Relatório 4 - Lipídios

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ 
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE 
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E FARMACOLOGIA 
DOCENTE: JOÃO MARCELO DE CASTRO E SOUSA 
DISCIPLINA: BIOQUÍMICA PARA FARMÁCIA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
REAÇÃO DE CARACTERIZAÇÃO DOS LIPÍDIOS 
 
 
 
 
 
 
AGATA DA SILVA MACHADO 
LIARA LYN BENEDITO MOURA 
MARCOS JEFFERSON DA SILVA COQUEIRO 
THAYS SOUSA PEREIRA 
VINICIUS CAVALCANTE SANTOS 
VITÓRIA RÉGIA VASCONCELOS MARQUES DOS SANTOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Teresina – PI 
2022 
 
RESUMO 
Os lipídios são biomoléculas encontradas de maneira abundante na natureza, 
presentes em diversos alimentos como gema do ovo, leite, gorduras animais e óleos 
vegetais etc. Desempenham diversas e importantes funções biológicas, atuando, por 
exemplo, como reserva energética de plantas e animais, isolante térmico e mecânico 
do corpo de animais, estrutural (como componentes das membranas biológicas), 
agentes emulsificantes (ácidos biliares), função coenzimática (as vitaminas 
lipossolúveis A, D, E, K), entre outras. Os presentes experimentos visaram 
caracterizar e analisar as propriedades dessa classe de biomoléculas através da 
reação de hidrólise alcalina, que hidrolisa e neutraliza as gorduras pela ação do 
hidróxido de potássio (KOH); da reação de separação dos ácidos graxos após adição 
de HCl (ácido clorídrico) e formação de aglomerado de ácidos graxos com 
resfriamento da solução; da reação de solubilidade nos solventes, em que se 
observou a dissolução dos lipídios em diferentes solventes; na formação de “sabão” 
por redissolução, em que a adição de KOH (hidróxido de potássio) e aquecimento 
formaram um sal de ácido graxo (sabão); da separação do “sabão” por salificação, em 
que com a adição de NaCl (cloreto de sódio) o sabão formado separa-se do líquido e 
formam-se duas fases. 
 
Palavras-chave: hidrólise, saponificação, solubilidade, redissolução, ácidos graxos. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
SUMÁRIO 
1 INTRODUÇÃO ......................................................................................................... 3 
2 OBJETIVOS ............................................................................................................. 4 
3 MATERIAL E MÉTODOS ........................................................................................ 5 
3.1 MATERIAL E REAGENTES ............................................................................... 5 
3.2 MÉTODOS ......................................................................................................... 5 
3.2.1 Hidrólise alcalina dos triacilgliceróis ...................................................... 5 
3.2.2 Separação dos ácidos graxos .................................................................. 5 
3.2.3 Solubilidade nos solventes ...................................................................... 6 
3.2.4 Formação de “sabão” por redissolução dos ácidos graxos ................. 6 
3.2.5 Separação do “sabão” por salificação .................................................... 6 
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO ............................................................................... 7 
4.1 HIDRÓLISE ALCALINA DOS TRIACILGLICERÓIS ........................................... 7 
4.2 SEPARAÇÃO DE ÁCIDOS GRAXOS ................................................................ 8 
4.3 SOLUBILIDADE NOS SOLVENTES .................................................................. 9 
4.4 FORMAÇÃO DE “SABÃO” POR REDISSOLUÇÃO DOS ÁCIDOS GRAXOS .. 10 
4.5 SEPARAÇÃO DO “SABÃO” POR SALIFICAÇÃO ............................................ 11 
5 CONCLUSÃO ........................................................................................................ 13 
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ......................................................................... 14 
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1 INTRODUÇÃO 
Os lipídeos biológicos são um grupo de compostos quimicamente ativos 
diversos, definidos por uma característica em comum: a insolubilidade em água. As 
funções biológicas dos lipídeos são tão diversas quanto a sua química. Gorduras e 
óleos são as principais formas de armazenamento de energia em muitos organismos. 
Os fosfolipídios e os esteroides são os principais elementos estruturais das 
membranas biológicas. Outros lipídeos, embora presentes em quantidades 
relativamente pequenas, desempenham papéis cruciais como cofatores enzimáticos, 
transporte de elétrons, pigmentos fotossensíveis, âncoras hidrofóbicas para proteínas, 
chaperonas para auxiliar no enovelamento de proteínas de membrana, agentes 
emulsificantes no tratamento digestório, hormônios e mensageiros intracelulares 
(NELSON; COX, 2014). 
Segundo Conn (2007), os lipídeos aparecem como principal componente do 
ácido graxo; contendo um par de átomos de carbono (4 a 30) em cadeiras lineares, 
em sua maioria saturadas, podendo conter até seis ligações duplas. Os triacilgliceróis 
podem existir na forma líquida ou sólida, depende da natureza dos ácidos graxos que 
o constituem. 
Os triacilgliceróis celulares se agrupam em gotículas de lipídeos que não 
aumentam a solubilidade do citosol e não são solvatadas (NELSON; COX, 2014). 
Essas pequenas gotas, em meio aquoso tendem a se reunir em uma ou mais 
estruturas maiores, para assim formarem uma barreira hidrofóbica; esse agrupamento 
se dá pela diferença de densidade dessas duas soluções distintas; sendo o óleo mais 
denso que a água, pois as ligações existentes são fracas em relação as ligações 
aquosas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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2 OBJETIVOS 
A realização desses experimentos teve por objetivo analisar as propriedades 
físicas e químicas dos ácidos graxos e triacilgliceróis. 
 
