanto a amilopectina é uma molécula mais complexa, contendo ramificações nas ligações glicosídicas α-1,6. Assim, a sequência de transformações operadas pela amilase resulta na quebra da amilose em produtos mais simples, como maltose e glicose, e na produção de amilopectina, enquanto a interação com o iodo evidencia a estrutura helicoidal da amilose. d) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico. Os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico, que envolve a reação do iodo com as moléculas de amido, indicam informações importantes sobre a estrutura e a presença de amido na amostra. O iodo é conhecido por reagir com amido de maneira característica. A coloração azul resultante da interação do iodo com as cadeias helicoidais da amilose é um indicativo positivo da presença de amido. A intensidade da cor pode ser relacionada à concentração de amido na amostra. Esse teste é usado rotineiramente para identificar a presença de amido em soluções, como parte de análises bioquímicas e laboratoriais. Assim, a observação da cor azul após a adição de iodo à amostra sugere a presença de amido, fornecendo informações valiosas sobre a composição bioquímica da substância em questão. TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES) 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. A prática segue os mesmos princípios teóricos da reação de Molisch, resultando na formação de furfural e hidroximetilfurfural (HMF). Ambos os produtos, isoladamente, são incolores. Para desenvolver coloração visível (vermelha), adiciona-se um composto fenólico ao meio. A reação de Seliwanoff se diferencia da de Molisch nos reagentes: ácido clorídrico (HCl) causa desidratação do carboidrato, e o fenol reage como o furfural e HMF, sendo substituído por resorcinol. Esse teste diferencia aldoses de cetoses, sendo a reação com cetoses mais rápida e intensa devido à formação mais fácil do furfurol em comparação com o hidroximetilfurfural. - Materiais utilizados: Solução 0,1M de frutose Solução 0,1M de glicose Agua destilada 3 Tubos de ensaio Conta-gotas Pipeta de 5 ml Becker Banho-Maria Reagente de Seliwanoff 2. Responda as Perguntas: a) Qual o princípio da técnica de Seliwanoff? O princípio da técnica de Seliwanoff é diferenciar aldoses de cetoses com base na velocidade e intensidade da reação. O ácido clorídrico (HCl) promove a desidratação do carboidrato, e o composto fenólico (resorcinol) reage, resultando em uma coloração visível (neste caso, vermelha). A reação é mais rápida e intensa com cetoses devido à formação facilitada de furfurol em comparação com o hidroximetilfurfural. b) Qual o objetivo de utiliza um tubo apenas com água destilada. Porque é necessário aplicar fervura e ácido clorídrico (HCl) durante o teste de Seliwanoff? A água destilada deve ser utilizada no laboratório para deixar as vidrarias completamente limpas, pois a água destilada e pura, então vai evitar que as análises sofram algum tipo de interferência. ela proporciona menos interrupções por conta de outras substâncias presentes na água, ou seja, foi usada como controle negativo. c) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico quanto a presença de aldose e cetoses. Os resultados obtidos no ensaio bioquímico revelam a presença de aldoses e cetoses com base na coloração desenvolvida. Se a coloração é mais rápida e intensa, indica a presença de cetoses, uma vez que a formação do furfurol é facilitada. A diferenciação ocorre devido à desidratação do carboidrato causada pelo ácido clorídrico (HCl) durante o ensaio de Seliwanoff, destacando a natureza e a velocidade da reação. PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. Este procedimento e realizado para verificar a influência de sais de metais pesados e de ácidos fortes sobre a solubilidade da proteína, bem como a influência do pH sobre a carga liquida da molécula polipeptídica. - Materiais utilizados: Acido tricloroacético a 20% Acetato de chumbo 10% Ovoalbumina 10% 2 tubos de ensaio Pipeta Pera de borracha 2. Responda as Perguntas: a)Por