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Ionização de aminoácidos BCM 18/02 Aminoácidos: carboxila+amina+hidrogênio ligados a um carbono são grupamentos ionizáveis: - amina, em meio aquoso, passa de NH2 (na forma cristalina e desprotonada) -> NH3+ (protonada - com próton) - carboxila, em meio aquoso, passa de COOH (protonada) -> COO- (desprotonado) - porém, essa ionização depende do ph da água, pode haver alterações Titulação dos ácidos: - ácidos fortes tem alta variação de pH, na titulação - Ácidos fracos precisam de alta quantidade de ácido para ocorrer a variação de pH, na titulação. ***”seguram mais os prótons" **Os aminoácidos têm 2 grupos ionizáveis: amina e carboxila. *quanto menor o pKa mais ácida é a substância Titulação da Glicina em pH muito baixo= carga geral positiva (aminoácido protonado) em pH muito alto= carga geral negativa (aminoácido desprotonado) Em determinado pH= a soma das cargas (a carga líquida) é zero, o que não significa que está sem carga. Íon-dipolar A glicina pode ser tampão de pH: 1,34-2,34 e 8,6-10,6 *** o pH é a concentração de prótons o meio Todos os aminoácidos possuem 2 pKas. - o pKa 1-carboxila - o pKa2- amina *se o pH é maior que Pka a substância está protonada *se o pH é menor que o Pka a substância está desprotonada *se o pH está na zona de tamponamento ela está 50% protonada e 50% desprotonada. Ponto isoelétrico (pI) é o valor exato do pH quando a carga líquida é 0. pI= pKa1 + pka2 / 2 - pH menor que o pI a carga é positiva - pH maior que o pI a carga é negativa -> cada aminoácido tem um pI diferente. Eletroforese É uma técnica de separação que leva em consideração o tamanho e a carga de um aminoácido, porém essa técnica pode ser usada em outras substâncias. Aminoácidos Polares Carregados ***em aminoácidos que contêm a cadeia lateral ionizável, terá, além do pK1 e pK2, o pKr ou pK3 - Para aminoácidos ácidos o pI será a média entre pK1 e pKr. - Para aminoácidos básicos o pI será a média em pK2 e pKr. Testes diagnósticos no contexto de tecnologias em saúde Funcionalidade da aula anterior na medicina. A eletroforese é um método usado para separar e também purificar macromoléculas, principalmente ácidos nucleicos e proteínas. Essas macromoléculas são submetidas a um campo elétrico, na qual migram para um polo positivo ou negativo de acordo com sua carga. No caso de uma carga positiva, seguirá para o polo negativo e se for negativa, irá na direção do pólo positivo. A eletroforese é utilizada em testes de paternidade, testes de doenças como, HIV, anemia falciforme. A clínica(anamnese) prevalece acima dos exames.
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