 
 
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3 MATERIAL E MÉTODOS 
3.1 MATERIAL E REAGENTES 
• 5 pipetas graduadas volumétricas; 
• 1 pipetador; 
• Banho-maria; 
• 1 pinça de madeira; 
• Água destilada (H2O); 
• 4 tubos de ensaio; 
• 1 estante de inox para tubos de ensaio; 
• Margarina; 
• Solução de hidróxido de potássio 5% (KOH); 
• Solução de hidróxido de potássio 5N (KOH); 
• Ácido clorídrico (HCl); 
• Álcool; 
• Éter; 
• Cloreto de sódio; 
• 1 pipeta de Pasteur; 
• 1 bastão de vidro; 
• 1 proveta graduada. 
 
3.2 MÉTODOS 
3.2.1 Hidrólise alcalina dos triacilgliceróis 
Preparou-se um tubo de ensaio (A) com o auxílio de uma pipeta graduada 
volumétrica, adicionou-se 10ml de margarina e 10ml de solução alcoólica de KOH 5% 
ao tubo (A). Após isso foi adicionado em banho-maria por 30 minutos, foi retirado o 
tubo e observado. 
 
3.2.2 Separação dos ácidos graxos 
 Utilizando o tubo (A) da primeira reação, foi adicionado a ele 1ml de ácido 
clorídrico, gota a gota, sempre sob agitação. Depois foi levado em banho-maria até a 
formação de uma camada oleosa, logo após foi esfriado em banho de gelo e 
observada. 
 
6 
 
3.2.3 Solubilidade nos solventes 
Utilizando um bastão de vidro foi retirado do tubo (A) os ácidos graxos obtidos 
na reação B e distribuídos em três tubos de ensaio. No primeiro tubo (C-1) foi 
adicionado 2ml de água destilada, no segundo tubo (C-2) foi adicionado 2 ml de álcool, 
no terceiro tubo (C-3) foi adicionado 2 ml de éter. Logo após foi agitado todos os três 
tubos e observou-se. 
 
3.2.4 Formação de “sabão” por redissolução dos ácidos graxos 
Utilizando o tubo da experiencia B, foi adicionado 10ml de H2O e 6ml de solução 
de KOH 0,5 N. Logo após foi levado para banho-maria em água fervente por 5 
minutos, agitou-se observou os resultados. 
 
3.2.5 Separação do “sabão” por salificação 
Utilizando a soluções de sabões da experiencia D, foi adicionado 3ml dessa 
solução em uma proveta, e completado o volume até 20ml com H2O destilada. Logo 
após foi adicionado cloreto de sódio gradativamente sempre sob agitação até a 
formação flocos. Após observou-se os resultados. 
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4 RESULTADOS E DISCUSSÃO 
4.1 HIDRÓLISE ALCALINA DOS TRIACILGLICERÓIS 
Após aguardar o tempo estipulado do aquecimento para a obtenção do 
resultado, pode-seobservar que no final do experimento formou-se no tubo de ensaio 
A uma mistura heterogenia de duas faces, na qual a parte sobrenadante era o sabão 
e na parte inferior o glicerol, conforme pode ser visto na figura 1. 
 
Figura 1. Tubo de ensaio A 
 
Fonte: Acervo pessoal, 2022. 
 
Uma forma alternativa de hidrolisar as gorduras presentes nos efluentes seria 
através do emprego de agentes alcalinos como o hidróxido de potássio (KOH). Os 
ésteres, quando aquecidos em KOH aquoso, sofrem uma reação de hidrólise, 
denominada saponificação, que consiste na hidrólise dos ésteres e posteriormente a 
neutralização dos ácidos graxos produzidos pela base, um subproduto da manufatura 
sabões é a glicerina (SOLOMONS; FRYLE, 2002). A glicerina separada do sabão no 
processo industrial é utilizada tanto por fabricantes de resina e explosivos como pela 
indústria de cosméticos. Devido a isso, seu preço, depois de purificada, pode superar 
o do sabão (NETO; PINO, 1995). 
 
