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Inseminação artificial em suínos > Ciclo estral, colheita do sêmen e inseminação artificial. Raças - Atualmente se baseia em: ★ Landrace, Large-White e Duroc e em produtos destas. Classificação: ★ Perfil fronto nasal ou cefálico: Retilíneo, sub-concavilíneo, concavilíneo e ultra-concavilíneo. ★ Tamanho e posição das orelhas: asiática, ibérica e céltica. Utilização do macho (monta): ★ Puberdade: 5 meses ★ Adulto: 12 meses ★ Idade para condicionamento: 6 meses ★ Idade para montá: 7,5 - 8 meses Frequência de utilização: ★ Idade de 7,5 a 9 meses: 2x por semana ★ Idade de 9 a 12 meses: 3 a 5x por semana ★ Mais de 12 meses: máximo 6x por semana (precisa avaliar a qualidade espermática). (Sempre 1x no dia). Ciclo estral da fêmea Poliéstrica anual: vários ciclos ovulatórios ao longo do ano Ciclo estral: duração de 21 dias (19 a 23) ★ Proestro: fase folicular - culmina no estro. 4 dias (Apresenta muco) ★ Estro: 48 a 72h ● Ovulação: 38 a 42 h no início do cio (estro) após o pico de LH ★ Diestro: fase lútea. 13 dias Características: Proestro: eritema e entumecimento vulvar. ★ Edema vulvar ★ Coloração rósea avermelhada ★ Corrimento mucoso ocasional ★ Inquietação/ anorexia Estro: máximo entumecimento e eritema vulvar. ★ Aceite da monta ★ Reflexo de tolerância ao macho (+) ★ Arqueamento da coluna, posição de cavalete, levantamento da orelha. Em 3 fases: ★ 1º: reflexo de intolerância positivo para o macho, mas com o homem ela fica inquieta. ★ 2º: tem reflexo de intolerância positivo para o macho e para o homem. ★ 3º: tem reflexo de intolerância positivo para o macho, para o homem não. Características do ovário e do ciclo estral: Característica Valor médio no suíno Taxa de ovulação 12-20 oócitos são liberados por cio Duração da fase folicular (dias) 5-7 Diâmetro do folículo ovulatório (mm) 8-10 Diâmetro folicular máximo na fase lútea (mm) 5-6 Diâmetro a partir do qual o folículo passa a depender da gonadotrofina (mm) 3-4 Diâmetro folicular no qual as células da granulosa adquirem receptores de LH (mm) 5-6 Ovulação: ● Aumenta do 1º ao 4º cio pós-puberdade. ● Puberdade das marrãs: 6 a 7 meses Gestação: ● Aproximadamente 114 dias Cio pós-parto: ● 1 a 3 dias após o parto ● Ovócitos imaturos: não fecunda! Anestro da lactação: ● Ausência de hormônios gonadotróficos ● Involução uterina: 21 a 24 dias ● Desmame: ovulação após 4 a 6 dias. Inseminação artificial A IA é uma biotécnica da reprodução bem estabelecida e aplicada na suinocultura cujo objetivo principal é a maximização do uso dos ejaculados, mantendo e mesmo melhorando a eficiência reprodutiva e produtiva quando comparado com a monta natural. 1 ejaculado = 30 fêmeas Implantação do programa de IA - Relação macho X fêmea: Limitações da IA: ● Estrutura laboratorial mínima ● Qualificação dos funcionários ● Curto período de armazenamento da dose inseminante. Características reprodutivas do macho: ● Puberdade: 5 meses ● Adultos: 12 meses de idade ● Ciclo espermatogênico: 39 dias ● Condicionamento: 6-7 meses Com 5 meses são encontrados espermatozoides Idade Vida reprodutiva 7-5 meses Idade mínima para cobrir 8-9 meses Primeira cobrição 12 meses É considerado adulto 24-36 meses Volume e concentração espermática máximos. A partir dos 2-3 anos decresce a qualidade seminal 3-5 anos Descarte Frequência