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<p>Análise</p><p>microbiológica</p><p>Em refrigerantes, visando detectar</p><p>bolores e leveduras</p><p>Coca-cola</p><p>Alunas: Laís Martins, Luna Lisboa, Ellen Larissa, Débora Nicole, Mirela</p><p>Paiva, Ana Beatriz e Wellen</p><p>• Realizar a contagem de bolores e leveduras através de técnicas</p><p>microbiológicas de diluição e plaqueamento e posteriormente comparar os</p><p>resultados.</p><p>• Explicar os procedimentos de análises microbiológicas, incluindo a</p><p>preparação de meios de cultura, processos de esterilização e técnicas de</p><p>assepsia de materiais, que asseguram a precisão das análises. Além disso,</p><p>detalhar como são feitas as amostragens para garantir a qualidade do</p><p>produto final.</p><p>• Assegurar que o produto final esteja em conformidade com as</p><p>regulamentações e normas de segurança alimentar vigentes.</p><p>Objetivos específicos</p><p>O que são bolores e leveduras</p><p>• Bolores e leveduras são fungos que, apesar das diferenças</p><p>visuais, pertencem ao mesmo grupo taxonômico.</p><p>• Esses microrganismos são significativos na indústria alimentícia</p><p>porque podem produzir toxinas e decompor alimentos.</p><p>• Bolores, especificamente, são fungos multicelulares formados</p><p>por hifas que se ramificam em micélios.</p><p>• Eles proliferam quando a umidade é adequada, mostrando</p><p>grande capacidade de adaptação a diferentes condições de</p><p>umidade e temperatura.</p><p>O que são bolores e leveduras</p><p>• A presença de bolores e leveduras em refrigerantes indica</p><p>contaminação microbiológica.</p><p>•Apesar de os refrigerantes serem ácidos e conterem</p><p>açúcar, algumas leveduras e bolores conseguem sobreviver.</p><p>• Leveduras podem fermentar o açúcar, produzindo</p><p>gases que alteram o sabor e o aroma e podem inchar as</p><p>embalagens.</p><p>• Bolores podem crescer em superfícies e alterar a cor e o</p><p>cheiro dos produtos.</p><p>• Para prevenir essas contaminações, é crucial seguir</p><p>rigorosos padrões de higiene, realizar pasteurização, usar</p><p>conservantes adequados e armazenar os refrigerantes a</p><p>temperaturas abaixo de 5°C.</p><p>Nos refrigerantes</p><p>• No setor de bebidas não alcoólicas, bolores e leveduras são</p><p>microrganismos críticos devido às condições favoráveis que</p><p>oferecem o açúcar, a alta atividade de água e a baixa acidez dos</p><p>produtos.</p><p>• A partir de 25 de dezembro de 2020, a Anvisa implementou novas</p><p>normas, como a RDC 331/2019 e a IN 60/2019, que exigem controle</p><p>rigoroso desses microrganismos na produção de refrigerantes.</p><p>• Problemas comuns incluem engradados sujos, lavagem inadequada</p><p>de garrafas e formação de biofilmes em equipamentos.</p><p>Precauções</p><p>Amostra de Coca-cola</p><p>Alça de inoculação ou hastes</p><p>de vidro</p><p>Autoclave</p><p>Pipetas estéreis</p><p>Placas de Petri estéreis Ágar Dicloran Rosa de Bengala</p><p>Cloranfenicol (DRBC)</p><p>Água destilada estéril</p><p>Água peptonada tamponada</p><p>Materiais</p><p>Reagentes:</p><p>02 erlenmeyers</p><p>1. Coleta de Amostra</p><p>2. Preparo do meio de Cultura:</p><p>3. Diluição Seriadas:</p><p>- Realização de diluições seriadas</p><p>4. Placas de Cultura:</p><p>- Uso de meio DRBC para o crescimento de leveduras e bolores.</p><p>5. Inoculação</p><p>6. Monitoramento do crescimento de colônias durante 5 a 7 dias.</p><p>7. Contagem de colônias</p><p>Metodologia</p><p>Preparo do Meio de Cultura:</p><p>- Ágar DRBC</p><p>- Dissolvemos o pó do meio de cultura de acordo com as instruções do</p><p>fabricante.