que a ovoalbunina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados? A ovoalbúmina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados devido à alteração das condições de carga e estrutura da proteína. A exposição a ácidos fortes e metais pesados pode levar à desnaturação da ovoalbúmina, resultando na formação de agregados insolúveis, conhecidos como precipitados. Essa mudança na estrutura proteica ocorre devido a interações disruptivas que afetam as forças de ligação eletrostática e as interações entre aminoácidos, levando à precipitação. b)Expliquepor que a ovoalbumina torna-se insolúvel após a precipitação. A ovoalbumina torna-se insolúvel após a precipitação devido à mudança em sua estrutura tridimensional. Quando exposta a condições desfavoráveis, como ácidos fortes ou metais pesados, as forças de ligação e interações entre aminoácidos na ovoalbumina são perturbadas, resultando na desnaturação da proteína. Esse processo leva à exposição de grupos hidrofóbicos normalmente ocultos na estrutura nativa da proteína. A exposição desses grupos hidrofóbicos favorece a formação de agregados insolúveis, conhecidos como precipitados, pois buscam evitar a interação com a água. Essa insolubilidade é uma característica marcante da precipitação proteica. C) Explique os resultados encontrados no experimento. Os resultados do experimento indicam que a ovoalbumina precipitou na presença de ácidos fortes e metais pesados, conforme esperado. A adição de ácido tricloroacético e acetato de chumbo provocou a desnaturação da ovoalbumina, levando à formação de precipitados insolúveis. A mudança nas condições de carga e estrutura da proteína resultou na exposição de grupos hidrofóbicos, favorecendo a agregação e a insolubilidade da ovoalbumina. A observação da precipitação após a exposição aos reagentes permite concluir que esses agentes influenciaram negativamente a solubilidade da proteína. Esse fenômeno é fundamental para entender a influência de sais de metais pesados e ácidos fortes sobre as propriedades da ovoalbumina, contribuindo para a compreensão da relação entre a estrutura proteica e o ambiente químico em que a proteína está inserida. PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. Durante a aula, foi realizado o processo de precipitação de proteínas, considerando que a concentração de sal necessária para a precipitação varia para cada proteína. Os seguintes materiais foram utilizados: ovoalbumina a 10%, solução de sulfato de amônia concentrada, água destilada, 2 tubos de ensaio, pipeta de vidro e pera de borracha. - Materiais utilizados: Ovoalbumina a 10% Solução de sulfato de amônia concentrada Água destilada 2 tubos Pipeta de vidro Pera de borracha - Responda as Perguntas: a) Explique os conceitos de “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação? “Salting out” refere-se à precipitação de proteínas pela adição de sais, onde a elevada concentração salina reduz a solubilidade das proteínas, promovendo a sua precipitação. "Salting in” é o oposto, onde a solubilidade das proteínas aumenta com a adição de sais. A *camada de solvatação* envolve a interação entre as moléculas de água e as proteínas, sendo perturbada pela presença de sais. b) Qual o princípio bioquímico do experimento? O princípio bioquímico do experimento está relacionado com a capacidade de diferentes proteínas de precipitarem em concentrações específicas de sal. A variação na solubilidade das proteínas em resposta à concentração de sal permite a sua separação com base nessa propriedade. c) Explique os resultados encontrados durante o experimento. Os resultados do experimento indicarão as concentrações de sal específicas em que ocorre a precipitação da ovoalbumina. Isso proporciona informações sobre a solubilidade da proteína em diferentes condições salinas, sendo crucial para entender e otimizar processos de separação de proteínas em contextos bioquímicos e laboratoriais. REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES) 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. Durante a aula, foram realizados testes utilizando o Reagente de Benedict para detectar a presença de açúcares redutores. Os procedimentos foram os seguintes: 1. Utilização de pipetas de vidro para medir volumes precisos das soluções de sacarose e glicose. 