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UNIP – UNIVERSIDADE PAULISTA INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE - ICS CURSO DE NUTRIÇÃO DISCIPLINA DE MICROBIOLOGIA DOS ALIMENTOS AULA PRÁTICA – (ANÁLISE DAS MÃOS/COLETA DE AMOSTRA) DATA 20/05/2019 Araçatuba 2019 AULA PRÁTICA – (ANÁLISE DAS MÃOS/COLETA DE AMOSTRA) DATA 20/05/2019 Relatório de aula prática elaborado pelos alunos do 3º semestre do curso de graduação em Nutrição, da Universidade Paulista, campus Araçatuba, para a disciplina de Técnica e Dietética, ministrada pela Profª Adriana Araçatuba 2019 Sumário 1.Introdução...............................................................................................................01 2.Breve Relato.......................................................................................................... 02 3.Objetivo.................................................................................................................. 03 4.Metodologia............................................................................................................ 04 5.Resultados............................................................................................................. 05 6.Conclusão............................................................................................................... 06 7.Referências............................................................................................................. 07 8.Anexo.......................................................................................................................08 Introdução Análise das Mãos: A higienização das mãos é considerada a ação isolada mais importante no controle de infecções em serviços de saúde. A utilização simples de água e sabão pode reduzir a população microbiana presente nas mãos e, na maioria das vezes, interromper a cadeia de transmissão de doenças. A formação da microbióta normal, com a qual o homem convive por toda a vida, tem inicio no momento do nascimento, pois ao passar pelo canal do parto, ele recebe os primeiros componentes de sua microbiótica. A microbióta normal distribui-se pelas partes do corpo que estão em contato com o meio externo, isto è, pele e mucosa. A microbiòta normal da pele é dividida em residente e transitória. Sendo que a residente se colonizam nas camadas mais profundas da epiderme e é mais resistente a remoção pelas técnicas de higienização, e a transitória colonizam-se nas camadas mais superficiais e são geralmente, removíveis pela higiene com água e sabão ou destruídos pelo uso de anti-sépticos. Coleta de amostra: A amostra é coletada utilizando-se o swab e respeitando-se os procedimentos de coleta com o objetivo de evitar contaminação externa. O meio de cultura e a estufa oferecem condições ideais para o desenvolvimento de colônias de microrganismos. Breve Relato Nessa aula pratica fizemos coleta de amostra utilizando swab, cuja seu procedimento de coleta consiste em cuidados para não tocar a ponta. Fizemos coleta do lixo, bebedouro e por baixo das unhas. Fizemos o isolamento total do microrganismos, utilizamos para amostra: Cabelo, unha das mãos e dos pés. Retornamos no outro dia, conseguimos comparar e notar que a maior proliferação foi na unha do pé. Objetivo A aula teve como objetivo demonstrar de forma prática o conteúdo de Microbiologia, enfatizando algumas formas de controle microbiano.Verificar a eficiência da lavagem correta das mãos, com o uso de anti-sépticos, visando à diminuição máxima da microbiota das mãos. - Aprender e praticar a técnica do swab. Metodologia Isolamento de microrganismos totais 1. Homogeneizar a amostra usando água peptonada 0,1%, agitando os tubos de coleta; 2. Proceder a diluições decimais sucessivas com água peptonada (até 10-6); 3. Após as diluições realizadas, proceder a semeadura pelo método de pour plate nas placas com meio Plate Count Agar (PCA), utilizando a diluição de 10-6. 4. Incubar as placas a 35°C por 48 horas. 5. Após a incubação, determinar a presença ou ausência de bactérias ou proceder à contagem do número de colônias por mL de amostra. Isolamento de fungos filamentosos e leveduras 1. Homogeneizar a amostra usando água peptonada 0,1%, agitando os tubos de coleta; 2. Proceder a diluições decimais sucessivas com água peptonada (até 10-6); 3. Após as diluições realizadas, proceder a semeadura pelo método de pour plate nas placas com meio ágar Sabouraud+cloranfenicol, utilizando a diluição de 10- 4. Incubar as placas a 28°C por 3 a 5 dias. 5. Após a incubação, determinar a presença ou ausência de fungos e leveduras ou proceder à contagem do número de colônias por mL de amostra. Coleta com uso de swab Para coleta com uso de swab, proceder à amostragem abrindo o invólucro contendo o swab e segurando-o sempre pelo cabo sem tocar a ponta que irá proceder à coleta. Umedecer a ponta do mesmo na solução (especificar com o técnico do laboratório a solução e quantidade em mL) e retirar o excesso comprimindo a ponta do swab contra as paredes do frasco ou tubo com movimentos giratórios. Segurar o swab em ângulo de 30º ao colocá-lo em contato com a superfície a ser amostrada. Esfregar a ponta do swab lentamente e em toda a área determinada. Após amostrado, quebrar o cabo do swab de modo a retirar a parte que for tocada com a mão e acondicioná-lo em tubos com 5mL de água peptonada 0,1% estéril. Encaminhar para o laboratório em gelo ou outro agente refrigerante entre 1 a 4ºC, tão logo seja possível, preferentemente dentro de 4 horas. As amostras podem ser mantidas sob refrigeração entre 2 a 8ºC por um período não superior a 24 horas. Resultados Conclusão Os procedimentos adequados para o isolamento de microrganismo, como a higienização das mãos, isolamento do swab e placa de petri, são muito importantes para a correta identificação dos microrganismo que realmente estão no local analisado. A contaminação externa resulta em uma identificação equivocada dos microrganismo contaminantes, acarretando em procedimentos ineficazes para o seu tratamento. Referências TRABULSI,L.R .; ALTERTHUM,F. ; GOMPERTZ,O.F. ; CANDEIAS,J.A.N. , Microbiologia. Ed. Atheneu, São Paulo, 2002 (BRASIL, 2001). (SILVA, et al; 1997). (FRANCO & LANDGRAF,2003). Anexos