CONTAGEM MANUAL DE LEUCÓCITOS

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LABORATÓRIO DE HEMATOLOGIA 
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Este procedimento é importante para o esclarecimento de processos infecciosos, 
leucopênicos, inflamatórios, tóxicos e leucêmicos, geralmente sendo usado como 
método confirmatório de quantificação leucocitária obtida por meio de equipamentos 
de automação hematológica. Os leucócitos, também conhecidos por glóbulos brancos, 
são células produzidas pela medula óssea e têm a função de defender o organismo em 
quadros de infecções e alergias. 
O aumento da concentração global de leucócitos (independentemente do tipo 
leucocitário que esteja em maior concentração) é chamado de leucocitose e pode estar 
relacionado a quadros de infecção, inflamação, leucemia, traumas, exercícios intensos 
ou estresse. A concentração global de leucócitos inferior ao valor de referência é 
denominada leucopenia e pode estar relacionada a tratamentos 
de quimioterapia ou radioterapia e à ocorrência de doenças imunológicas. Quando é 
solicitada a contagem diferencial de leucócitos por outra metodologia que não a citada 
neste procedimento, o seu resultado demonstrará aspectos mais específicos dos 
leucócitos e as diferentes proporções de seus tipos no sangue, podendo estar 
correlacionado a um padrão infeccioso. 
Para proceder à contagem global de leucócitos com a câmara de Neubauer, 
primeiramente é necessário realizar a diluição da amostra de sangue total a ser 
analisado. O sangue total (coletado em tubo contendo EDTA) é diluído com o líquido de 
Turk (composição: ácido acético glacial, solução aquosa de violeta de genciana e água 
destilada), que causa hemólise, mas não tem efeito sobre os leucócitos e cora 
(discretamente) os núcleos. 
 
 
 
 
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A contagem manual é uma técnica que permite a determinação (ao microscópio) 
do número de leucócitos por mm3 (concentração leucocitária) de uma amostra de 
sangue total utilizando a câmara de Neubauer (Figura 1). 
Este instrumento é uma lâmina grossa de vidro com 30 x 70mm de comprimento 
e 4mm de espessura, de formato retangular, com uma depressão central que contém o 
retículo de contagem celular (grade de contagem), utilizado para fazer a contagem de 
células ao microscópio, com auxílio de uma lamínula. 
A plataforma central da lâmina, onde encontra a área reticulada, é exatamente 0,1mm 
mais baixa que as duas laterais, onde se apoia a lamínula, deixando um espaço de 0,1mm 
de profundidade (Figura 2). 
 
 
Figura 1 – Representação da visão superior da câmara de Neubauer, da lamínula e da grade de contagem. 
 
No centro da câmara, existem linhas perpendiculares (chamadas de ranhuras) 
com marcações em quadrantes. A área reticulada da grade de contagem da câmara de 
Neubauer mede 3 mm X 3 mm, ou 9 mm2. Os nove quadrados maiores têm, cada um, 
1 mm X 1 mm, ou 1 mm2 de superfície. Cada quadrado externo de 1mm2 é subdividido 
em 16 quadrados de 0,25 mm x 0,25 mm, ou 0, 0625 mm2. 
 
 
 
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No caso da contagem leucocitária, estas células são contadas nos quatro 
quadrantes das extremidades (marcados com a letra W na grade de contagem 
representada na Figura 1), que são subdivididos em 16 campos de 0,25 mm cada. Após 
a devida diluição da amostra, uma lamínula é colocada sobre a câmara de Neubauer, 
cobrindo a área central da câmara, onde está a grade de contagem (espaço 
representado na Figura 2). A contagem é realizada ao microscópio, utilizando o aumento 
de 100x e de 400x. 
 
 
Figura 2 – Representação da visão lateral da câmara de Neubauer. 
 
 
 
 
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
 
 
BIONETWORK. Counting Cells with a Hemocytometer. 2012. (6m30s). Disponível em: 
https://www.youtube.com/watch?v=pP0xERLUhyc&t=269s. Acesso em: 2 set. 2020. 
 
CARVALHO, W. F. Técnicas médicas de hematologia e imuno-hematologia. 8. ed. Belo 
Horizonte: Coopmed, 2008. 
 
MOURA, Roberto de Almeida et al. Técnicas de laboratório. 3. ed. São Paulo: Atheneu, 
2008. 
 
MELO, C. P. A.; FRANCO, J. M.; GARCIA, T. F. P.; NEVES, P. A. Manual Roca Técnicas de 
Laboratório: sangue. São Paulo: Roca, Grupo Editorial Nacional, 2011. 
 
OLIVEIRA LIMA, A.; GRECO, J. B.; BENJAMIN SOARES, J.; CANÇADO, J. R.; GALIZZI, J. 
Métodos de laboratório aplicados à clínica: técnica e interpretação. 8. ed. Rio de 
Janeiro: Guanabara Koogan, 2001.