(Relatório) DETECÇÃO DO CROMOSSOMO X E DO CROMOSSOMO Y PELA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE - Bioquímica III

Prévia do material em texto

Relatório Nº
Nome: Aline Monteiro Machado Turma: B Data: 23/04/2021
DETECÇÃO DO CROMOSSOMO X E DO CROMOSSOMO Y PELA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE
1. MÉTODO: A partir de uma fita de DNA molde, primers e reagentes necessários, realizar o preparo do meio da reação e submetê-la a uma série de ciclos de amplificação. Haverá uma amplificação exponencial de um fragmento de DNA específico, e esse pode ser visualizado por eletroforese em gel de agarose.
2. OBJETIVOS: Identificar a presença de 212 pb ou 212 pb e 218 pb na amostra a fim de verificar o sexo do indivíduo.
3. Faça um esquema da reação da PCR, explicando o que ocorre em cada uma das temperaturas de cada ciclo de amplificação.
Preparo da reação.
Desnaturação de DNA:
Aquecimento a 94 ºC. A temperatura alta causa a separação das moléculas de cadeia dupla de DNA.
Anelamento dos primers:
Diminuição da temperatura até a temperatura de melting dos primers. Os primers ligam-se a sequência alvo.
Extensão:
Aumento da temperatura até 72 ºC. Permite a síntese de novas moléculas de DNA.
Análise por eletroforese em gel de agarose.
4. Resultados obtidos. Amostra 1: Feminino		 Amostra 2: Masculino		 Amostra 3: Feminino		 Amostra 4: Feminino		 Amostra 5: Feminino	 Amostra 6: Masculino	 
5. Cite outras aplicações da reação da PCR.
Testes de eficiência terapêutica, quantificação de carga viral, detecção e diagnóstico de doenças infecciosas e hereditárias, estudos de expressão gênica e estudos forenses.
6. Descreva os cuidados que devem ser levados em consideração para evitar contaminação na PCR.
Utilizar áreas exclusivas para a extração do DNA e para a reação de PCR, utilizar material exclusivo para PCR, fazer uso de reação controle e sem adição de DNA molde, aliquotar as soluções em pequenas quantidades e estocar em áreas isoladas para PCR.
 (
1
)