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caracterização qualitativa - carboidratos, acúcares redutores e proteínas

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REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO QUALITATIVA DE AMOSTRAS EM 
LABORATÓRIO CARBOIDRATOS: 
-Bial (orcinol): reação de distinção das pentoses de hexoses. Identifica pentoses, 
carboidratos contendo pentoses e ácidos urônicos; através da avaliação das funções 
orgânicas presentes nas moléculas e das características por elas proporcionadas. Nesta 
reação ocorre a formação do furfural sob ação de ácidos concentrados. O resultado 
positivo revela cor verde-azulada e com isso a formação de pentoses. Reagentes 
geralmente utilizados para teste: amido e glicose (não reagem: marrom), ribose (reage: 
verde-musgo).

 -Seliwanoff: teste que busca diferenciar cetoses de aldoses - sob ação desidratante de 
ácidos concentrados são transformados em derivados do furfural que se condensam 
com o resorcinol- formando um composto vermelho. As reações de cetoses (frutose) são 
mais rápidas e intensas que com aldoses (glicose); por isso o teste é, muitas vezes 
considerado específico para frutose. A sacarose pode dar resultado positivo se sofrer 
hidrólise parcial (glicose e frutose), para outros tipos de açúcares um aquecimento 
prolongado pode dar uma cor avermelhada. Positivo: vermelho escuro - cetoses/ 
cetopentoses: azul esverdeada/ aldose e dissacarideos: sem cor) Solvente: ácido 
clorídrico/ soluto: resorcinol 

-Iodo (lugol): Indica a presença de polissacarideos (amido), permitindo obter 
informações sobre o tamanho e grau de ramificação da molécula de carboidrato. Utiliza-
se o Amido como controle positivo e o sal de cozinha, por exemplo, como negativo. O 
iodo se liga ao amido dando origem a uma substância de coloração azul tão intensa que, 
se pouco diluída, pode parecer arroxeada. (Amilopectina/ glicogênio: vermelho; celulose: 
transparente devido à forma da molécula; amilose/amido: azul)

 Utilização clínica: verificar a adulteração de óleos e gorduras. Lembrar, também, que o 
iodo é utilizado como antiseptico, podendo combater fungos e bactérias; entretanto é 
tóxico ao homem e não deve ser ingerido nem colocado em contato com mucosas.

 AÇÚCARES REDUTORES:

 -Benedict: reagente que avalia o poder redutor de açúcares; o grupo hidroxila livre no 
carbono 1 de alguns indica que são bons redutores e com isso capazes de reduzir íons 
metálicos em solução alcalina. Ao reduzir íons de Cu2+ para Cu +; nota-se a formação de 
um precipitado e coloração vermelha (alto índice de açúcar), se aparecer cor esverdeada 
indica baixo nível de açúcar e azul indica ausência de glicose. Geralmente a reação é 
feita em meio básico. A sacarose não sofre oxidação pois possui dois carbonos 
anoméricos envolvidos na ligação glicosidica. 

Reativo de Benedict: citrato de sódio penta hidratado, carbonato de sódio anidro, sulfato 
de cobre e água destilada. Utilização clínica: usado na detecção de excesso de açúcar 
na urina e alcaptonúria.

 -Barfoed: distinguir monossacarideos de dissacarideos. A formação de precipitado 
vermelho tijolo em menos de dois minutos indica monossacarideo e a não formação 
deste indica dissacarideo. 

Reativo: água destilada, acetato cúprico e ácido acético glacial.

 PROTEÍNAS 

-Biureto: analisa as proteínas totais da amostra. Ou seja revela a presença de ligações 
peptidicas, indicando as reações de proteínas e peptídeos com sulfato de cobre. O 
biureto é a estrutura originada a partir da decomposição da ureia quando essa é 
submetida a altas temperaturas (180C). Soluções alcalinas que contém Biureto 
desenvolvem cor violeta na presença de sulfato de cobre, visto que forma-se um 
complexo entre os átomos de Cu2+ e os átomos de nitrogênio da molécula de biureto. 
Geralmente utiliza-se como reagente: albumina e hidróxido de sódio. 

Utilização clínica: proteínas totais quando traduz concentração elevada pode indicar 
lupos, cirrose hepática e desidratação, por exemplo. Se está com valor diminuído pode 
ser sinônimo de desnutrição, insuficiência renal, queimaduras, hiper-hidratação e etc. 

-ESBACH: permite visualizar um precipitado amarelo para proteinas e estudar a 
dissolução deste precipitado.(NaOH) 

Utilização clinica: Presença de albumina na urina. 

-Metais pesados: precipitação de proteínas acima do ponto isoeletrico. Assim, ânions 
de metais pesados (Hg2+, Pb2+, Cu2+, Fe2+, Cd2+ e Zn2+ formam precipitados 
insolúveis de proteínas. Esta precipitação é mais intensa quando o Ph está acima do 
ponto isoeletrico, já que a carga líquida sobre a proteína é negativa e favorece a interação 
com cations provenientes do sal. Ou seja, a reação provoca a desnaturação de proteínas 
por meio de metais pesados. Alterando o pH pode ressolubilizar o precipitado

 -Ácido forte: quando a proteína está abaixo do seu pI, a carga líquida total da molécula 
é positiva, facilitando a interação desta com os ânions provenientes de acidos. Alterando 
o pH pode-se ressolubilizar o precipitado. Forma-se, na junção dos dois líquidos -que 
não devem ser misturados - um anel branco de albumina precipitada.

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