8 
 
4.2 SEPARAÇÃO DE ÁCIDOS GRAXOS 
Após a adição de ácido clorídrico (HCl) observou-se a ocorrência de um 
precipitado, como visto na figura 2, sendo esse precipitado um aglomerado de ácidos 
graxos que se apresentam com pouquíssima solubilidade em solução aquosa. Após 
submeter o tubo B à um segundo aquecimento e posterior banho de gelo, nota-se, na 
figura 3, que toda a solução oleosa de ácidos graxos se concentrou na superfície do 
líquido. 
 
Figura 2. Tubo B após a adição de HCl 
 
Fonte: Acervo pessoal, 2022. 
 
Figura 3. Tubo B após reaquecimento e posterior banho de gelo. 
 
Fonte: Acervo pessoal, 2022. 
 
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A adição de ácido clorídrico à solução aquosa de sabão provocará a 
precipitação de ácidos graxos devido à presença de íons H+, uma vez que, ao reagir 
com esses íons, os ácidos graxos tendem fortemente a formar dímeros por meio das 
ligações de hidrogênio. A reação dos ácidos graxos por acidificação está demonstrada 
na figura 4 (PASSOS et al, 2020). 
 
Figura 4. Reação dos ácidos graxos por acidificação. 
 
Fonte: Google Imagens, 2022. 
 
4.3 SOLUBILIDADE NOS SOLVENTES 
Após a agitação, observou-se a mudança de fase nos três tubos de ensaio, 
como pode ser vista na figura 5. No tubo C-1, a alíquota de ácidos graxos mostrou-se 
insolúvel em água, já que são observadas duas fases bem distintas pois os lipídios 
não se solubilizaram. No tubo C-2, em que o solvente é o álcool, a alíquota mostrou-
se parcialmente solúvel, com a presença de duas fases, porém foi observável uma 
certa dissolução dos ácidos graxos. Já no tubo C-3, em que o solvente usado foi o 
éter, a solução ficou composta apenas de uma fase de cor amarela, pois a alíquota se 
solubilizou integralmente. 
 
Figura 4. Tubos de ensaio C-1, C-2 e C-3, respectivamente, após agitação. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Fonte: Acervo pessoal, 2022 
C-1 C-2 C-3 
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A maioria dos lipídios é formada por ácido graxo, que é um ácido orgânico 
monocarboxílico. As propriedades físicas dos ácidos graxos e dos compostos que os 
contêm são determinadas, em grande parte, pelo comprimento e pelo grau de 
insaturação da cadeia hidrocarbonada. A cadeia hidrocarbonada apoiar é responsável 
pela baixa solubilidade dos ácidos graxos na água. Os lipídeos têm densidades 
específicas mais baixas do que a água, o que explica por que as misturas de óleo e 
água (p. ex., tempero de salada com azeite e vinagre) têm duas fases: o óleo, com 
densidade específica mais baixa, flutua sobre a fase aquosa (NELSON; COX, 2014). 
A solubilidade de substâncias se dá em função de uma afinidade eletrônica 
existente entre as espécies em um sistema. Essa afinidade eletrônica pode ser 
expressa na famosa frase: "semelhante dissolve semelhante”. Isso quer dizer que 
substâncias polares se misturam bem com substâncias polares, substâncias apolares 
se misturam bem com substâncias apolares e substâncias polares não se misturam 
com substâncias apolares. Quando os elétrons de uma molécula não estão 
distribuídos uniformemente, a substância é dita como polar. Um exemplo clássico é a 
água porque os elétrons estão mais próximos do oxigênio que do hidrogênio, pois o 
primeiro elemento é mais eletronegativo que o segundo. As substâncias em que os 
elétrons estão distribuídos igualmente por todas as moléculas são ditas apolares 
(SOUZA, 2018). 
Sabendo-se, então, que os lipídios, mais especificamente os ácidos graxos, são 
compostos apolares, a amostra que contém solvente apolar (éter) formará soluções 
de apenas uma fase com as substâncias apolares; e com as substâncias polares 
(água e álcool) formarão soluções onde observaremos mais de uma fase. 
 
