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Crescimento Microbiano Formas de crescimento bacteriano: - Fissão binária, bipartição ou cissiparidade: Divisão de uma célula em duas geneticamente iguais. - Brotamento: Célula mãe inicia um crescimento lateral que se desprende gerando uma nova geneticamente igual. - Filamentoso: As células se fragmentam de modo parecido com as hifas de um fungo. Tempo de geração: É o tempo necessário para que ocorra uma geração, ou seja, para que uma célula dê origem a duas. - É diferente para cada espécie, no qual algumas se dividem bem mais rapidamente do que outras. Fases do crescimento microbiano: 1. Fase LAG: Sem crescimento das bactérias devido ao seu reconhecimento do ambiente onde foram inoculadas. Nessa fase há a preparação para o início do crescimento. Um esporo se encontraria nessa fase. 2. Fase LOG ou exponencial: É a fase onde inicia o crescimento bacteriano de forma exponencial. Nessa fase as bactérias estão mais frágeis a antimicrobianos e radiação devido à energia gasta para se dividirem. Caso ocorra a administração de algum antimicrobiano nessa fase o crescimento é parado e se inicia a fase de declínio. Pode corresponder ao período de germinação. 3. Fase estacionária: Fase de platô onde o número de bactérias geradas equivale ao número de bactérias mortas. Os próprios metabólitos gerados por elas no meio são responsáveis pelo início de seu declínio. 4. Fase de declínio ou morte celular: O número de células mortas é maior que o número de células geradas. Se uma população incubada que atingiu a fase estacionária permanecer nas mesmas condições de incubamento elas podem chegar a zero, devido aos seus próprios metabólitos e a falta de nutrientes e oxigênio no meio. É a fase atingida quando se administra antimicrobianos. Fatores que influenciam no crescimento microbiano: - Físicos: Temperatura pH Pressão osmótica - Químicos: Oxigênio Carbono Nitrogênio Fósforo Enxofre Oligoelementos Fatores orgânicos de crescimento - Temperatura Aumento da temperatura aumente as reações químicas e taxas de crescimento bacteriano até que se atinja a temperatura ótima de crescimento daquela espécie, caso se ultrapasse essa temperatura há danos celulares e até a morte de algumas bactéria que não suportam altas temperaturas: Psicrotróficas: crescimento ótimo em temperaturas de até 7ºC. Psicrófilas: crescimento ótimo em temperaturas abaixo de 20ºC. Mesófilas: crescimento entre 25º e 40ºC. São as que geralmente parasitam os animais, temperatura ótima de 37ºC. Termófilas: conseguem sobreviver a temperaturas de até 90ºC, são bactérias utilizadas para realização de PCR - Thermus aquaticus = Taq polimerase. Hipertermófilas: acima de 100ºC = arqueobactérias. - pH Assim como a temperatura, as bactérias possuem pHs ótimos de sobrevivência, sendo: Neutrófilas: crescimento em pH neutro. Acidófilas: crescimento em pH ácido. Alcalófilos: crescimento em pH alcalino. - Pressão osmótica Influencia a saída ou entrada de água na célula. Algumas bactérias são mais resistentes a solutos que outras: Halotolerantes: toleram altas concentrações de sais. Halófilas: suportam concentrações de até 15% de sal. Halófilas extremas: até 30% de concentração de sais. Não halófilas: não suportam grandes concentrações de sais. - O2 Depende da exigência da bactéria por oxigênio ou não: Aeróbicas obrigatórias: necessitam de oxigênio. Microaerófilo: necessita de oxigênio, porém em concentrações menores do que a presente no ar. Aeróbicas facultativas: conseguem se reproduzir/sobreviver sem oxigênio. Anaeróbicas obrigatórias: oxigênio é tóxico. Anaeróbicas aerotolerantes: não usa oxigênio mesmo que esteja disponível no meio, mas não morre em sua presença como os anaeróbicos obrigatórios. Anaeróbicas facultativas: pode ou não usar o oxigênio disponível. Mensuração do crescimento microbiano: Direto: 1. Contagem em placa 2. Contagem direta ao microscópio Indireto: 3. Turbidez 4. Atividade metabólica 5. Peso seco Meios de cultivo: São soluções nutrientes que que promovem o crescimento microbiano. Definidos: Possuem composição química definida com compostos purificados. São usados para identificar a necessidade de algum composto para o crescimento microbiano. Complexos: Não possui composição exata definida, são constituídos de extratos nutritivos como de carne ou soja. Visam promover o crescimento de microrganismos variados. Ex: Ágar sangue, Ágar nutriente, Ágar Muller-hinton. Meios especiais: Podem diferenciar culturas e promover/inibir o crescimento de algumas culturas microbianas. - Seletivos: Permitem o crescimento de um tipo particular de microrganismo e inibe o crescimento de outros. - Diferenciais: Com indicador que permite diferenciar as culturas por mudança na cor da placa de acordo com o metabolismo das bactérias. Ex: Ágar TSI que diferencia bacilos gram negativos pela fermentação e produção de sulfeto de hidrogênio. - Seletivo diferencial: Permitem o crescimento de um tipo particular de microrganismo e inibe o crescimento de outros além de diferenciar seu metabolismo pela mudança no pH. Ex: Ágar Manitol salgado que inibem o crescimento de Escherichia colli e permitem o crescimento de Staphylococcus. E é diferencial por conter um indicador de pH que indica a mudança de rosa para amarelo quando a cultura contém Staphylococcus aureus. Ex: Ágar MacConkey que identifica enterobactérias e bacilos gram negativos além de diferenciar os que fermentam a lactose. - De enriquecimento: Favorecem o crescimento de certo microorganismo. Ex: Caldo Tetrationato que favorece o crescimento de Salmonella.
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