05 PRATICA 1

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Aula prática 1:
Vidrarias, acessórios e 
equipamentos
Prof. Helena T. Diniz Silva
helenadiniz76@gmail.com
Laboratório
Em laboratórios se faz necessário:
• Conhecer os procedimentos analíticos
• Conhecer as substâncias químicas, equipamentos e vidrarias
• Conhecer procedimentos de emergência
O Laboratório é o instrumento indispensável para os
alunos, professores e pesquisadores de todas as áreas das
ciências, pois é o local onde são realizadas análises para
comprovar fenômenos e demonstrar assuntos previamente
explanados na aula teórica. O laboratório é um ambiente onde
se operam com substâncias tóxicas, corrosivas, inflamáveis e
algumas vezes explosivas e, se tomadas as devidas precauções,
não é um local perigoso.
Regras básicas de segurança
• Recomendações gerais:
1. Fechar todas as gavetas e portas que abrir;
2. Se sujar, lave;
3. Se acender, apague;
4. Se quebrar, conserte;
5. Se não sabe consertar, chame alguém que sabe;
6. Se pedir emprestado, devolva;
7. Se necessitar de algo que não lhe pertence, peça licença;
8. Se não sabe como funciona, não mexa.
Para trabalhar no ambiente do laboratório, é
necessário desenvolver e seguir regras básicas que estão
relacionadas com a organização das atividades realizadas neste
local, visando colaborar com a realização dos trabalhos de forma
segura.
Recomendações de ordem pessoal
01. Guardar os objetos pessoais em locais apropriados
existentes na área externa ao laboratório;
02. Caminhar com atenção e nunca correr no laboratório;
03. Levar para o laboratório apenas o indispensável à realização
do trabalho;
04. Amarrar os cabelos antes de qualquer trabalho;
05. Não fumar, não comer ou beber no laboratório;
06. Usar sempre bata até os joelhos, com mangas compridas e
fechadas;
07. Usar os óculos protetores de olhos, sempre que desenvolver
trabalhos cujos procedimentos aconselhem a sua utilização;
08. Não o usar relógios, pulseiras, anéis ou qualquer ornamento
durante o trabalho no laboratório;
09. Não levar a mão à boca ou aos olhos quando estiver a
manusear produtos químicos;
10. Evitar qualquer contato dos reagentes com a pele;
11. Evitar trabalhar sozinho, e fora das horas de trabalho
convencional;
Recomendações de ordem pessoal
Recomendações de ordem pessoal
12. Certificar-se da localização das saídas de emergência;
13. Não misturar material de laboratório com seus pertences
pessoais;
14. Lavar cuidadosamente as mãos com bastante água e sabão,
antes de laboratório;
15. No trabalho em laboratório devem ser utilizados sempre
sapatos fechados, calças compridas, preferivelmente jeans;
16. Seguir corretamente o roteiro da aula ou da experiência e
não improvisar, pois improvisações podem causar acidentes;
Segurança na utilização de materiais de 
vidro
01. Colocar todo o material de vidro no local que deverá ser
previamente indicado na área do laboratório;
02. Não utilizar material de vidro quando trincado;
03. Não jogar cacos de vidro em recipiente de lixo;
04. Proteger as mãos com luvas antitérmicas quando for
necessário manipular peças de vidro que estejam quentes;
05. Não inspecionar o estado das bordas dos frascos de vidro
com as mãos sem antes fazer uma inspeção visual;
06. Tomar cuidado ao aquecer recipiente com chama direta.
Segurança na utilização de chamas
01. Não acender o bico de Bunsen com a válvula de gás muito
aberta;
02. De preferência, usar chama na capela e somente nos
laboratórios onde for permitido;
03. Ao acender o bico de Bunsen verificar e se necessário eliminar
os vazamentos, dobras no tudo de gás e ajuste inadequado
entre o tubo e suas conexões;
04. Verificar a existência de inflamáveis ao redor do bico de
Bunsen;
05. Apagar a chama imediatamente após o término do serviço.
Segurança na utilização de equipamentos
01. Não usar nenhum equipamento para o qual não tenha sido
treinado e autorizado a utilizar;
02. Ler atentamente as instruções sobre a operação do
equipamento antes de iniciar o trabalho;
03. Só operar os equipamentos elétricos quando os fios e
tomadas estiverem em perfeitas condições;
04. Não deixar equipamentos elétricos ligados no laboratório
fora do expediente (exceto geladeiras e freezers);
05. Enxugar qualquer líquido derramado no chão antes de
operar o equipamento.
