Trabalho de Reprodução Humana atualizado

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FUNDAMENTOS 
DA 
REPRODUÇÃO 
HUMANA
CRIOPRESERVAÇÃO
O QUE É A REPRODUÇÃO 
HUMANA ASSISTIDA?
• É o conjunto de determinadas técnicas médicas que proporciona a união do sêmen ao 
óvulo por meios não naturais, possibilitando, assim, a geração de um novo ser 
humano.
• Para isso é necessário a retirada e preservação dos gametas que serão utilizados no 
procedimento.
CRIOPRESERVAÇÃO
• É um conjunto de técnicas que permite conservar células a 
temperaturas muito baixas (196º C negativos) com o uso de 
nitrogênio líquido.
• Quando se trata de reprodução humana, essas técnicas são
utilizadas para preservar gametas femininos, masculinos e 
embriões para uso posterior.
CRIOPROTETORES
• Crioprotetores são adicionados visando ao aumento da 
viscosidade da solução e maior equilíbrio osmótico entre 
solução e material biológico. Estas substâncias têm baixo
peso molecular e são usadas com o intuito de impedir
efeitos nocivos às células referentes à formação de cristais
de gelo e ao choque osmótico. Elas podem permanecer no 
interior da célula ou fora dela.
• De forma geral os ACPs (Agentes Crioprotetores) 
intracelulares atuam substituindo parcialmente a água no 
interior da célula e ligam-se ao hidrogênio das moléculas de 
água intracelular, aumentando a viscosidade da 
solução de congelação, consequentemente, reduzindo o 
ponto de congelamento da mesma.
• Além disso, os ACPs também agem prevenindo a exposição
do material a altas concentrações de eletrólitos, 
através da ligação aos próprios eletrólitos ou
pela substituição parcial pela água.
• São divididas em duas categorias: permeáveis e não perme
áveis.
CRIOPROTETORES
PERMEÁVEIS: correspondem a pequenas moléculas que penetram pela membrana celular, formam 
pontes de hidrogênio com moléculas de água intracelulares e diminuem a temperatura de 
congelação, prevenindo a formação dos cristais de gelo.
Exemplos: propilenoglicol, glicerol, etilenoglicol, dimetilssulfóxido (DMSO), entre outros
NÃO PERMEÁVEIS: permanecem no meio extracelular, retirando a água livre e levando à 
desidratação do espaço intracelular por efeito osmótico; são usados em combinação com os 
permeáveis visando aumentar a concentração destes no interior das células, prevenir a formação de 
grandes cristais de gelo, diminuir a concentração necessária do crioprotetor permeável e, 
consequentemente, sua toxicidade.
Exemplos: Polivinilpirrolidona, polietilenoglicol, ficoll, dextran e álcool polivinílico.
No entanto, atualmente, o etilenoglicol é o crioprotetor mais utilizado, tendo sido primeiramente 
testado em embriões mamíferos no ano de 1977.
TIPOS DE CRIOPRESERVAÇÃO
• Congelamento lento, consiste na redução de temperatura a uma velocidade de 0,5 
a 2,0ºC por minuto. O material recolhido é primeiro colocado em um freezer 
programado, que reduz progressivamente a temperatura de 20 a -7ºC a uma taxa 
de 2ºC por minuto.
• É feita a manipulação manual do material recolhido em cerca de 10 minutos e, 
depois, a temperatura é reduzida a -30ºC, a uma taxa de 0,3ºC por minuto; e 
finalmente, para
-150ºC a velocidade de 50ºC por minuto. A duração do processo varia de três horas 
e meia a quatro horas. Posteriormente, o descongelamento é feito de forma mais
rápida, sendo que em menos de 1 hora o material já está descongelado.
• Durante o descongelamento a remoção do crioprotetor é feita gradativamente, a 
partir de banhos sucessivos em soluções contendo menores concentrações de 
crioprotetores. Esses banhos consecutivos possibilitam a saída controlada dos 
compostos anticongelantes através da membrana. Além disso, é possível utilizar 
crioprotetores não permeáveis para equilibrar não apenas a saída dos crioprotetores 
permeáveis, mas também a entrada de água dentro da célula. Desta forma, evita-se 
a turgência celular, pois o choque osmótico que poderia ocorrer devido ao rápido 
influxo de água e a saída do crioprotetor é contido .
• Crioprotetores: Glicerol, etilenoglicol, DMSO, propanodiol.
TIPOS DE 
CRIOPRESERVAÇÃO
• Vitrificação, ou congelamento ultrarrápido, 
a diferença de velocidade é notável: 2500 
°C por minuto, o que faz com que todo o 
processo (preparação e congelamento) 
dure no máximo 3 minutos. A velocidade de 
descongelamento é igualmente rápida, 300 
ºC por minuto. Este é o método mais 
utilizado atualmente, pois vários estudos 
científicos sérios e confiáveis mostram que 
é a técnica que menos prejudica os 
gametas e embriões.
• Crioprotetores com alto grau de 
viscosidade: 
Etilenoglicol e DMSO 
• Alta velocidade na criopreservação: 
Imersão direta no NL.
