6- Urocultura

Prévia do material em texto

CAMILA MATARAZZO
LAB. 2 – UC 17 – UROCULTURA
O número de células e a funcionalidade do organismo diminui nos idosos, por isso que eles são mais propensos a patologias e, caso adquiridas, tendem e ser mais graves. 
O sistema imune nos idosos é: menos capaz de distinguir o próprio e não-próprio; os macrófagos são mais lentificados na destruição; há ↓ linfócitos e resposta mais lenta ; há mesma quantidade de anticorpos, porém com menor afinidade de ligação.
A infecção do trato urinário (ITU) nos idosos pode representar riscos para processos patológicos e maior grau de gravidade. Os sintomas típicos enquadram ardência, queimação e dor, porém, nos idosos, é comum a presença de sintomas atípicos, como incontinência urinária, perturbações mentais e ausência de febre. Sendo assim, é pertinente a investigação de ITU no idoso, já que a presença de infecção bacteriana está fortemente relacionada com a alta mortalidade nessa população. 
A infecção pode ocorrer por: 
· via ascendente, mais comum (patógeno → uretra → bexiga → ureter → rim); 
· via hematogênica (septicemias); 
· via linfática (+ rara)
Causas comuns de ITU: higiene; retenção urinária; obstrução urinária; relação sexual; cateteres
Causas no idoso: doenças de base (diabetes, IRC, ICC, hipertensão e outras comorbidades associadas), diminuição do assoalho pélvico feminino e diminuição do estrógeno, alterações prostáticas (frequentes a partir dos 60 anos),utilização de sonda por incontinência urinária. 
A incidência de bactéria na urina de pessoa em uso de sonda vesical de demora (SVD) é de 3-10% para cada dia com sonda. Após 10 dias com SVD, 100% dos pacientes já terão alguma bactéria na urina e, dentro desses, 10-25% desenvolvem ITU em algum momento.
DIANÓSTICO LABORATORIAL
· Limites de detecção metodológica associada a ITU
· Nitrito: indica possível presença de enterobactérias*
· Esterase leucocitária: indica presença de leucócitos na urina
· Urocultura – confirma infecção urinária, identifica o microorganismo e auxilia na terapia
Esse tipo de exame só é considerado positivo caso exista mais de 100.000 UFC/mL de um único microrganismo.
OBS: A presença de mais de um microrganismo indica contaminação da amostra, daí a importância da orientação adequada para coleta (higiene local e jato médio da urina).
Microorganismos associados a ITU: Enterobactérias* (E.coli, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, etc.); Staphylococcus sapropyticus; Enterococcus faecalis; Staphylococcus aureus; Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans
· Análise do resultado
• A coleta correta é muito importante para o sucesso do procedimento
• Realizada em frasco estéril com tampa de rosca e boca larga
• Retenção ideal de no mínimo 4 horas
• Higienização local com água e sabão ou clorexidina aquosa 0,2%
• Coleta de Jato médio
• Amostras deverão ser processadas até duas horas depois da coleta ou armazenadas em refrigeração, não excedendo o prazo de 24 horas
MEIOS DE CULTURA
Ágar Cled:crescimento de bactérias gram positivas, gram negativas e leveduras
Meio diferencial (prova da lactose)
• Colônias lactose positiva: cor amarela
• Lactose negativa: cor azul
Ágar MacConkey: O cristal violeta presente no meio inibe o crescimento das bactérias gram positivas, especialmente Enterococcus e Staphylococcus. 
Diferenciador para fermentadores de lactose que produzem colônias rosa.
Bactérias não fermentadoras de lactose não produzem alteração de cor pela manutenção do pH do meio.
· Caracteírticas das colônias
• Escherichia coli: colônias opacas, amarelas com ligeira cor amarelo escuro no centro, com cerca de 1,25 mm de diâmetro.
• Espécies de Proteus: colônias azul translúcidas
• Espécies de Salmonella: colônias planas, cor azul
• Enterococcus faecalis: colônias amarelas, com cerca de 0,5mm de diâmetro
• Staphylococcus aureus : colônias amarelas, com cerca de 0,75 mm de diâmetro
• Pseudomonas aeruginosa: colônias verdes, com superfície prateada e periferia rugosa
• Espécies de Klebsiella: colônias muito mucosas, cor variável de amarelo a branco azulado
TÉCNICA DE SEMEADURA QUANTITATIVA EM PLACAS
Homogeneizar a urina sem centrifugar; Imergir a alça calibrada de 0,01 mL (10 µL) ou 0.001 mL(1µL) na urina de forma vertical; Analisar a presença de material na alça; Semear a placa em ágar Cled e MacConkey; Incubar em estufa de 35ºC de 18 a 24 horas (se o resultado da cultura for negativo após as 24 horas, com presença de bactérias ou número elevado de leucócitos, incubar por mais 24 horas); Realizar a leitura de gram.
· Identificação 
• Observar o crescimento nas culturas CLED, MacConkey/EMB
• Se crescimento em MacConkey e Cled: replicar a colônia para o Rugai ou série bioquímica para 
identificação da enterobactéria e incubar por 24 horas a 35º C
• Crescimento somente em Cled: realizar prova de Gram e diferenciar Staphylococcus de Streptococcus
• Na suspeita de cocos gram +, é recomendado a semeadura em ágar sangue para análise de S.agalactiae e verificação de hemólise
· Interpretação
O resultado é expresso em UFC/ mL
• na semeadura de 1 µL: nº colônias x 1000 = nº UFC/ mL (Ex: 50 colônias X 1000 = 50.000 UFC/mL)
• na semeadura de 10 µL: nº colônias x 100 = nº UFC/ mL
· Resultado
• Negativo para culturas inferiores a 100.000 UFC/ml.
• Positivo para culturas acima de 100.000 UFC/ml.
PROFILAXIA DE ITU DE REPETIÇÃO NO IDOSO
Estímulo a micções freqüentes, pesquisa e tratamento de fatores contribuintes (disfunções miccionais), tratamento tópico com estrógeno vaginal em mulheres menopausadas e profilaxia medicamentosa com antibióticos em baixas doses por períodos de três a seis meses.
EXERCÍCIO
1- Após semeadura com alça calibrada de 1 µL observou-se crescimento de 150 UFC de cultura pura . Qual a correspondência por mL? Esta análise isolada indica infecção?
Resposta: sim, essa análise indica infecção, pois 150 X 1000 = 150.000 UFC/ml
2- No exercício anterior, quantas colônias são esperadas crescer na placa semeada com alça de 10 µL?
Resposta: espera-se o crescimento de 150 colônias
3- Resultado de Urocultura 
Gram: numerosos leucócitos polimorfonucleares; numerosos bacilos Gram negativos
Resultado: urocultura negativa
O que poderia justificar estes resultados?
Resposta: Nestas condições, espera-se cultura positiva. Uma razão possível para a cultura negativa é uso de antimicrobiano.