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Wismith Andrade 2019007968 PRÁTICA Nº 10 ATIVIDADE DE CATALASE EM TUBÉRCULOS DE BATATINHA INTRODUÇÃO Durante a respiração, pode haver formação de peróxido de hidrogênio (H2O2), que é tóxico para as células. Sabe-se que essa substância é um potente inibidor de muitas enzimas, devendo existir, portanto, um mecanismo enzimático nos tecidos que promova sua destruição. Há evidências de que as células geralmente contêm enzimas denominadas catalases, que utilizam H2O2. Catalase 2 H2O2 2 H2O + O2 Outras funções de catalases nas plantas ainda não estão determinadas. OBJETIVO Observar a atividade de catalases em tubérculos de batatinha. MATERIAL - Água oxigenada 20 volumes - Placa de Petri (1) - Tubérculo de batatinha PROCEDIMENTO 1- Coloque uma fatia fina de tubérculo de batatinha em uma placa de Petri e cubra-a com uma solução diluída (30:1) de peróxido de hidrogênio. A evolução de bolhas de oxigênio indica a presença de catalase. 2- Repita a operação com uma fatia de batatinha que tenha sido anteriormente fervida por 5 minutos. 3- Interprete os resultados. Figura 1. Demonstração da atividade de catalase em fatias de tubérculos de batatinha: (a) tubérculo não fervido, mostrando a liberação de oxigênio (formação de espuma) resultante da ação catalítica da catalase sob o peróxido de hidrogênio e (b) tubérculo fervido, sem formação de espuma, indicando que a catalase foi desnaturada. COMENTÁRIOS As catalases são enzimas que utilizam o peróxido de hidrogênio como substrato formando água (H2O) e gás oxigênio (O2) como produtos. As catalases fazem isso de maneira extremamente eficiente, com até 200 mil reações por segundo. Ao se adicionar peróxido de hidrogênio em fatias de batatinha ou sobre um ferimento, observa-se a a b formação de espuma, que na realidade são bolhas de oxigênio formadas pela ação catalítica desta enzima. Experimento: QUESTÕES 1- Dê a reação das catalases, indicando o substrato e os produtos. 2H2O2 (água oxigenada) + fatias de batata H2O + O2 Substrato Produto 2- Cobrindo fatias de batatinha com água oxigenada, observa-se maior evolução de bolhas de oxigênio nos tecidos da periferia do que nos tecidos internos. Por quê? O surgimento de bolhas nas extremidades com maior intensidade é devido a alta atividade metabólica nessa região, pois as atividades meristemáticas e respiratórias são mais intensas nas margens do que núcleo (córtex), onde há maior acúmulo de amido. A B Imagens de fatias de batata: A – fatia de batata com peroxido de hidrogênio, não fervida; B – fatia de batata com peroxido de hidrogênio, fervida por 5min. catalase 3- Que diferenças existem entre catalases, peroxidases e desidrogenases quanto às reações que catalisam? Essas enzimas estão relacionadas às atividades oxidativas e antioxidativas, e ambas apresentam o peróxido de hidrogênio (H2O2) como substrato. A catalase apresenta o H2O2 como substrato, produzindo H2O e O2; as peroxidases utilizam o H2O2 como agente oxidante de determinados compostos orgânicos; as desidrogenases são enzimas que oxidam diferentes compostos orgânicos, elas utilizam o FAD e NAD+ como coenzimas. 4- Explique a principal diferença entre enzimas “preexistentes” e as sintetizadas “de novo”. As enzimas preexistentes são aquelas que se encontram em níveis constantes na célula, pois executam processos essenciais. Já as enzimas sintetizadas “de novo”, são sintetizadas em situações especificas, ou seja, vão depender de algum estimulo. As enzimas catalases são enzimas “preexistentes”, pois estão em níveis constantes nas células.