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Microbiologia dos Alimentos MICRORGANISMOS INDICADORES DE QUALIDADE NOS ALIMENTOS Prof. Marcus Covre DEFINIÇÃO Microrganismos indicadores são grupos ou espécies de microrganismos que, quando presentes em um alimento e/ou água, podem informar sobre a ocorrência de contaminação. Indica o quê? Contaminação de origem fecal Presença de patógenos Deterioração potencial do alimento (vida de prateleira). Falha no processo de higiene e condições sanitárias inadequadas 2 IMPORTÂNCIA SANITÁRIA Como pode ser feita a detecção de contaminação ou deterioração nos alimentos e/ou água? Identificação do microrganismo: Coleta de amostras e cultivo em meios de cultura. Detecção de seus produtos do metabolismo: Coleta de amostras e dosagem dos subprodutos de degradação. Metabólito Alimento Aplicável Ácido lático Vegetais enlatados Ácidos graxos voláteis Manteiga Cadaverina e putrescina Carne embalada a vácuo Etanol Suco de maçã, peixes e derivados Histamina Atum emlatado Alguns metabólitos de atividade microbiana. CRITÉRIOS PARA SER INDICADOR Rápida e fácil detecção; Deve ser facilmente distinguível de outros membros da flora do alimento; Associado com patógenos (muito caro e trabalhoso realizar testes para todos os patógenos); Seu número correlacionar-se com o do patógeno; Taxa de crescimento e velocidade semelhantes às do patógeno; Taxa de mortalidade que seja ao menos paralela a do patógeno, de preferência sobrevivência levemente superior à do patógeno; Estar ausente nos alimentos que estão livres de patógenos. Existe um microrganismo indicador perfeito? 4 INDICADORES DE QUALIDADE DOS ALIMENTOS Indicadores de contaminação fecal (qualidade sanitária do alimento - Coliformes) Indicadores de deterioração dos alimentos (vida de prateleira) Indicadores de possível fonte de intoxicação (toxinas) 5 Microganismos indicadores INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO FECAL São utilizados para indicar a qualidade sanitária e segurança de determinados alimentos. O indicador ideal de contaminação fecal deveria preencher, além dos requisitos anteriormente citados, os seguintes: Hábitat exclusivo o intestino do homem e outros animais; Estar em número muito alto nas fezes; Alta resistência ao ambiente extra-enteral; Detectado e quantificado com técnicas rápidas, simples e precisas. Família Enterobacteriaceae: Coliformes totais, coliformes termotolerantes e E.coli. 6 O GRUPO COLIFORME Termotolerantes: E. coli, Klebsiella, Enterobacter e Citrobacter. E. coli Coliformes totais: Escherichia, Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter, embora vários outros gêneros e espécies pertençam ao grupo E.coli 7 Microganismos indicadores INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO FECAL Coliformes totais Indicador indireto de contaminação; Bacilos gram-negativos, não formadores de esporos; Capaz de fermentar a lactose (enzima B-galactosidase) e produzir gás, quando incubados a 35-37◦C. Bactérias: E.coli, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella, e outros gêneros. A presença do coliformes totais em alimentos não indica, necessariamente, contaminação fecal, pois os gêneros Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella também podem ser encontrados em outros ambientes como solo e vegetais. 8 Microganismos indicadores INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO FECAL Coliformes termotolerantes Indicador indireto de contaminação; Chamava-se erroneamente coliformes fecais (algumas espécies não são exclusivamente de origem fecal); Bactérias: E.coli, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella; Sub-grupo das bactérias do grupo dos coliformes totais, que fermentam a lactose (enzima B-galactosidase) com produção de gás à 44-45,5◦C. 90% das culturas são de E.coli. 9 Microganismos indicadores INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO FECAL Escherichia coli Indicador indireto de contaminação; Principal indicador de contaminação fecal; Encontrado exclusivamente no intestino do homem e outros animais de sangue quente; Uso proposto em 1892, para indicar contaminação fecal em água; A sua presença em pequena quantidade pode ser tolerável, mas o ideal é ausência em todas as amostras. 