de colheitas jovens X adultos (IA) ● Machos adultos podem ser submetidos a 2 ou até 3 colheitas semanais ● Machos jovens (8 a 12 meses de idade) poder ser colhidos de 1 a 2 vezes por semana ● As características individuais de produção espermática devem ditar o ritmo de colheitas desses animais ● Na rotina geralmente não é necessário realizar uma segunda colheita em muitos machos. Como definir o momento de fazer a inseminação artificial? Resumo reprodutivo da fêmea: ● Duração do cio: 2-3 dias, média 60h (variação por genética). 42% das fêmeas apresentam cio de 48h. ● Ovulação: Rompimento de folículos, liberação de óvulos. 36-48 horas do início do cio. 34% das fêmeas suínas ovulam 36h após início do cio. ● Fecundação: 1-2 horas após MN ou IA, reservatório (cornos uterinos e ovidutos). Manejo reprodutivo aplicado: Manejo da cobertura: identificação do cio. Ciclo de 21 dias. ★ Importante determinar o momento de início do cio ★ Ideal: avaliar o cio 2x ao dia (10-12 h de intervalo) ★ Reflexo de tolerância ao macho: é importante para o diagnóstico adequado de cio ★ Contato nasal - fato importante. ○ Fêmeas alertas ao macho e sensações: ■ RTM (+) e RTH (-): início de cio ■ 12h de estro (média): RTH e RTM (+) ★ Sinais visíveis de pré-cio: Agitação, tentativas de monta, perda de apetite, corrimento vulvar aquoso, morder as barras da gaiola, emissão de ruídos e vulva pode estar avermelhadas e entumecidas. ★ Sinais visíveis durante o cio: Orelhas levantadas (asiáticas), perda de apetite, reflexo de tolerância macho e ao homem, cauda levantada e muco claro na vulva. Manejo de cobertura: IA ou MN (momento ideal) ★ 35 a 40 horas após início do cio - ovulação ★ 42% das fêmeas apresentam cio de 48h ★ Sobrevivência do sptz na fêmea é de 36 horas - queda gradual ★ Óvulo - degenera de 6-8 horas após ovulação ★ Intervalos de IA/ MN de 12h é recomendado - menos perdas. Manejo de cobertura: Número de coberturas ★ 2 coberturas ★ Identificação do cio 1x ao dia - 1º cobertura de aceitação ★ Identificação do cio 2x ao dia - identificação de manhã 1º cobertura 12h após. Regime de inseminação: Para detecção de cio diária dupla: ★ 1º inseminação - 12h após os primeiros sinais ★ 2º inseminação - 12h mais tarde ★ (3º inseminação) - 12h mais tarde (se a fêmea ainda aceitar). Para detecção de cio diária única: ★ 1º inseminação - imediatamente ★ 2º inseminação - 12h mais tarde ★ (3º inseminação) - 12h mais tarde (se a fêmea ainda aceitar) Em monta natural e IA: cobre-se até não aceitação do macho. Colheita de sêmen ★ Higienização do macho ★ Técnica da mão enluvada: ○ Exercer pressão manual sobre a extremidade do pênis, acompanhando movimentos de exposição e retração, até completa exposição e ereção. ○ Orifício da uretra deve estar livre e não entrar em contato com a luva ○ Descartar 1º fase do ejaculado: secreção de gl. uretrais, aspecto aquoso, 10 a 15ml ○ Exercer pressão rítmica sobre o pênis durante toda a ejaculação (3 frações: rica, pobre e gelatinosa). ○ Nunca parar a colheita antes do término da ejaculação. ★ Saco ou copo plástico atóxico descartável ★ Recipiente isotérmico (38ºc) ★ Filtro Manipulação do sêmen ★ Volume: 150 a 500ml (idade, frequência, etc) ★ Fração rica: 70% sptz, fração pobre: 30% ★ Cor: branca/ acinzentada ★ Turbilhonamento: não é avaliado. ★ Aspecto: leitoso FR e opaco FP ★ pH: 7,3 a 