2. Combinação das soluções com o Reagente de Benedict em tubos de ensaio. 3. Colocação dos tubos em uma estante para tubos de ensaio. 4. Aquecimento dos tubos em banho-maria. 5. Observação das mudanças de cor, indicativas da presença de açúcares redutores. - Materiais utilizados. Pipetas de vidro 5ml Pipeta de vidro 5mL Tubo de ensaio Estante para tubos de ensaio Pêra de borracha Papel toalha Descarte para pipetas Frasco com água destilada Reagente de Benedict Solução de sacarose 1% Solução de glicose 1% Banho-maria 2. Responda as Perguntas: a) Explique o princípio da técnica bioquímica do experimento. O Reagente de Benedict reage com açúcares redutores, como glicose e frutose, formando um composto insolúvel de cor avermelhada. Esse princípio é utilizado para identificar a presença desses açúcares por meio da mudança de cor observada durante o aquecimento. b) Qual o conceito de “açúcares redutores”? Açúcares redutores são carboidratos capazes de doar elétrons em reações químicas, reduzindo outras substâncias. Nesse experimento, glicose e frutose são exemplos de açúcares redutores. c) Explique os resultados encontrados no experimento. A mudança de cor nos tubos de ensaio indica a presença de açúcares redutores. Glicose e frutose resultam em uma coloração avermelhada, enquanto a sacarose não reage positivamente. d) Explique como o experimento pode ser aplicado nas atividades na área clínica. Este experimento pode ser aplicado clinicamente para detectar glicose na urina, sendo útil no diagnóstico ou monitoramento de condições como diabetes. A mudança de cor nos testes pode indicar a presença de açúcares redutores na amostra clínica, fornecendo informações importantes sobre o estado metabólico do paciente. REAÇÃO DE BIURETO 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. Durante a aula prática assistida, foi explicado que as proteínas são biomoléculas importantes em nossa constituição corporal, desempenhando diversas funções. Após os procedimentos conduzidos pela professora, ela esclareceu que na aula prática em questão seria utilizado o reagente de biureto. Este composto reage com grupos carbonilas presentes nas proteínas, especificamente o CH, resultando em uma coloração violeta. Após a explicação de conceitos, a professora Rosilma Oliveira realizou os seguintes procedimentos no experimento: coleta de amostras biológicas contendo proteínas, como ovo, carne, leite e feijão; preparação das soluções reagentes, incluindo o Reagente de Biureto; adição das soluções reagentes às amostras biológicas; e observação das mudanças de coloração nas amostras. Além disso, os materiais utilizados para esse experimento foram: equipamentos como pipetas, pêra de borracha, tubos de ensaio e estantes para tubos. As soluções incluíram ovoalbumina a 10%, reagente de Biureto e água destilada. No procedimento experimental, um tubo de ensaio com 1 ml de água destilada serviu como controle, enquanto em outro tubo foi adicionado 1 ml de ovoalbumina a 10% e biureto (a quantidade exata não foi especificada, mas acredita-se que tenha sido 1 ml de cada). O resultado observado na análise experimental foi que no tubo A (ovoalbumina), o teste foi positivo, apresentando uma coloração violeta e confirmando a presença de proteína. No tubo de controle experimental B (água destilada), o resultado foi negativo, conforme o esperado. 