prática 2 Dosagem de AR e ART metodo DNS

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UNIVERSIDADE DO 
DEPARTAMENTO DE 
 
 
Prática 2 – Dosagem 
3,5 dinitro 
1.Procedimento Experimental
1.1 Construção da curva padrão de glicídios redutores:
Seguir o protocolo abaixo utilizando a solução padrão de glicose (5
µmol/mL) 
Enumerar os tubos falcon: B
Com auxílio da pipeta automática
solução de glicose nos tubos falcon.
Com auxílio da pipeta graduada, 
água nos tubos falcon. 
Com auxílio da pipeta volumétrica, acrescentar 
tubos falcon. 
 
Tubo Solução de 
glicose 
(mL) 
Branco - 
1 0,2 
2 0,4 
3 0,6 
4 0,8 
5 1,0 
- Após a adição dos reagentes agitar e aquecer à 100°C por 5 minutos, 
completar o volume a 1
- Utilizar o tubo com branco de reação
absorbância, determinar as absorbâncias a 540nm
- Calcular a concentração de glicose adicionada em cada tubo falcon.
- Lançar em gráfico as leituras de absorbância x concentração de 
determinar a equação 
obter o gráfico, a equação da reta e o fator de regressão).
 
 
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FACULDADE DE TECNOLOGIA 
EPARTAMENTO DE QUÍMICA E AMBIENTAL 
BIOQUÍMICA 
Dosagem de açúcares redutores pelo método do 
3,5 dinitro salicílico (DNS) 
1.Procedimento Experimental 
Construção da curva padrão de glicídios redutores: 
abaixo utilizando a solução padrão de glicose (5
Enumerar os tubos falcon: B (branco), 1, 2, 3, 4 e 5. 
pipeta automática, acrescentar os seguinte
solução de glicose nos tubos falcon. 
Com auxílio da pipeta graduada, acrescentar os volumes respectivos de 
 
Com auxílio da pipeta volumétrica, acrescentar 1,0 mL de DNS
H2O (mL) DNS (mL) Abs 540nm 
1,0 1,0 
0,8 1,0 
0,6 1,0 
0,4 1,0 
0,2 1,0 
- 1,0 
a adição dos reagentes agitar e aquecer à 100°C por 5 minutos, 
completar o volume a 10 mL com água destilada. 
tubo com branco de reação para zerar o aparelho de 
, determinar as absorbâncias a 540nm dos demais tubos
Calcular a concentração de glicose adicionada em cada tubo falcon.
Lançar em gráfico as leituras de absorbância x concentração de 
 da reta e o fator de regressão. (Use o Excel para 
obter o gráfico, a equação da reta e o fator de regressão). 
 
1 
cares redutores pelo método do 
abaixo utilizando a solução padrão de glicose (5,0 
, acrescentar os seguintes volumes de 
os volumes respectivos de 
DNS em todos os 
Concentração 
glicose 
(mol/L) 
 
 
 
 
 
 
a adição dos reagentes agitar e aquecer à 100°C por 5 minutos, 
para zerar o aparelho de 
dos demais tubos. 
Calcular a concentração de glicose adicionada em cada tubo falcon. 
Lançar em gráfico as leituras de absorbância x concentração de glicose e 
(Use o Excel para 
 
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1.2.1 Determinação da concentração de glicídios redutores em solução 
problema: 
- Diluir 1,0 mL do suco problema em balão volumétrico de 100
- Transferir 1,0 mL da solução problema diluída
acrescentar 1,0 mL de DNS.
- Aquecer à 100°C por 5 minutos, completar o volume a 10
destilada. 
- Determinar as absorbâncias a 540nm do tubo
- Lançar o valor de absorbância obtido na equação da reta
curva analítica (item 1.1)
- Calcular a massa de glicídios redutores 
 
1.2.2 Determinação da concentração de glicídios redutores totais em 
solução problema: 
- Colocar 20,00 mL de suco problema em béquer.
- Adicionar a seguir 70,0
- Levar o béquer para a chapa de aquecimento.
- Com auxílio do termômetro, q
65°C, adicionar 25,0 mL de HCl 1:1. Neste inst
aquecimento e deixar à temperatura ambiente
- Quando estiver pelo menos morno
volumétrico de 500,0 mL e avolumar o balão até volume final.
- Transferir 20,0 mL do
mL. 
- Completar o volume do balão com 
- Pipetar 1,0 mL da soluç
devidamente identificado.
- acrescentar 1,0 mL de DNS em cada tubo.
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Determinação da concentração de glicídios redutores em solução 
do suco problema em balão volumétrico de 100
mL da solução problema diluída para tubo falcon 
mL de DNS. 
Aquecer à 100°C por 5 minutos, completar o volume a 10,0
as absorbâncias a 540nm do tubo problema. 
valor de absorbância obtido na equação da reta proveniente da 
curva analítica (item 1.1). 
Calcular a massa de glicídios redutores (g) na garrafa de 1,0
Determinação da concentração de glicídios redutores totais em 
0 mL de suco problema em béquer. 
,0 mL de água destilada. 
ra a chapa de aquecimento. 
Com auxílio do termômetro, quando a temperatura da solução atingir 
mL de HCl 1:1. Neste instante retirar o béquer do 
xar à temperatura ambiente. 
pelo menos morno, transferir a solução para balão 
mL e avolumar o balão até volume final.
mL do hidrolisado diluído para balão volumétrico
Completar o volume do balão com NaOH 0,1 mol/L. 
mL da solução acima (solução problema) para tubo falcon
devidamente identificado. 
mL de DNS em cada tubo. 
 
2 
Determinação da concentração de glicídios redutores em solução 
do suco problema em balão volumétrico de 100,0 mL. 
para tubo falcon (15mL) e 
,0 mL com água 
proveniente da 
,0L de suco (g). 
Determinação da concentração de glicídios redutores totais em 
uando a temperatura da solução atingir 
ante retirar o béquer do 
, transferir a solução para balão 
mL e avolumar o balão até volume final. 
hidrolisado diluído para balão volumétrico de 50,0 
para tubo falcon, 
 
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- Aquecer à 100°C por 5 minutos, 
- Completar o volume a
- Determinar as absorbâncias a 540nm do
- Lançar o valor de absorbância obtido na equação da reta proveniente da 
curva analítica (item 1.1)
- Calcular a massa de glicídios redutores totais na garrafa de 1
(g). 
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EPARTAMENTO DE QUÍMICA E AMBIENTAL 
BIOQUÍMICA 
Aquecer à 100°C por 5 minutos, 
ompletar o volume até 10,0 mL com água destilada. 
as absorbâncias a 540nm do tubo problema. 
Lançar o valor de absorbância obtido na equação da reta proveniente da 
curva analítica (item 1.1). 
massa de glicídios redutores totais na garrafa de 1
 
3 
Lançar o valor de absorbância obtido na equação da reta proveniente da 
massa de glicídios redutores totais na garrafa de 1,0 L de suco