</p><p>- Colocamos na geladeira</p><p>- Fervemos o meio preparado para esterilização.</p><p>- Após a esterilização, deixamos o meio esfriar.</p><p>-adicionamos cloranfenicol para inibir o crescimento bacteriano.</p><p>- Vertemos o meio ainda líquido em placas de Petri estéreis e deixamos</p><p>solidificar.</p><p>Metodologia</p><p>Metodologia</p><p>Preparação da Amostra:</p><p>- Diluição da amostra:</p><p>coletamos 9 mL de água peptonada, colocamos em um becker esterelizado.</p><p>Em seguida, em uma proveta colocamos 25 mL da amostra do refrigerante cola e</p><p>transferimos para o erlenmeyer de 225 mL contendo água peptonada e</p><p>homogenizamos.</p><p>• Logo depois, coletamos 1 mL e colocamos no Becker com 9 mL de água peptonada,</p><p>criando assim, uma diluição de 10^-1.</p><p>• Em seguida, fizemos o plaqueamento em superfície, diluindo em série : 10^-2, 10^-3</p><p>Metodologia</p><p>Inoculação nas Placas de Cultura:</p><p>- Inoculação:</p><p>• Pipetamos 0,1 mL das diferentes diluições sobre a superfície de cada placa de</p><p>ágar preparado.</p><p>• Espalhamos a amostra na superfície da placa com auxílio de uma alça de</p><p>Drigalski estéril garantindo a uniformidade da amostra na superfície.</p><p>Ao fim da prática deixamos em temperatura ambiente e monitoramos o</p><p>crescimento de leveduras e bolores durante 5 a 7 dias.</p><p>Resultados e discussão</p><p>Discussão</p><p>• Com base nos resultados obtidos, a primeira amostra diluída a 10^-1 apresentou</p><p>6 x 10^4 bolores e leveduras, enquanto a segunda amostra, diluída a 10^-2, revelou 1 x</p><p>10^5 bolores e leveduras.</p><p>• Embora bolores e leveduras sejam comuns em refrigerantes, sua presença deve</p><p>ser controlada durante o processo de produção, conforme a Instrução Normativa (IN) nº</p><p>161, de 1º de julho de 2022, que estabelece um limite microbiológico de 10^2 UFC/mL</p><p>para essas bebidas.</p><p>• Os resultados obtidos indicam que o refrigerante analisado, no caso a</p><p>Coca-Cola, não está em conformidade com os padrões estabelecidos pela legislação</p><p>brasileira.</p><p>• Esse desvio pode ter sido influenciado por algum erro na manipulação das</p><p>amostras, resultando em um total de 16 colônias observadas.</p><p>Conclusão</p><p>• De acordo com os dados analisados, concluímos que nas</p><p>amostras há uma totalidade de 16 colônias de leveduras e alguns</p><p>bolores, no qual o resultado obtido está insatisfeito as normas</p><p>padrões da legislação.</p><p>• A presença de bolores e leveduras, evidencia</p><p>práticas de higiene aquém dos padrões requeridos para o</p><p>processamento de alimentos.</p><p>• Urge-se, portanto, o monitoramento das indústrias de</p><p>refrigerantes pelos órgãos de</p><p>fiscalização, uma ação efetiva por parte das Vigilâncias</p><p>Sanitárias para que o produto esteja conforme a legislação.</p><p>Obrigada!</p><p>https://afrebras.org.br/noticias/bolores-e-leveduras-microrganismos-que-merecem-</p><p>atencao-na-fabricacao-de-refrigerantes/</p><p>O blog Food Safety Brasil segue com a série sobre os principais contaminantes da cadeia</p><p>de alimentação animal (feed). Trataremos hoje dos bolores e leveduras, m… Fonte: Food</p><p>Safety Brazil https://search.app/fkB8A6BWX9qcqLMh7</p><p>https://blog.neoprospecta.com/levedura-em-bebida-carbonatada/</p><p>BRASIL. **Ministério da Saúde**. **Agência Nacional de Vigilância Sanitária – ANVISA**.</p><p>Instrução Normativa - IN nº 161, de 1º de julho de 2022. Diário Oficial da União: seção 1,</p><p>Brasília, DF, n. 126, p. 123, 6 jul. 2022.</p><p>Referências bibliográficas</p>