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TécnicasTécnicas Ligação de antígeno e anticorpo em meio gelatinoso (Agar gel); Formação de imunocomplexo; Precipitação; Necessita de soro padrão A diferença deste para o aglutinação é que este é feito em meio gelatinoso, onde se percebe a precipitação dos imunocomplexos por formarem uma opacidade na estrutura do gel. Necessita de soro padrão. Na imunodifusão é feita uma reação entre antígeno e anticorpo onde se espera encontrar a concentração ideal onde ocorrerá então, a formação de imunocomplexos. Produzido por Deygiane Xavier Imunologia TécnicasTécnicasTécnicas 01 As principais técnicas se baseiam na detecção de imunocomplexos no soro de animais que tiveram a doença ou foram imunizados para um determinado antígeno. Para detecção de ImunocomplexosPara detecção de ImunocomplexosPara detecção de Imunocomplexos AglutinaçãoAglutinaçãoAglutinação Ligação entre antígenos e anticorpos em meio líquido; Formação de imunocomplexos; Precipitação e formação de grumos; Visível a olho nú. Ocorre a ligação entre antígenos e anticorpos em meio líquido. A formação de imunocomplexos em meio liquido leva a precipitação e formação de grumos que são visíveis a olho nú. ImunodifusãoImunodifusãoImunodifusão Produzido por Deygiane Xavier Em uma placa, coloca-se o gel e com um molde coloca-se no centro o antígenos e nos 6 poços laterais coloca-se os soros que deseja, sendo que necessariamente deve-se usar um soro padrão em pelo menos 3 posições. Quando há uma linha de precipitação considera-se positivo, se a linha estiver fraca considera fracamente positivo e quando quase não se forma a linha considera muito fraco positivo. 02 ELISAELISAELISA Enzyme, Linked, inmunoassary. Ensaio Imuno Enzimático Ligado. Imuno pq tem anticorpos, enzimático ligado pq há uma enzima ligada a um anticorpo. Nesse ensaio usa-se uma placa de micro titulação de 96 poços, cada poço cabe 400microlitros. Com um aparelho de espectrofotometria adaptado (leitor de ELISA) que lê o fundo da placa e consegue determinar de acordo com a intensidade de uma determinada cor a concentração de imunocomplexos da placa. Ligação de anticorpo a um antígeno a ser detectado; Presença de enzima ligado a um anticorpo de detecção; Reação cromógena Mais ligação Ag x Ac - Mais cor Primeiramente, usa-se o anticorpo que vai detectar o antígeno que está na placa. Ligado a este anticorpo há uma enzima que permite a detecção. Essa enzima atua sobre uma substância cromógena, onde quanto mais antígeno tiver na placa mais anticorpo vai haver ligado e quanto mais anticorpo ligado mais enzima ligada. Se for usada uma substância que dá cor, aonde houver mais antigenos com enzimas mais intensa será a cor. PrincípioPrincípioPrincípio
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