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Coloração de PAPANICOLAU Método tradicional Papanicolaou em meio líquido Coloração de Papanicolau Componente BÁSICO (+) corante ÁCIDO (-): acidófilas / eosinófilas / CITOPLASMA eosinofílico Exemplo: corante Eosina Componente ÁCIDO (-) corante BÁSICO (+): basófilas / CITOPLASMA cianófilico Exemplo: corante Hematoxilina de Harris Coloração de Papanicolau Hidratação: reposição gradual da água das células por meio de banhos alcoólicos de concentrações decrescentes até a água purificada. Coloração nuclear: as células hidratadas podem agora receber um corante aquoso para corar os núcleos (Hematoxilina de Harris). Coloração de Papanicolau Hematoxilina de Harris: corante BÁSICO, tem afinidade por componentes celulares ÁCIDOS, aos quais confere uma coloração violeta. Cora estruturas basófilas Coloração de Papanicolau Desidratação: para receber corantes alcoólicos citoplasmáticos, deve- se retirar a água das células com banhos alcoólicos de concentrações crescentes. Coloração de Papanicolau Coloração citoplasmática: citoplasma das células é corado pelos corantes Orange G e EA-65, de modo a diferenciar com diversas tonalidades o citoplasma das células de acordo com a sua maturidade e metabolismo. Coloração de Papanicolau Orange G: corante ácido com capacidade de corar as células queratinizadas dando a essas células uma tonalidade laranja. EA-36: coloração policromática no citoplasma das células Citoplasma das células superficiais (ACIDÓFILA/EOSINÓFILA): coloração rósea Células escamosas parabasais, intermediárias e células colunares: coloração azulada. Coloração de Papanicolau Desidratação, clarificação e selagem: água é retirada com concentrações alcoólicas crescentes, clarificadas e seladas com meios permanentes hidrofóbicos. Papanicolau em meio líquido Metodologias – Papanicolau em meio líquido • Diversos métodos no mercado: ≠ processamento técnico e coleta Coleta: • muito similar à convencional: espátula e escova cervical ou escova combinada (coleta células da ectocérvice e endocérvice) • o material não será disposto em lâmina → colocado em frasco contendo o meio (preserva morfologia celular e tem função fixadora) Metodologias • BD SurePath • Hologic - Thin Prep • Gynoprep Método BD SurePath™ Pap Test COLETA https://advancing-diagnostics.eu/assays/cervical-cancer/bd-surepath/#btnvideo https://advancing-diagnostics.eu/assays/cervical-cancer/bd-surepath/#btnvideo SISTEMA BD PREPMATE™ Homogeneíza e transfere as amostras dos frascos de coleta BD SurePath™ para os tubos de centrifugação. Processa até 48 testes em 12 minutos. SISTEMA BD PREPSTAIN™ Suspende, homogeneíza e transfere o precipitado de células para o delimitador de campo posicionado em lâmina própria BD SurePath™, corando-a pelo método de Papanicolaou. As células ficam dispostas em um círculo de 13 mm de diâmetro. Processa até 48 testes em aproximadamente 60 minutos https://www.youtube.com/watch?v=gW_WCXSwhsM https://www.youtube.com/watch?v=gW_WCXSwhsM Método BD SurePath™ Pap Test Trabalho: • Em dupla ou trio • Manuscrito • Próxima aula • Vantagens do método BD SurePath™ Pap Test com relação ao método convencional Slide 1: Coloração de PAPANICOLAU Slide 2: Coloração de Papanicolau Slide 3: Coloração de Papanicolau Slide 4: Coloração de Papanicolau Slide 5: Coloração de Papanicolau Slide 6: Coloração de Papanicolau Slide 7: Coloração de Papanicolau Slide 8: Coloração de Papanicolau Slide 9: Papanicolau em meio líquido Slide 10: Metodologias – Papanicolau em meio líquido Slide 11: Metodologias Slide 12: Método BD SurePath™ Pap Test COLETA Slide 13: https://advancing-diagnostics.eu/assays/cervical-cancer/bd-surepath/#btnvideo Slide 14: https://www.youtube.com/watch?v=gW_WCXSwhsM Slide 15: Método BD SurePath™ Pap Test