Determinação do Número de Substâncias Reativas ao Ácido Tiobarbitúrico

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Determinação do Número de Substâncias Reativas ao Ácido Tiobarbitúrico (TBARS) (TARLADGIS et al., 1960).
Procedimento:
· Pesar 5 g de amostra
· Homogeneizar com 12,8 mL de água destilada em gral e pistilo.
· Colocar no tubo e acrescentar 12 mL de água destilada (total 24,5 mL) – usando esta para retirar os resíduos do gral e pistilo.
· Acrescentar 0,63 mL de ácido clorídrico 4N (permite que o malonaldeído seja retirado);
· Destilar o conteúdo até obter 25 mL de destilado.
· Passar 5 mL do destilado para tubo com rosca (malonaldeído é volátil)
· Colocar na geladeira.
· Colocar 5 mL da solução TBARs nos tubos com 5 mL de destilado e homogeneizar;
· Colocar os tubos no béquer com água fervendo “amparados” por pinças (não encostar no fundo do béquer), por 35 minutos.
· Após esse tempo, colocar os tubos em béquer com água fria (Tº ambiente) por 10 minutos.
· Levar ao espectrofotômetro (538 nm)
· Fazer o branco antes.
 valor da leitura multiplicado por 7,8.
Substância TBARs: 0,5766g TBA + 20 mL de H2O destilada + 180 mL Ácido Acético Glacial p.a.
· Colocar 2/3 da quantidade de ácido acético glacial (120 mL) para agitar e dissolver o ácido tiobarbitúrico completamente.
· Completar com mais ≈60 mL (só até completar 200 mL, ás vezes não será 60 mL).
HCl 4N: Diluir 33,6 mL de HCl concentrado em água e completar à 100 mL. (Sempre adicionar o ácido na água)