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Prof. Patrícia Costa Centro Universitário UNA Disciplina Micologia e Virologia FUNGOS Micologia ~100 mil espécies conhecidas cerca de 200 são patogênicas aos humanos e aos animais. • Macroscópicos e Microscópicos • Eucarióticos •Uni ou pluricelulares •Aclorofilados • Heterotróficos • Nutrição por absorção (exoenzimas) •Aeróbios e Anaeróbios Levedura – testes bioquímicos (bactérias) Fungos filamentosos - aspecto (incluindo características da colônia e dos esporos reprodutivos) Hifas crescem por alongamento das extremidades; Micélio vegetativo (nutrição) e reprodutivo/aéreo (reprodução) Unicelulares Anaeróbicas facultativas Pseudo-hifas (Candida albicans) Duas formas de crescimento – maioria patogênica 10 Brotamento - reprodução que começa com a formação de uma protuberância na superfície de uma célula parental e que cresce se tornando uma célula-filha. Acasalamento – duas células se fundem (zigoto) Formação de ascósporos REPRODUÇÃO DOS FUNGOS FILAMENTOSOS 13 * ZIGÓSPOROS * ASCÓSPOROS * BASIDIÓSPOROS Micoses – infecções fúngicas Fungos patogênicos – exógenos Candidiase e dermatofitose – microbiota normal Avanço médico – aumento de sobrevida e aumento das micoses oportunistas; Tratamento difícil –Compartilha produtos gênicos e visa metabólicas; Esporos assexuados – conídios e esporangiósporos (zigomicetos); Características : Ontogenia (origem e desenvolvimento) e morfologia; Classificação: Chytridiomycota Zygomycota Ascomycota (60% dos conhecidos e 85% dos patogênicos) Basidiomycota Determinada por: Reprodução sexuada Morfologia e fisiologia Relações filogenéticas Classe Zygomycota (zigomicetos) - Teleomorfo Reprodução sexuada – zigósporo Reprodução assexuada – esporângio Hifas vegetativas – septos esparsos Ex: Rhizopus, Absidia, Mucor, Cunninghamella e Pilobolus Classe Ascomycota (Ascomicetos) - Teleomorfo Reprodução sexuada – ascósporos Reprodução assexuada – conídios Hifas septadas Ex: Candida e Saccharomyces (leveduras); Coccidioides, Blastomyces, Tricophyton (filamentosos) Classe Basidiomycota (Basidiomicetos) - Anamorfo Reprodução sexuada – basidiósporos Hifas septadas Ex: cogumelos, Cryptococcus Fungos ambientais – requer fonte simples de N e carboidrato Candida - 6o patógeno nosocomial e a 4a causa mais comum de infecções de corrente sanguínea,adquiridas em hospitais. Pichia spp. , Rhodotorula spp. eTrichosporon spp. Aspergillus spp. – fungo oportunista mais frequente (pacientes submetidos a transplante de medula óssea e neutropênicos) Fusarium sp., Acremonium sp., Penicillium sp., Rhizopus sp. e Mucor sp. A esterilização e desinfecção dos materiais necessários. Lavar as mãos e secá-las. Identificação - nome do paciente, número de registro hospitalar (quando for o caso), tipo de amostra e data da coleta. Swabs são usados para coleta apenas para realização do exame cultura - ouvido, nasofaringe, orofaringe e boca (tubos contendo salina estéril e devem ser transportados o mais rápido possível e/ou conservados a 4ºC durante o prazo de 8 a 10 horas) Os materiais ditos contaminados (urina, fezes, pus, secreções de feridas ou trato respiratório) devem ser enviados, sob refrigeração a 4ºC, ao laboratório, o mais rápido possível, até 18 horas. Sangue e material de punção de medula óssea devem ser semeados diretamente em frascos contendo meio de cultura líquido ou bifásico (evitar coagulação e diminuição da sensibilidade do exame). O processamento dessas amostras deve ser realizado em, no máximo, 8 a 9 horas. Pelos, cabelos, escamas de unha e pele Exame microscópico direto – tratamento com KOH Cultura - inoculadas diretamente na superfície do meio de cultura Líquor, secreções e fluídos corporais Coletados com swabs e eluídos em solução salina. Serão centrifugados e o sedimento obtido utilizado para exame microscópico e semeadura em meios de cultura. Escarro – digerido para facilitar a manipulação da amostra Exame microscópico direto – tratamento com KOH Cultura - inoculadas diretamente na superfície do meio de cultura Tecidos – fragmentação com o auxílio de um bisturi estéril ou maceração com pistilo em almofariz. Sangue e aspirado de medula óssea Exame microscópico direto – baixa sensibilidade Cultura - inoculadas diretamente após a coleta em tubos contendo meio. Exame microscópico direto com hidróxido de potássio (KOH) a 20% Exame de pelos, pele, unha, tecido obtido por biópsia, exsudatos espessos e outros materiais densos Exame microscópico direto com tinta nanquim (tinta da China) amostras de líquor, urina, secreções ou exsudatos, para visualização de leveduras capsuladas do gênero Cryptococcus Meios não seletivos, que permitam crescimento de fungos patogênicos e bolores de crescimento rápido (< de 7dias). Ágar Sabouraud - relativamente barato e permitir o crescimento de todos os fungos. Isolamento ou subcultivo de dermatófitos recomenda-se o ágar batata - aumentar a esporulação e facilitar a identificação do gênero e espécie do fungo Para fungos dimórficos de crescimento lento (> 15 dias) - meios enriquecidos como o ágar infusão de cerebro-coração (BHI) Estrias em ziguezague (separação de eventuais contaminantes da amostra); Incubação recomendada a 30°C A identificação de fungos filamentosos tem, como fundamento, a observação da morfologia da colônia e aspectos microscópicos. Análise da colônia cor, textura, superfície, pigmento difusível no meio de cultura,entre outros. Microscopia hifa hialina ou demácia, septada ou cenocítica, forma, disposição e formação dos esporos - suficientes para a identificação dos gêneros. Microcultivo - preserva a disposição original dos esporos sobre as hifas e mantém íntegras estruturas formadoras de esporos (os esporângios de zigomicetos.
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