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ENZIMOLOGIA e BIOQUÍMICA CLÍNICA1. Não geram sub-produtos indesejáveis; 2. Atuam em condições brandas de pH, temperatura e pressão; 3. Especificidade pelo substrato; 4. Controle das vias metabólicas. Proteínas catalisadoras que aumentam a velocidade das reações sem serem, elas próprias, alteradas nesse processo ENZIMAS ESTRUTURA das ENZIMAS •Todas possuem estrutura 1ª, 2ª, 3ª •A maioria possui estrutura 4ª(associação de subunidades ou protómeros) •A alteração da estrutura acompanha-se de perda de atividade - desnaturação(reversível ou irreversível) Enzimas com estrutura primária (seqüência de A) diferente, catalisando a mesma reação (mesma função), codificadas por genes estruturais diferentes. Formas moleculares múltiplas de uma enzima. Isoenzimasdiferentes podem originar-se de tecidos diferentes, e sua determinação específica pode fornecer pistas em relação ao sítio da patologia. Isoenzimasgenéticas e não genéticas (isoformas– modificação pós-transdução) A zona sombreada são os aminoácidos desta enzima (proteína) que configuram, nestecaso, o centro ativo da enzima ESPECIFICIDADECLASSIFICAÇÃO em RELAÇÃO às REAÇÕES QUÍMICAS CATALISADAS ENZIMAS CLASSIFICAÇÃO em RELAÇÃO AO SEU LOCAL 1) Enzimas específicas do plasma Presente em concentração mais elevada, éespecífica do plasma e tem papel funcional no plasma. Trombina, plasmina, lipoproteína lipase. 2) Enzimas secretadas* Lipase, amilase, colinesterase. 3) Enzimas celulares* LDH, FAL, AST, ALT. * Normalmente estão em concentração muito baixa e não tem papel funcional no plasma. Aparecem no sangue incidentalmente e tem valor diagnóstico. A lesão dos tecidos de origem ou a proliferação aumentada das células de onde surgem estas enzimas levarão a um aumento da atividade dessas enzimas no plasma. Fatores que afetam os níveis enzimáticos no plasma ou no soro ENZIMAS de DIAGNÓSTICO Para que o diagnóstico do envolvimento de um órgão seja feito através de enzimas, deve-se: •Conhecer a proporção entre as enzimas, que difere de tecido para tecido; •Conhecer a cinética do aparecimento e desaparecimento da enzima no plasma. Enzimas que não são específicas do plasma são depuradas do plasma em velocidades variáveis (estabilidade da enzima e captação pelo sistema retículo-endotelial). ENZIMAS de DIAGNÓSTICO Principais enzimas utilizadas no diagnóstico de doenças são: Fosfatase Fosfatase ÁÁcidacida Fosfatase AlcalinaFosfatase Alcalina AST/TGOAST/TGO ALT/TGPALT/TGP GGTGGT AmilaseAmilase LipaseLipase CKCK LDHLDH Fosfatase Ácida •Maiores concentrações:próstata, no fígado, na medula óssea, nos eritrócitos e plaquetas. •↑fração não-prostática:crianças em fase de crescimento e patologicamente aumentada em condições em que existe um hipermetabolismo ósseo. •Utilidade diagnóstica: diagnóstico e monitoramento da resposta ao tratamento e monitoramento de metástases, no CA de próstata. •Maiores concentrações: presente em praticamente todos os tecidos do organismo, especialmente nas membranas das células dos túbulos renais, ossos (superfície dos osteoblastos), placenta, trato intestinal e fígado. •Função: transporte de lipídios no intestino e nos processos de calcificação óssea. Fosfatase Alcalina Fosfatase Alcalina ••Utilidade Diagnóstica: : doenças ósseas que cursam com aumento da atividade osteoblásticae na investigação de doenças hepatobiliares. A resposta hepática a qualquer tipo de agressão da árvore biliar ésintetizar fosfatase alcalina principalmente nos canalículos biliares. •Recém-nascidos, crianças, e especialmente adolescentes, apresentam valores significativamente mais elevados do que os adultos, devido ao crescimento ósseo. TGO ou AST •Utilidade Diagnóstica:hepatites virais agudas, hepatites alcoólicas, metástases hepáticas e necrose medicamentosas e isquêmicas, e infarto agudo do miocárdio. Transaminase Glutâmico Oxalacética / Aspartato Amino Transferase •Maiores concentrações:encontrada em diversos órgãos e tecidos, incluindo coração, fígado, músculo esquelético e eritrócitos. •Citoplasma e mitocôndrias TGP ou ALT •Utilidade Diagnóstica:patologias que levam a necrose do hepatócito(hepatites virais, mononucleose, citomegalovirus e hepatites medicamentosas). TransaminaseGlutâmico Pirúvica / Alanina AminoTransferase
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