Vidraria
a)Balões de fundo chato: é um dos mais utilizados em
microbiologia, útil no preparo meios.
a)Becker: é útil para a dissolução e pesagem do meio de
cultura. Comercialmente, pode ser adquirido sob as formas
de vidro e plástico e variados volumes.
c)Erlenmeyer: é utilizado para o preparo de meios de cultura
em geral.
a) b) c)
Vidraria
d)Proveta graduada ou cilindro de vidro: é empregado para a
medição de líquidos. Está a venda em plástico com base
hexagonal também em plástico, em vidro com base
hexagonal em plástico, em diferentes volumetrias. No
preparo de meios é útil na mediação do volume de água
necessário para a dissolução.
e)Tubos de ensaio: empregados na microbiologia para teste
bioquímico, análises microbiológicas, inoculação e para
conservação de cepas. Em geral, são preparados e
esterilizados antes de seu uso.
d) e)
Vidraria
f)
Placas de Petri: são utilizadas durante as análises para
semeadura. São comercializadas em vidro e em plástico
designadas como descartáveis em diferentes diâmetros.
g) h)
g) Bastão de vidro: empregados para homogeneizar e auxiliar
na transferência de líquidos.
h)Pipetas sorológicas ou graduadas: são cilindros com uma das
extremidades afiliadas utilizadas para mediação de líquidos
com escoamento de volumes fracionados. Comercialmente
podem ser encontradas em diferentes volumétricas, ou seja, de
0,1 a 50 mL e divisões decimais de 1/10 ou 1/100.
Vidraria
Vidraria
Lâminas e lamínulas: são utensílios utilizados para
visualização em microscopia óptica
i)
Vidraria
j) Funil de vidro: empregado para a transferência de substâncias , 
incluso meios de cultura.
k) Tubo de Durhan: utilizado para realização de enumeração de 
coliformes totais e termotolerantes. O gás produzido pelo micro-
organismo fica aprisionado no tubo de Durhan permitindo a 
identificação dos tubos positivos.
j) k)
Acessórios
• Espátula
As espátulas podem ser de 
aço inoxidável, de porcelana ou até de 
plástico. Serve para retirar substâncias 
químicas sólidas dos frascos.
• Tripé de Ferro
Tem formato de um arco de 
ferro, neste é ligado três hastes 
também de ferro que servem de pés. 
Serve para efetuar aquecimentos de 
soluções em vidrarias diversas de 
laboratório. É utilizado junto com a tela 
de amianto que é colocada em cima do 
tripé.
Acessórios
• Tela de Amianto
Suporte para as peças a serem
aquecidas. A função do amianto é
distribuir uniformemente o calor
recebido pelo bico de Bunsen.
Atualmente está sendo proibida sua
comercialização, por ser o amianto
cancerígeno.
• Bico de Bunsen
É a fonte de aquecimento mais utilizada
em laboratório. Mas contemporaneamente tem
sido substituído pelas mantas e chapas de
aquecimento. Deve-se evitar seu uso quando
utilizamos substâncias inflamáveis dentro do
recipiente que se quer aquecer.
Equipamentos
• Agitador de Tubos
Equipamento portátil que atua por impulsos,
utilizado em análise que requer homogeneização da
amostra.
• Banho-Maria
Equipamento em material
metálico com reservatório para água,
termostatizado, apresenta, orifício para
a instalação de termômetro, podem
apresentar tampa para vedação é feita
pela superposição de aros anelados.
Utiliza-se para aquecimentos suaves e
evaporação de líquidos e outros
materiais que necessitam de
dessecação prévia e baixas
temperaturas.
Balanças Semianalítica
• Manta Aquecedora
Equipamento com placas
metálicas, com resistênciaelétrica,
controles de temperatura, haste de ferro
e garras metálicas para sustentação da
vidraria. É utilizada em várias análises.
Estufa bacteriológica
Equipamentos
• Destilador de Água
Empregado para destilar água potável, ou seja, destituir a água
de seus minerais, pois os resíduos da água influenciam de forma
negativa nas operações dentro do laboratório, como por
exemplo, no preparo das soluções.
Métodos de Esterilização
Incineração
Calor úmido Calor seco Incineração
Autoclave vertical
121 ºC/15 min
Estufa de esterilização
e secagem
160-180 ºC/2 h
Incineração
Métodos de Esterilização
Calor úmido Calor seco Incineração
• Mais eficiente 
que o calor seco;
• Desnaturação e 
coagulação das 
proteínas;
• Vapor d’água 
sob pressão 
(autoclave);
• Meios de cultura, 
soluções e 
materiais 
contaminados;
• 121 ºC/15 min
• Alças ou agulhas 
de
semeadura;
• Chama do bico 
de
Bunsen;
• Remove todos os
micro-organismos;
• Obtenção de 
colônias
isoladas e 
inoculação de
meios.