2. Responda as Perguntas: a) Explique o princípio bioquímico da Reação de Biureto. A Reação de Biureto é baseada na capacidade do reagente de biureto em reagir com grupos carbonilas presentes nas proteínas. O composto de biureto forma complexos coloridos com esses grupos, resultando em uma coloração violeta, indicativa da presença de proteínas. b) Qual o tipo de ligação que ocorre entre o Biureto e as moléculas identificadas? A ligação formadaentre o Biureto e as moléculas de proteínas é uma ligação de coordenação. Nesse tipo de interação, os íons de cobre no reagente de biureto interagem com os grupos carbonilas das proteínas, contribuindo para a formação do complexo colorido. c) Explique os resultados encontrados no experimento. No tubo A, contendo ovoalbumina e biureto, a coloração violeta observada indicou uma reação positiva, confirmando a presença de proteína. Já no tubo de controle experimental B, contendo água destilada e biureto, o resultado negativo estava de acordo com o esperado, mostrando que a coloração violeta não ocorreu na ausência de proteínas. Esses resultados validam a especificidade da Reação de Biureto para a detecção de proteínas. REAÇÃO DO LUGOL (IDENTIFICAÇÃO DE POLISSACARÍDEOS) 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. Na aula prática, foi abordado que os polissacarídeos são macromoléculas compostas por sacarídeos, uma classe de carboidratos que inclui monossacarídeos, dissacarídeos e polissacarídeos, como o amido. O amido é comum na alimentação e é encontrado em diversos alimentos vegetais. Durante a aula, a professora utilizou o reagente de Lugol para identificar a presença de polissacarídeos. Foram preparadas diferentes amostras em tubos de ensaio, incluindo amido, glicogênio e celulose, dissolvidas em água destilada. O reagente de Lugol foi adicionado a cada amostra, observando-se as mudanças de cor como indicativo da presença de polissacarídeos. Os materiais utilizados foram: - 2 Pipetas de vidro de 1ml - 2 Tubos de ensaio - Solução de Lugol 2% - Solução de amido 1% - Pêra de borracha - Pipeta Pasteur - Água destilada. 2. Responda as Perguntas: a) Explique o princípio bioquímico da utilização do lugol na identificação de polissacarídeos. O lugol, uma solução de iodeto de potássio e iodeto de iodo, reage com os polissacarídeos, especialmente o amido, formando um complexo estável que resulta em uma mudança de cor. A coloração azul ou esverdeada indica a presença de amido. b) Explique para quais situações essa técnica pode ser utilizada. Essa técnica pode ser utilizada em diversos contextos, como análises laboratoriais de alimentos para verificar a presença de amido, identificação de substâncias em biologia celular, e em pesquisas científicas relacionadas à presença de polissacarídeos em diferentes materiais. c) Explique os resultados encontrados no experimento. No experimento, a presença de amido foi confirmada pela alteração de cor para azul ou esverdeada. A ausência de alteração de cor em outra amostra indica a possível ausência de amido naquela substância específica. Esses resultados demonstram a especificidade da reação de Lugol para a identificação de polissacarídeos, principalmente o amido. REAÇÃO DE SAPONIFICAÇÃO 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. A saponificação é uma reação que forma um sal orgânico (sabão) e álcool a partir de um éster de base inorgânica em uma solução aquosa. A professora iniciou o experimento com os seguintes procedimentos: 1. Preparação da solução de hidróxido de sódio (NaOH). 2. Preparação da solução de triglicerídeos. 3. Aquecimento das soluções em banho-maria. 4. Adição de ácido clorídrico (HCl). 5. Separação das fases. Os resultados obtidos foram a formação de uma mistura homogênea de glicerol e sabão, que se separa em duas fases após a acidificação. A camada superior consiste no óleo livre, enquanto a camada inferior contém glicerol e sabão. O sabão, solúvel em água, possui a propriedade de solubilizar gorduras e sujeiras, sendo eficaz na limpeza de superfícies. O glicerol, subproduto da reação, pode ser usado em diversas aplicações industriais. Materiais utilizados: - 4 Pipetas de vidro de 5ml - 2 Pipetas de vidro de 1ml - 3 Tubos de ensaio - Solução de hidróxido de potássio 10% - Solução de Cloreto de Cálcio - Óleo de soja - Pêra de borracha - Banho-maria 2. Responda as Perguntas: a) Explique bioquimicamente o que são ácidos graxos e triglicerídeos. Os ácidos graxos são cadeias de carbono com um grupo