EXTRAÇÃO DE 
ESPERMATOZOIDES
• A masturbação é a forma pela qual os espermatozoides são coletados. Em alguns casos mais específicos de 
infertilidade masculina, a quantidade ou a qualidade dos espermatozoides coletados via ejaculação não são
suficientes para realizar os processos de Fertilização. Para esses casos é necessário utilizar técnicas de 
extração de espermatozoides.
• As técnicas a serem utilizadas dependem do fator causador da infertilidade masculina. Nos casos de 
azoospermia, por processos obstrutivos, a captação espermática pode ser feita no epidídimo ou então no 
testículo. A PESA (Aspiração de Espermatozoides no Epidídimo) é a técnica mais simples a ser realizada. 
Existe também a MESA que é um procedimento realizado também no epidídimo mas com o auxílio de um 
microscópio cirúrgico.
EXTRAÇÃO DE 
ESPERMATOZOIDES
• As técnicas existentes são: TESA 
(aspiração espermática testicular) onde é realizada um
a punção testicular através de uma agulha conectada
a uma seringa; TESE 
(extração espermática testicular), onde são realizadas
biópsias testiculares abertas através de uma pequena
incisão na região escrotal; micro-TESE 
(microdissecção testicular) também é uma biópsia testi
cular aberta, porém realizada com 
o auxílio de microscópio cirúrgico.
• Em alguns casos mais delicados, onde o paciente não
elimina os espermatozoides pela ejaculação, 
mas os fabrica em pequena quantidade, se 
é indicado a microtese, uma microcirurgia onde os esp
ermatozoides são retirados diretamente dos ductos se
miníferos, onde eles são encontrados em maior conce
ntração.
ANÁLISE DA 
AMOSTRA
• Após colhida, a amostra
do sêmen passa por um 
espermograma (para 
contagem de 
espermatozoides e 
análise de coloração, 
viscosidade, motilidade e 
morfologia do sêmen) e 
em seguida é adicionada
a ela uma solução
crioprotetora.
CRIOPRESERVAÇÃO 
DE SÊMEN
• O congelamento, ou criopreservação de sêmen consiste na utilização de 
crioprotetores específicos que possibilitam o armazenamento de amostras
de sêmen, por período indeterminado, em tanques de nitrogênio líquido.
• Amostras de sêmen podem ser utilizadas pelo próprio paciente ou por 
terceiros.
• O congelamento de sêmen humano é uma técnica que existe desde os
anos 1950 e destaca-se como um procedimento seguro e de alta eficácia
para preservação da fertilidade in vitro. Uma vez que possuem citoplasma
reduzido e pouca água intracelular, os espermatozoides são considerados
células com alto potencial de criopreservação e podem ficar congelados
por tempo indeterminado.
• O processo é bastante simples, e o principal cuidado que deve ser tomado
antes do congelamento é a realização do espermograma, testes de função
espermática e exames sorológicos, sendo este último, uma exigência da 
Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa), visto que amostras
soropositivas devem ficar em containers de nitrogênios liquido diferentes.
• O modo de preparo da amostra para criopreservação de 
espermatozoides depende do uso pretendido após o descongelamento
(inseminação intrauterina, fertilização in vitro ou injeção intracitoplasmática
de espermatozoides).
ETAPAS DA CRIOPRESERVAÇÃO 
ESPERMATICA
• O material é distribuído em palhetas ou
criotubos, devidamente identificado com 
nome, data e código do congelamento, e 
vai para o processo de resfriamento. É um 
processo gradativo:primeiro é feito o 
resfriamento em vapor de nitrogênio líquido
(entre –80ºC e –120ºC) por alguns minutos
e, em seguida, o congelamento em imersão
no nitrogênio líquido a -196ºC.
• A amostra congelada fica armazenada em
botijões criogênicos.
INDICAÇÕES DE CRIOPRESERVAÇÃO 
ESPERMÁTICA
• Vasectomia.
• Tratamento de câncer (quimioterapia e radioterapia).
• Oligozoospermia (baixa contagem de espermatozoides).
• Procedimentos cirúrgicos nos órgãos sexuais.
• Atuação em profissão de risco.
• Alterações que podem afetar a espermatogênese.
• Cada caso deve ser cuidadosamente avaliado junto a um especialista em Andrologia, que poderá apontar se este
realmente é um cuidado necessário ou se é possível restabelecer a fertilidade por meio de outros tratamentos.
BANCO DE SÊMEN TERAPÊUTICO 
X BANCO DE SÊMEN DOADOR
• O banco de sêmen terapêutico é utilizado para armazenar sêmen de 
pacientes que irão se submeter a tratamentos que possam 
comprometer a fertilidade masculina ou para armazenar 
espermatozoides antes de se submeter à vasectomia. Atualmente, 
também podem se submeter a esse recurso os homens com 
profissões de alto risco ou aqueles que irão ser submetidos 
a cirurgias reconstrutoras do trato reprodutor.
• O banco de sêmen de doador é utilizado para inseminação artificial 
nas mulheres cujos maridos são completamente estéreis. Não há 
envolvimento financeiro e a identidade do doador permanece 
anônima.
GRUPO:
Elizane de Almeida 
Magalhães (201608176525)
Gabriela Luiza da Silva 
(201707010536)
Gabriella Paixão de Souza 
(201803072024)
BIBLIOGRAFIA
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