4.4 FORMAÇÃO DE “SABÃO” POR REDISSOLUÇÃO DOS ÁCIDOS GRAXOS 
Após a adição dos 10mL de H2O e 6mL de solução de KOH 0,5 N no tubo B, 
ele foi levado ao banho maria, ao qual permaneceu por 5 minutos e posteriormente foi 
agitado. 
 Posteriormente a estes processos, observa-se que a pequena parte solida de 
coloração amarelada, que anteriormente tinha no tubo, após o aquecimento 
desapareceu completamente formanda uma solução completamente heterogenia de 
coloração amarelada, como pode ser observado na figura 5. 
 
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Figura 5. Tubo D antes e depois do banho maria
 
Fonte: Acervo pessoal, 2022. 
 
Nesse um processo de saponificação com a formação de um sal de ácido graxo 
(sabão) em decorrência da reação com Hidróxido de Potássio (KOH) que causou uma 
hidrolise alcalina juntamente com o calor, este sabão polar por sua vez se torna polar 
devido a sua configuração com ponta polar e corpo apolar o que explica o 
desaparecimento da substância solida, reação está que pode ser observada na figura 
6 (SOUSA; NEVES, 2022). 
 
Figura 6. Reação de Saponificação com KOH 
 
Fonte: Google Imagens, 2022. 
 
 
4.5 SEPARAÇÃO DO “SABÃO” POR SALIFICAÇÃO 
Inicialmente o líquido apresentava somente uma fase. No decorrer da adição 
do sal e agitamento começou a floculação pelo sabão pela floculação e logo após a 
flutuação, conforme é visível na figura 7. 
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Figura 7. Proveta após adição de do cloreto de sódio 
 
Fonte: Acervo pessoal, 2022. 
 
 Os sabões que estavam solubilizados em água e para a separação foram 
utilizados um método conhecido como efeito salting out. Este efeito é conhecido na 
extração líquido-líquido e é frequentemente chamado de “separação de fases induzida 
por sal. À medida que vai se adicionando cloreto de sódio vai aumentando a 
concentração salina do meio diminuindo a solubilidade das moléculas do solvente e 
assim vai formando um sistema bifásico. 
 
 
 
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5 CONCLUSÃO 
 A realização de tais experimentos teve como fim a análise, compreensão e 
caracterização das propriedades dos lipídios por meio de reações químicas como: 
hidrólise alcalina dos triacilgliceróis, onde houve a formação de sabão a partir de um 
triacilglicerol; separação de ácidos graxos através da formação de ácidos graxos livres 
em decorrência da dissociação do sabão em contato com o ácido clorídrico; 
solubilidade nos solventes, onde houve a comprovação da solubilidade de ácidos 
graxos através da dissolução destes em compostos orgânicos; formação de sabão 
por redissolução dos ácidos graxos, havendo nessa reação a formação de sabão a 
partir da interação entre o ácido graxo e uma base forte (hidróxido de potássio- KOH); 
por fim, a separação do sabão por salificação, ocorrendo a separação por meio da 
insolubilidade do sabão ao entrar em contato com um sal (NaCl), devido ao poder de 
solvatação deste. 
 
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
EXTRAÇÃOLÍQUIDO-LÍQUIDOASSISTIDAPELOEFEITOSALTINGOUTPARA 
análisedeamostrasbiológicas. Scientia Chromatographica 2018, Instituto 
Internacional de Cromatografia, p. 99-111, 14 maio 2018. DOI 
http://dx.doi.org/10.5935/sc.2018.006. Disponível em: 
https://www.siga.fiocruz.br/arquivos/ss/documentos/editais/2_QUIMICA.pdf. Acesso 
em: 2 ago. 2022 
 
NELSON, D.; COX, N. Princípios de bioquímica deLehninger. 6 ed. rev. Porto 
Alegre: Artmed, 2014. 1250 p. ISBN 978-85-8271-073-9. 
 
NETO, O.; PINO, J. Trabalhando a química dos sabões e detergentes. Rio 
Grande do Sul: UFRGS, 1995. 
 
PASSOS, G. et al. Caracterização de lipídios, 2020. Disponível em: 
<CARACTERIZAÇÃO DE LIPÍDIOS | Manuais, Projetos, Pesquisas Química - 
Docsity> Acesso em: 06 ago, 2022. 
 
SOLOMONS, T.; FRYLE, C. Química Orgânica. 7ed. Volume 2. Rio de Janeiro: 
LTD, 2002. 
 
SOUZA, L. "Como as substâncias se dissolvem"; Brasil Escola. Disponível em: 
https://brasilescola.uol.com.br/quimica/como-as-substancias-se-dissolvem.htm. 
Acesso em 07 de agosto de 2022. 
 
SOUSA, K; NEVES, V. Saponificação. [S. l.], 2022. Disponível em: 
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_lipidios/saponificacao.htm. 
Acesso em: 06 ago. 2022.