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* PROTEÍNAS PROTOS - “A primeira” “A mais importante” Foi o primeiro nutriente considerado essencial para o organismo. * FUNÇÕES -Elementos Estruturais (sustentação e proteção) -Contração Muscular - Transporte de substâncias -Enzimas -Hormônios Protéicos -Anticorpos -Fonte de Energia * * ESTRUTURA Aminoácidos ligados covalentemente através da ligação peptídica. Consiste da condensação do grupo –NH2 de um aminoácido com o grupo – COOH de outro aminoácido. * * Presentes em TODAS as proteínas 300 aminoácidos não protéicos AMINOÁCIDOS PRIMÁRIOS 20 * CLASSIFICAÇÃO QUANTO AO GRUPO R * CLASSIFICAÇÃO QUANTO AO GRUPO R * CLASSIFICAÇÃO QUANTO AO GRUPO R * CLASSIFICAÇÃO QUANTO AO GRUPO R * CLASSIFICAÇÃO QUANTO AO GRUPO R * PEPTÍDIOS X PROTEÍNAS Os polipeptídios têm Peso molecular menor que 10.000 Insulina - 2 cadeias polipeptídicas (30 e 21 resíduos) Glucagon - 29 resíduos Corticotrofina - 39 resíduos Ocitocina - 9 resíduos COFATOR X COENZIMA * ESTRUTURAS PRIMÁRIA, SECUNDÁRIA, TERCIÁRIA E QUATERNÁRIA * Hemoglobina X anemia falciforme * * NÚMERO DE CADEIAS Monoméricas Oligoméricas * ESTRUTURA DO COLÁGENO * ESTRUTURA DO CABELO * ESTRUTURA DA MIOGLOBINA * COMPOSIÇÃO DAS PROTEÍNAS Lipoproteínas Glicoproteínas Fosfoproteínas Metaloproteínas Hemeproteínas Insulina Grupo Prostético Simples Conjugadas * NECESSIDADES PROTÉICAS Necessidade de aminoácidos essenciais. Necessidade de proteína ou nitrogênio total (para a síntese de aminoácidos não essenciais). * AMINOÁCIDOS ESSENCIAIS ISOLEUCINA LEUCINA LISINA FENILALANINA METIONINA TREONINA TRIPTOFANO VALINA * BALANÇO DE NITROGÊNIO OU EQUILÍBRIO Ingestão de nitrogênio a partir de proteínas = perda de nitrogênio as fezes e urina BALANÇO DE NITROGÊNIO POSITIVO Ingestão de nitrogênio protéico em maior quantidade que a perda (síntese de novos tecidos, crescimento, gravidez e cicatrização) BALANÇO DE NITROGÊNIO NEGATIVO Falta um ou mais aminoácidos essenciais na dieta (é perdido mais nitrogênio que consumido) * QUALIDADE PROTÉICA PROTEÍNA COMPLETA -Presença de todos os aminoácidos essenciais -Alimentos de origem animal -Proteínas de referência: ovo inteiro e leite PROTEÍNA INCOMPLETA -Alimentos de origem vegetal. -Aminoácido limitante -A digestibilidade da proteína é também importante. * DIGESTIBILIDADE Produtos animais - 95 a 97% Cereais - 83 a 85% Legumes - 60 a 85% * NECESSIDADES PROTÉICAS Depende da qualidade (pelo menos 1/3 da ingestão diária deve ser de fonte animal) 0,5 a 0,8g/kg para adultos * EFEITO DO CALOR DESNATURAÇÃO Não altera o teor de aminoácidos Melhora a digestibilidade Influência negativa do calor Complexação com carboidratos, lipídeos, fenóis, pigmentos. Perda de lisina no leite pela ligação com um açúcar (lactose) - Reação de Maillard Na presença de açúcares ou lipídeos oxidados – resistência à digestão * DIGESTÃO E ABSORÇÃO HCl Pepsina Secreção Pancreática Aminopeptidases e carboxipeptidases PROTEINAS ESTÔMAGO INTESTINO DELGADO CÉLULAS DA BORDA EM ESCOVA AMINOÁCIDOS * DOENÇAS CARENCIAIS * KWASHIOKOR “Doença do bebê anterior quando nasce o próximo filho” Geralmente após o desmame Carência protéica Costa do Ouro Africana (Ghana) -1933 * KWASHIOKOR * * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO MÉTODO DE Kjeldahl (1885) Determinação do teor de nitrogênio total (protéico e não proteíco) Teor de Nitrogênio na maioria das proteínas 16% Fator de Conversão: 6,25 Trigo: 5,70 (17,5%) Leite: 6,38 (15,7%) Gelatina: 5,55 (18,0%) Ovos: 6,68 (15%) Soja: 5,70 (17,5%) Arroz: 5,95 (16,8%) * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO Método de Kjeldahl O Nitrogênio presente na amostra é transformado em amônia (NH4)+. Digestão com H2SO4 até que C e H sejam oxidados. A amônia é posteriormente separada por destilação e quantificada por titulação do destilado. Catalisadores: Mercúrio Cobre Selênio Sulfato de Potássio * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO ETAPAS DO MÉTODO DE KJELDAHL 1a DIGESTÃO Matéria orgânica + H2SO4 (NH4)2SO4 + SO2 + CO2 + H2O 2a DESTILAÇÃO (NH4)2SO4 + 2NaOH 2NH3 + Na2SO4 + H2O 2NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4 3a TITULAÇÃO H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O OBS: 1 mL H2SO4 (0,1N) equivale a 0,0014g de Nitrogênio * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO CÁLCULOS: 1 mL H2SO4 (0,1N) 0014 g de N 50 mL H2SO4(V) - mL NaOH (v) = Y mL H2SO4 que reagiram com NH3 1 mL H2SO4 (0,1N) 0,0014 g de Nitrog. Y mL H2SO4 (0,1N) X g Nitrogênio X Fator (6,25) Z g Proteína A (g) Peso da amostra P g Proteína 100 g Amostra Prot (%) = 100 x 0,0014 x (V – v) x 6,25 A * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO ETAPAS DO MÉTODO DE KJELDAHL 1a DIGESTÃO Matéria orgânica + H2SO4 (NH4)2SO4 + SO2 + CO2 + H2O 2a DESTILAÇÃO (NH4)2SO4 + 2NaOH NH3 + Na2SO4 + H2O 3NH3 + H3BO3 (NH4)3BO3 3a TITULAÇÃO (NH4)3BO3 + 3HCl 3NH4Cl + H3BO3 * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO CÁLCULOS: Titulometria de Neutralização: Nº meq ácido = Nº meq base mL ácido x norm. ácido = Peso N (g) / meq do N Peso N(g) = mL ácido x norm. ácido x 0,0014 Peso N (mg) = mL ácido x norm. ácido x 14 Peso N (mg) Tomada da Amostra (g) X% 100 g Amostra X% = Peso N (mg) x 100 A X% = mL ácido x norm. ácido x 14 x 100 A * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO MODIFICAÇÕES DO MÉTODO DE KJELDAHL 1. ADIÇÃO DE CATALISADORES Para acelerar a digestão da amostra. Melhores resultados com: Mercúrio Cobre Selênio 2. ÁCIDO BÓRICO Recolhimento da amônia em excesso de ácido bórico Borato de amônia Titulado com ácido padronizado * NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO OUTROS TIPOS DE DETERMINAÇÃO: 1. BIURETO (Riegler 1914) Duas ou mais ligações peptídicas complexo de cor roxa com sais de cobre em soluções alaclinas. A intensidade da cor é proporcional à quantidade de proteína. -Bastante específico, rápido,barato - Determinação da própria proteína -Necessidade de curva de calibração com um padrão conhecido de proteína. * 2. FENOL (FOLLIN-CIOCALTEAU-LOWRY) Interação das proteínas com o reagente fenol e cobre em condições alcalinas. Oxidação dos aminoácidos aromáticos por um reagente heteroplifosfato (fosfotungístico-fosfomolibidico) cor azul. - Muito sensível, específico. - Intensidade de cor variável com a composição de aminoácidos - Muita manipulação, incubação - Curva padrão NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO * 3. ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA Tirosina, Triptofano e Fenilalanina (aromáticos) Absorção UV em 280 nm -Rápido, simples, não destrutivo -Resultados não precisos 4. MÉTODO DYE-BINDING - Amostra + excesso de corante - O excesso de corante não reagido em solução é medido colorimetricamente NITROGÊNIO E CONTEÚDO PROTÉICO * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
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