10 Microganismos indicadores E.Coli em meio cromofluorogênico E.coli E.Coli em ágar eosina-azul de metileno INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO FECAL Enterococos Indicador indireto de contaminação; Antigamente chamados de Streptococcus fecais; E. faecalis e E. faecium; Desvantagem: também encontrados em ambientes diferentes do trato intestinal; Vantagem: Maior sobrevivência do que os enteropatógenos (resistência a desidratação, desinfetantes, e variações de temperatura, salinidade). Indica práticas sanitárias inadequadas ou exposição do alimento a condições que permitam a multiplicação de microrganismos indesejáveis. 11 Microganismos indicadores INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO FECAL Salmonella Indicador direto de contaminação; Bactéria gram-negativo; Pesquisada geralmente quando ocorrência de surtos sob suspeita desta bactéria; A detecção não é simples como os outros indicadores (necessidade de enriquecimento e reativação); Geralmente monitorada nos manipuladores de alimentos (cultura de fezes, mãos e utensílios). 12 Microganismos indicadores Salmonella em ágar XLD INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO E DETERIORAÇÃO DOS ALIMENTOS Microrganismos que, quando presentes em números elevados nos alimentos, poderão causar a deterioração ou redução da vida de prateleira. 13 Microganismos indicadores INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO E DETERIORAÇÃO DOS ALIMENTOS Bactérias Aeróbias Mesófilas Indicador direto de contaminação; Utiliza oxigênio e desenvolve em temperaturas entre 20ºC e37◦C. Bactérias que crescem em meios de cultura generalistas, e são capazes de indicar a qualidade sanitária dos alimentos (contagem total de bactérias em placas); Contagem elevada indica o uso de matéria-prima contaminada ou processamento insatisfatório. Nos alimentos perecíveis indica abuso no armazenamento quanto ao tempo e temperatura; Todas as bactérias patogênicas de origem alimentar são mesófilas (indica que há condições favoráveis para o desenvolvimento de patógenos). Pseudomonas e Proteus – elevada contagem pode levar a deterioração. O seu limite aceitável depende do tipo de alimento. Ágar Padrão para Contagem 14 INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO E DETERIORAÇÃO DOS ALIMENTOS Bactérias Psicrofílicas, Psicrotróficas e Termófilos Indicador direto de contaminação; Psicrofílicos: Temperatura de crescimento entre 0ºC e 20ºC (Pseudomonas); Psicrotróficos: Temperatura de crescimento próximo de 7ºC, podendo crescer abaixo de 0ºC (Klebsiella, Streptococcus); Termófilos: Crescem em temperaturas acima de 55ºC (Bacillus); Avaliam o grau de deterioração de alimentos refrigerados (temperaturas próximas do congelamento) ou daqueles submetidos a tratamento térmico (temperaturas próximas de 60◦ C). 15 Microganismos indicadores INDICADORES DE INTOXICAÇÃO E DETERIORAÇÃO DOS ALIMENTOS Bolores e Leveduras Crescimento favorável em alimentos com pH ácido e baixa atividade de água (perdas econômicas em frutas cítricas, alguns vegetais , cereais, sucos, queijos e alimentos congelados). Problemas relacionado: produção de micotoxinas. A produçãode toxinas geralmente está associada a presença de bolores, e não de leveduras. 16 INDICADORES DE INTOXICAÇÃO POR ALIMENTOS Bactérias Anaeróbias Não são pesquisadas rotineiramente, as técnicas não são simples; Necessita de ambiente em anaerobiose; A presença indica que houve condições favoráveis para a multiplicação de microrganismos patogênicos anaeróbios, como Clostridium botulinum e Clostridium perfringens. 17 INDICADORES DE INTOXICAÇÃO POR ALIMENTOS Staphylococcus aureus A presença em número elevados nos alimentos indica perigo potencial à saúde pública, devido a possibilidade de produção de enterotoxinas. Representa perigo principalmente em alimentos que envolvem manipulação e processamento. Ágar Baird-Parker Ágar Manitol 18 S. Aureus coloração de gram (gram-positivo). Indicadores adotados nos alimentos Alimento Microrganismo indicador Pescado fresco CPP*, Coliformes totais e S. aureus Camarão cru congelado CPP, Colif. Termotolerantes e S. aureus Vegetais consumidos crus E.Coli e Salmonella Alimentos desidratados dietéticos CPP, E.coli, S. aureus, C. perfringens, Salmonella Leite em pó CPP, Coliformes totais e S. aureus Carne crua CPP e Salmonella *CPP = Contagem Padrão em Placas. Obs.:Para cada alimentos determinado microrganismo pode apresentar contagem específica (observar a legislação vigente). 19 Microganismos indicadores Legislação vigente Qualidade da Água para Consumo Humano – Portaria ANVISA/MS nº2914/2011. Regulamento Técnico sobre Padrões Microbiológicos para Alimentos – Resolução Anvisa nº12/2001. 20 Microganismos indicadores
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