carboxila. Os triglicerídeos são ésteres formados pela ligação de três ácidos graxos a uma molécula de glicerol. Os ácidos graxos são componentes essenciais dos triglicerídeos e desempenham papéis cruciais no armazenamento e liberação de energia. b) Explique a fundamentação teórica da técnica de saponificação. A técnica de saponificação baseia-se na reação química entre um éster, como um triglicerídeo, e uma base forte, como o hidróxido de sódio. Isso resulta na formação de sabão e glicerol. c) Explique os resultados encontrados no experimento. Os resultados indicam a eficácia da saponificação na produção de sabão. A separação das fases demonstra a formação de uma camada superior de óleo, enquanto a camada inferior contém glicerol e sabão. Isso confirma a capacidade do sabão de solubilizar o óleo, sendo um processo relevante na produção de agentes de limpeza. SOLUBILIDADE DOS LIPÍDIOS 1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais materiais utilizados. Na prática realizada hoje, exploramos a solubilidade de lipídios. Inicialmente, foi destacada a importância dos lipídios, que incluem ácidos graxos, triglicerídeos e fosfolipídios, desempenhando diversas funções essenciais no corpo. Caracterizados por sua hidrofobicidade, os lipídios são insolúveis em água, o que pode ser observado pela separação entre óleo e água. Os procedimentos conduzidos durante a aula foram os seguintes: 1. Preparação das soluções. 2. Adição de água destilada. 3. Adição da substância lipídica. 4. Observação dos resultados. 5. Análise visual. Os resultados indicaram a insolubilidade dos lipídios em soluções aquosas. Ao adicionar água destilada à solução de lipídios, observou-se a formação de uma camada de lipídios na superfície da água, evidenciando que os lipídios não se misturam com a água. Essa observação está alinhada com a estrutura bioquímica dos lipídios, que apresentam pouca ou nenhuma polaridade, tornando-os insolúveis em soluções aquosas. *Materiais Utilizados:* - 5 Pipetas de vidro de 5ml - 5 Tubos de ensaio - Óleo de cozinha - Ácido Clorídrico - Hidróxido de Sódio 0,1N - Álcool etílico - Éter etílico - Pêra de borracha - Água destilada 2. Responda as Perguntas: a) Explique a estrutura bioquímica dos lipídios correlacionado com sua característica de insolubilidade em soluções aquosas. A estrutura bioquímica dos lipídios, caracterizada por cadeias hidrofóbicas de ácidos graxos, torna-os insolúveis em soluções aquosas. A ausência de grupos polares em grande parte dos lipídios dificulta sua interação com a água, resultando na formação de camadas distintas. b) Explique a fundamentação teórica da técnica de solubilidade dos lipídios. A técnica baseia-se na propriedade hidrofóbica dos lipídios. Ao adicionarmos água destilada a uma solução de lipídios, a falta de afinidade entre lipídios e água leva à formação de camadas separadas, indicando a insolubilidade dos lipídios em ambientes aquosos. c) Explique os resultados encontrados no experimento. Os resultados demonstraram a segregação dos lipídios ao adicionar água destilada, confirmando a característica de insolubilidade em soluções aquosas devido à natureza hidrofóbica dos lipídios. REFERENCIAS: https://www.infopedia.pt/apoio/artigos/$amilase-salivar https://mundoeducacao.uol.com.br/biologia/amido.htm https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11141/tde-09092009- 150507/publico/Luis_Polesi.pdf https://www.infoescola.com/bioquimica/amido/#:~:text=Com%20a%20mastiga%C3% A7%C3%A3o%20h%C3%A1%20libera%C3%A7%C3%A3o,em%20dtrina%2C%20m istura%20de%20polissacar%C3%ADdeoshttp://www.fcav.unesp.br/Home/departamentos/tecnologia/luciamariacararetoalves/a ula-4-enzimas---mecanismo-de-acao.pdf http://plone.ufpb.br/ldb/contents/paginas/teste-de-seliwanoff https://www.ecycle.com.br/agua-destilada/ https://www.stoodi.com.br/blog/quimica/hcl- o-que-e/#:~:text=apresentando %20tonalidade%20amarela.- ,Fun%C3%A7%C3%A3o%20do%20HCL,um %20processo%20do%20sistema%20digestivo http://plone.ufpb.br/ldb/contents/paginas/teste-de-seliwanoff
Compartilhar