• Alças ou agulhas 
de
semeadura;
• Chama do bico de
Bunsen;
• Remove todos os
micro-organismos;
• Obtenção de 
colônias
isoladas e 
inoculação de
meios.
São preparações que contêm os nutrientes
indispensáveis ao desenvolvimento dos micro-
organismos em laboratório.
Meios de Cultura
Suas funções são:
• Permitir o cultivo e a conservação dos micro-
organismos em laboratório;
• Fornecer condições para o crescimento de um micro-
organismo desejado (Ex. culturas puras);
• Isolar e identificar espécies de micro-organismos.
Exigências nutricionais dos 
micro-organismos
Compostos orgânicos complexos
 Carboidratos
 Proteínas
 Lipídeos
• Fornecem energia para o
crescimento da célula
• Servem como unidade básica
do material celular
Compostos inorgânicos
Elementos químicos essenciais:
• Carbono
• Nitrogênio
• Hidrogênio
• Oxigênio
• Enxofre (aa sulfurados)
• Fósforo (ácidos nucleicos e 
ATP)
• Síntese
• Funções normais dos
componentes celulares
MO Absorvem
nutrientes quando
dissolvidos na água
Composição média da célula bacteriana
Exigências nutricionais dos 
micro-organismos
Exigências nutricionais dos 
micro-organismos
Classificação dos meios de cultura
1. Quanto a apresentação (estado físico)
• Líquidos
• Sólidos
ágar: polissacarídeo complexo extraído de uma alga marinha
utilizado extensivamente em meios sólidos. Podem ser adicionado
na concentração aproximada de 1,5 % (p/v). Funde-se a
temperatura de ebulição da água, formando uma solução
transparente, que permanece no estado líquido até
aproximadamente 40 ºC. Em temperatura inferiores a 40 ºC, o
meio solidifica. Não é metabolizado pelos micro-organismos.
Classificação dos meios de cultura
2. Quanto a função
• Enriquecimento: possuem substâncias com potencial
nutritivo que favorecem o crescimento de determinada
espécie, mas não de outras (pequeno número de células).
• Seletivo: permitem o crescimento de um tipo particular de
micro-organismo e/ou suprimem o crescimento de outros.
• Diferencial: permitem a distinção entre diferentes grupos de
micro-organismos com base na capacidade de
metabolização de componentes específicos do meio ou na
morfologia (aparência) das colônias.
Classificação dos meios de cultura
Enriquecimento Seletivo Diferencial
Coliformes
Salmonella spp.
Aeromonas
Listeria
Rappaport
Selenite Cystine
Tetrathionate
Classificação dos meios de cultura
3. Quanto a composição química
• Naturais (complexos): composição química não definida
– Extrato de carne
– Extrato de malte
– Peptonas (caseína do leite, hidrolisado de proteínas da 
soja)
– Extrato de levedura
– Sangue
• Sintéticos: todos os constituintes são substâncias 
isoladas.
Composição geral dos meios de cultura
A maioria dos meios de cultura é comercializada sob a
forma desidratada, por empresas especializadas, e
contêm:
1. Nutrientes nitrogênio-amínico (peptonas e hidrolisados proteicos)
2. Fatores de promoção do crescimento (sangue, soro, vitaminas, 
NADH)
3. Fontes de energia (glicose e outros carboidratos)
4. Tampão de fosfato (sais de fosfato, acetatos e citratos)
5. Sais minerais e metais (sulfatos, fosfatos, Ca, Mg, Fe, Mn)
6. Agentes seletivos (reagentes químicos, antibióticos, corantes inibidores)
7. Corantes indicadores (fenol vermelho, vermelho neutro, bromocresol
púrpura)
8. Agentes gelificantes (agar, gelatina, alginato)
Como preparar meios de cultura?
• Ler o rótulo do meio de cultura;
• Calcular a proporção de meio desidratado necessário;
• Medir o volume de água destilada necessária;
• Pesar o meio desidratado em balão ou erlenmeyer
mantendo-o sempre tampado;
• Acrescentar a água destilada em quantidade adequada;
Como preparar meios de cultura?
• Esterilizar conforme a indicação do rótulo.
Obs. os meios de cultura que contém agar devem ser 
dissolvidos em banho-maria ou bico de Bunsen antes de 
ser esterilizados. Já os caldos devem ser distribuídos nos 
tubos. Alguns meios precisam ainda ser adicionados de 
algumas substâncias (proceder conforme indicação no 
rótulo).
Métodos de Esterelização
Autoclave Vertical
Dúvidas?
Aula prática 1:
Vidrarias, acessórios e equipamentos
Prof. Helena T. Diniz Silva
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