CITOLOGIA

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UNESC - CACOAL
DISCIPLINA DE CITOLOGIA E EMBRIOLOGIA 2022.2
ESTUDO DIRIGIDO 1 – MICROSCOPIA
Profa. Michelle Lima
NOME: ANDERSON DIAS
CURSO: BIOMEDICINA
DATA: 05/12/2022
Acesse o material híbrido da disciplina no portal acadêmico, realizando a leitura da UNIDADE I: E-BOOK PARTE 1 – páginas 26 - 38, e responda às questões abaixo:
1. O 	que é microscopia?
É o campo técnico que envolve conceitos, técnicas, equipamentos e estruturas voltadas ao uso de microscópio, com o objetivo de obter imagens ampliadas que possibilitem a visão de detalhes que não são vistos a olho nu.
2. Qual 	a diferença entre microscopia óptica e de fluorescência?
A microscopia óptica as imagens são formadas através da emissão de um feixe de luz na faixa visível, ela é utilizada na microeletrônica até biotecnologia e biologia.
Na microscopia de fluorescência, utiliza-se a propriedade que certas moléculas possuem de emitir luz com comprimento de onda na faixa visível quando exposta a uma luz ultravioleta, em moléculas que não possuem essa propriedade elas são marcadas com corantes fluorescentes.
3. O 	que é técnica histológica?
É uma técnica que engloba os procedimentos necessários para a preparação de tecidos e lâminas para observação no microscópio.
4. Descreva 	algumas etapas envolvidas na preparação de uma amostra para 	microscopia óptica:
Essas técnicas têm como objetivo a preservação do material e também deixar a amostra o mais próximo possível do seu estado natural, são elas:
1°Coleta de material
Consiste na coleta da amostra.
2°Fixação:
Inibe a autólise (destruição celular), preserva os componentes das células e tecidos. O material coletado antes de ser fixado na lâmina ele deve ser imediatamente mergulhado no fixador, matando as células e endurecendo o tecido.
3°Desidratação:
Ocorre a retirada da água dos tecidos através da imersão da amostra em álcool etílico, acetona, éter, clorofórmio ou outros. Essa técnica ajuda a endurecer o tecido, favorece a penetração de parafina durante a inclusão.
4°Classificação:
Uma técnica utilizada para deixar os tecidos quase que transparentes. O tecido é imerso no solvente clarificador (xilol), que remove o álcool e a parafina, deixando o tecido mais claro, favorecendo a observação de algumas estruturas, além de proteger a lâmina de microrganismos.
5°Inclusão:
Nesta etapa o material é preparado para o corte. Após a remoção da parafina e xilol, o tecido é submerso em parafina liquida, que penetra nos poros vazios deixados pela água e gordura. Em seguida é colocada em parafina fundida (45°C) e levada para estufa até ocorrer todo o processo de impregnação. Ao ser retirado da estufa a parafina endurece formando um bloco rígido que pode ser cortado em finas camadas.
6°Corte:
O corte é realizado por um instrumento chamado micrótomo, ele pode ser regulado em vários tamanhos, que variam de 1 µm a 50 µm.
7°Coloração:
Os cortes devem ser colocados sob uma lâmina de vidro e passar pelo processo de coloração, a fim de evidenciar as estruturas da célula. Os corantes utilizados são solúveis em água e o mais comum é uma mistura de hematoxilina e eosina, também conhecida como azul de metileno. Para corar uma célula de forma adequada, o método mais indicado é o de coloração sucessiva do citoplasma e núcleo. Após isso, finalmente chega a hora de montar a lâmina. 
8°Montagem:
Nessa etapa, antes de colocar a lamínula sob a amostra, é necessário desidratar o tecido uma última vez, em concentrações crescentes de álcool. Depois, já com o tecido sob a lâmina, é necessário pingar uma gota de xilol e comprimir (delicadamente) a lamínula sobre o corte. Nos cortes de parafina, ao invés do xilol, é indicado usar o Bálsamo do Canadá.
5. O 	que são as técnicas abaixo e quais os tipos de amostras podem ser 	preparados utilizando estas técnicas (cite pelo menos um exemplo):
6. 
7. 
a. 
b. Esfregaço.
c. 
d. Essa 		técnica consiste em espalhar uma gota do material biológico sobre 		uma lâmina de microscópio e tem como principal finalidade a 		observação da morfologia celular. Para evidenciar as estruturas, 		é necessário corar o material primeiro. Ex: 		esfregaço 		de sangue.
e. 
f. 
g. Esmagamento.
h. 
i. Método 		usado quando o material é muito denso ou apresenta grumos. A 		amostra deve ser depositada entre duas lâminas e delicadamente 		pressionada. Em seguida, o material precisa ser espalhado e uma 		lamínula colocada por cima. Essa técnica separa as células e 		melhora a visualização no microscópio. 		Ex: Células de cebola.
j. 
k. 
l. Corte 		histológico.
m. 
Pode ser usado em diversos tipos de amostra, desde que seja possível o corte da estrutura escolhida. É muito simples, basta ter um bisturi para cortar o tecido em camadas bem finas, quase transparentes, colocar a lâmina, a lamínula, pressionar suavemente e observar no microscópio. Ex: Tecidos celulares animais e vegetais.
8. Tomando 	como base o esquema abaixo:
9. 
10. O 	que são os planos de corte longitudinal e de corte transversal no 	preparo de uma amostra histológica?
11. 
-Corte longitudinal: Corte vertical e total realizado ao meio da estrutura em direção vertical. Permite a visualização de tecidos internos. 
-Corte transversal: Corte horizontal e total. Profundo o suficiente para permitir a observação dos tecidos internos. 
12. Qual 	plano de corte foi realizado na amostra abaixo?
Corte transversal.
13. Cite 	pelo menos 3 exemplos de disciplinas e/ou campos de atuação 	profissional nos quais a microscopia poderá ser utilizada.
Biomedicina, Farmácia, Biologia, Medicina Veterinária, etc.