TITULAÇAO DE AMINOACIDO

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CURSO TECNICO EM BIOTECNOLOGIA
DISCIPLINA DE PROCESSOS BIOQUÍMICOS
PROF.ª BIANCA PFAFFENSELLER
Prática II:
TITULAÇÃO DE AMINOÁCIDO
NOTA = 8,0
ALUNAS: JESSIKA LARA, PAULA SOARES E THAYANA DA SILVA
 Porto Alegre, 25 de março de 2014
Introdução: Um aminoácido é uma molécula orgânica que contém um grupo amina e um grupo carboxila, e uma cadeia lateral que é específica para cada aminoácido. Os aminoácidos são constituídos porconstituem as proteínas, e são formados por um grupamento carboxila (COOH) e um grupamento amina (NH2) e um radical que determina um dos 20 AA já conhecidos.	Comment by Adriano: Isso já foi mencionado na mesma frase.
 
A titulação de aminoácidos determina o pH sobre a estrutura dos aminoácidos onde ocorre desprotonação dos grupos carboxila e amino. Em pH ácido, os AA estão carregados positivamente e em pH alcalino estão carregados negativamente. Ao se adicionar o AA em uma solução ácida, ocorre a protonação dos grupos ionizáveis. Assim com a adição de uma solução básica, observa-se a diminuição da concentração de prótons e eleva o pH. Na titulação de um aminoácido em determinado momento se observa a resistência na variação de pH (efeito tamponante), causado pelo grupamento carboxila (em solução ácida), e pelo grupamento amino (em solução básica). O ponto onde é possível observar o fim da liberação de prótons pelo grupo carboxila é o ponto de isoelétrico , a carga total é igual a zero/nula do aminoácido, após o grupo amino que libera seu próton, que também é possível observar o pI.	Comment by Adriano: ?	Comment by Adriano: Ficou confusa essa parte (reestruturar).	Comment by Adriano: Faltou falar dos pKs dos AA.Representar/explicar uma curva de titulação de AA.	Comment by Adriano: qual a consequencia do pI na solubilidade de um AA?
A titulação também é útil para determinar a reatividade das cadeias laterais dos aminoácidos. O processo de titulação é utilizado para determinar a concentração de uma solução amostra através de sua reação com outra solução de concentração conhecida (padrão).	Comment by Adriano: No caso de uma titulacao de AA, foi este objetivo da titulação? 
Objetivo: Identificar aminoácidos utilizando os valores de pks obtidos a partir de uma curva de titulação. 
Materiais:
25 mL de solução de aminoácidos desconhecidos a 0,02 M (preparado em água acidificada – 2 gotas de HCl)
NaOH 0,1 M
Soluções padrão para calibração dos potenciômetros
Béquer 100 mL
Potenciômetro
Métodos: 
Calibramos os potenciômetros com padrões de pH 4,0 e 7,0;
Medimos o pH da solução de aminoácidos desconhecidos;
Transferimos para um béquer 25 mL desta solução;
Fomos adicionando a solução de NaOH de 0,5 a 0,5mL até a nona medição, após aumentamos o volume adicionado para 1 em 1 mL;
A cada mL adicionado fomos medindo o pH da solução.;
Adicionamos base até que o pH atingisse 12.
Resultados: 
	Volume de NaOH (mL)
	pH
	25
	1,61
	25,5
	1,59
	26
	1,66
	26,5
	1,71
	27
	1,81
	27,5
	1,87
	28
	1,98
	28,5
	2,09
	29,5
	2,25
	30,5
	2,46
	31,5
	2,85
	32,5
	4,73
	33,5
	9,26
	34,5
	9,78
	35,5
	10,18
	36,5
	10,72
	37,5
	11,30
	38,5
	11,58
	39,5
	11,73
	40,5
	11,81
	41,5
	11,88
	42,5
	11,95
	43
	12
pPK1= 1,61+1,66+1,81=	1,69
3
pPK2= 11,81+11,88+11,95= 11,88
3
pPI= 1,69+11,88= 6,78
2
Conclusão: Através do resultado do nosso gráfico foi possível concluir que o aminoácido desconhecido tem um pPI de 6,78 (significa que é o ponto onde o valor de pH do aminoácido apresenta carga elétrica igual a zero). Comparando nossos valores com a tabela de valores de pPKs observamos que não conseguimos identificar qual foi o aminoácido desconhecido, pois os valores não se aproximaram da tabela de pPKs, talvez se tivéssemos continuado a adicionar base de 0,5 a 0,5mL conseguiríamos chegar nos valores próximos aos da tabela. 	Comment by Adriano: Explicar a curva de titulação: como o AA está no pK1, pI e no pk2? Qtos % protonados...
Com base nos gráficos dos nossos colegas percebemos que eles utilizaram uma quantidade maior de base para atingir o pH 12 do aminoácido desconhecido.	Comment by Adriano: Mesmo o experimento não sendo determinante para um aminoácido, vcs podem sugerir alguns possíveis (colocando a tabela de pKs aqui) e excluindo aqueles que não podem ser.
Bibliografia: 	Comment by Adriano: Rever normas de bibliografia (forma padrão de colocar).
Protocolo ‘Titulação de aminoácidos’
http://www.ebah.com.br/content/ABAAABHJkAC/pka-ph-tampao