7,9 Avaliação do sêmen: exames convencionais: ★ Deve ser levado ao banho-maria logo após a colheita (32 - 34ºC): avaliações posteriores ★ Motilidade e vigor: 10 microlitros do sêmen é colocado na lâmina e avalia no microscópio ★ Concentração: 600 a 1000 X 10 6 sptz/ ml ★ Morfologia espermática: câmara úmida ★ Grau de aglutinação: relacionada à frequência de colheitas, degeneração, inflamação testicular e alterações em gl. anexas. ○ 0: ausência ○ 1+: 1 a 2 aglutinações por campo ○ 2+: 3 a 5 aglutinações por campo ○ 3+: grandes aglutinações por campo Padrão de sêmen que é fora do padrão desejado: ★ Motilidade progressiva: - 70 ★ Volume final por dose inseminante: -80 ★ Anormalidades morfológicas: +20 ★ Acrossoma: +5 ★ Cabeça: +5 ★ Colo: +5 ★ Peça intermediária: +5 ★ Gota protoplasmática proximal: +10 ★ Número total de espermatozóides por dose: - 2,5 milhões. Conservação do sêmen ★ Congelação: Não é rotina, mas o banco de sêmen responde bem: exportações, pesquisae redução 10 a 20% na parição ★ Refrigeração: Forma predominante de trabalho. Diluição do sêmen para refrigeração: preparo das doses ★ Diluente e ejaculado a mesma temperatura - adição gradual ao ejaculado, avaliação da motilidade após diluição ★ Evite exposição direta à luz ★ Tipo de diluentes: ○ BTS, Kiev, Androhep, Merk III, Modena, MR-A... ★ Sêmen fresco ou refrigerado: ○ Diluidor padrão BTS ○ Diluentes de longa duração (são caros) ○ Dose inseminante: 300 x 10 6 sptz ○ Volume da dose: 80 a 100 ml ○ Determinar concentração espermática (sptz/ml) ★ Cálculo de número de doses: ○ nº sptz no ejaculado = concentração (sptz/ml X volume ○ nº de doses = nº sptz ejac / nº sptz dose inseminante ○ volume final = nº de doses X volume de cada dose (80ml) ○ volume de diluente = volume final - volume do sêmen. O sêmen deve ser diluído em até 30 min após a colheita. ★ Envase em frascos de tampa de rosca ou blisters ○ Deixar na bancada por 90 min a 2 horas (20 - 24ºC) ○ Após, refrigerar a 15-18 º C ★ Homogeneizar 2 a 3x por dia ★ Utilizar em até 3 dias, com motilidade mínima de 50% Esquemas de IA: ★ Colheita de sêmen: segunda feira. Inseminar: segunda, terça e quarta pela manhã ★ Colheita de sêmen: quarta feira. Inseminar: quarta, quinta e sexta pela manhã ★ Colheita de sêmen: sexta feira. Inseminar: sexta, sábado e domingo. Refrigeração do sêmen: preparo das doses ★ Armazenar a temperatura de 15 a 18º C IA Intracervical: ★ Pipetas descartáveis de borracha, do tipo Melrose ★ Dose de sêmen em frasco de 100ml ★ Limpar a vulva com papel higiênico ou papel toalha ★ Cortar a ponta do adaptador do frasco de sêmen ★ Introduzir a pipeta de IA levemente dirigida para cima, com movimentos de rotação anti-horário Esquemas de IA: ★ Intervalo desmame-estro ★ IDE longo > cio curto ★ Até 4 dias: IA (24h observação do cio) ★ De 5-6 dias: IA (12h observação) ★ Mais do que 7 dias: IA (observação Problemas durante a IA: ★ Refluxo do sêmen após o início da IA ★ A pipeta não está fixada na cérvix ★ Dificuldades de introdução da pipeta ★ Sangramentos Esquemas - monta natural: ★ Primeira cobertura no momento em que a marrã inicia a aceitação do cachaço ★ Segunda cobrição no máximo 24h após ★ Primeira cobrição 12h no máximo após ter demonstrado imobilidade para o cachaço. Segunda cobrição 12 h após a primeira
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