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UNIVERSIDADE ESTÁCIO DE SÁ NUTRIÇÃO / ENFERMAGEM ADIELMA ALVES DE CARVALHO JOISE ARAGÃO MARIANA ALVES DE SOUSA RAFAELA SANTOS MOTA RAYLLANE MYLLENA LIMA SOARES RENAULT SIMONS SANTOS MONTEIRO ROBERTA BRITO PRÁTICA VII Solubilidade e desnaturação de proteínas ARACAJU/SE 2021 ADIELMA ALVES DE CARVALHO JOISE ARAGÃO MARIANA ALVES DE SOUSA RAFAELA SANTOS MOTA RAYLLANE MYLLENA LIMA SOARES RENAULT SIMONS SANTOS MONTEIRO ROBERTA BRITO PRÁTICA VII Solubilidade e desnaturação de proteínas Trabalho apresentado no curso de graduação da Universidade Estácio de Sá, sob orientação da prof.ª Denise Andrade da Silva, como requisito para obtenção de nota. ARACAJU/SE 2021 INTRODUÇÃO A base de todo tecido vivo são as proteínas, moléculas formadas pela combinação química entre aminoácidos, unidades menores que apresentam em sua molécula um grupamento ácido e um grupamento amínico. “As proteínas são macromoléculas formadas por uma sucessão de moléculas menores conhecidas como aminoácidos. A maioria dos seres vivos, incluindo o homem, utiliza somente cerca de vinte tipos diferentes de aminoácidos, para a construção de suas proteínas. Com eles, cada ser vivo é capaz de produzir centenas de proteínas diferentes e de tamanho variável. A solubilidade de uma proteína é muito variável e depende da distribuição e da proporção dos grupos polares (hidrofílicos) e dos apolares (hidrofóbicos) na molécula. Dessa forma, muitas proteínas são solúveis em água ou soluções salinas. Desde que uma proteína possua muitos grupos carregados positiva e negativamente provenientes de cadeias laterais dos aminoácidos, as moléculas irão interagir umas com as outras, com pequenos íons de cargas opostas e com água. Assim, ocorrem interações proteína-proteína, proteína-água e proteína-pequenos íons. Se a interação proteína-proteína é grande e a interação proteína-água é pequena, a proteína tenderá a ser insolúvel. Por outro lado, se a interação proteína-água é alta, a proteína tenderá a ser solúvel. Qualquer condição que aumente a interação proteína-proteína, ou decresça a interação proteína-água, decrescerá a solubilidade e vice-versa. A desnaturação em geral decresce a solubilidade das proteínas. MATERIAIS • Jaleco • Máscara para vapores • Óculos de proteção • Béquer • Clara de ovo • Água destilada • Bastão de vidro • Tubos de ensaio • Pipetas de Pasteur • Solução de albumina • Banho – Maria • Ácido nítrico concentrado • Solução de hidróxido de sódio • Solução de cloreto de sódio • Etanol absoluto METODOLOGIA Iniciei o experimento ligando o exaustor da capela, depois abri o armário inferior e coloquei na mesa todos os itens que serão utilizados no processo. Já com todos os matérias no interior da capela, irei colocar a clara do ovo que está localizada na placa de Petri dentro do béquer, vou adicionar água destilada, em seguida misturar utilizando o bastão de vidro e deixei um repouso por alguns minutos e foi observado que após a agitação houve a formação de um precipitado, pois a água possui uma alta constante dielétrica que reduz a força de atração entre íons de carga opostas, assim diminuindo a força de atração entre a água e a clara de ovo. Em seguida adicionei a solução de albumina no béquer 1 e com o auxílio da pipeta transferir amostras de solução de albumina que está contida no béquer 1 para os tubos de ensaios de 1 a 8, 2 ml por tubo de ensaio, depois que terminar de colocar as amostras nós tubos de ensaio, fiz a higienização da pipeta, já com a pipeta higienizada transferir amostras de solução de clara de ovo para os tubos de ensaio de 9 a 16, 2 ml em cada tubo de ensaio , logo depois coloquei os tubos de ensaio de 2 a 10 em banho – maria , adicionei os reagentes nós tubos de ensaio, depois coloquei a água destilada no béquer 2 e com a pipeta higienizada , pipetei o béquer 2 que tinha água e coloquei nos tubos de ensaio 3 e 11, em seguida limpei a pipeta e o béquer. Adicionei o ácido nítrico concentrado nós tubos de ensaio 4 e 12, adicionei também o ácido clorídrico concentrado nós tubos de ensaio 5 e 13, adicionei a solução de hidróxido de sódio nós tubos 6 e 14, coloquei a solução de cloreto de sódio nós tubos 7 e 15 e por último adicionei o etanol absoluto nós tubos 8 e 16, e deixei as amostras em repouso por alguns minutos, e foi observado que as proteínas apesar de possuírem uma estrutura tridimensional devido suas propriedades físicas, químicas e biológicas, elas podem sofrer alterações em suas estruturas quaternários, terciários e secundários quando são desnaturadas na tentativa de manter suas funções biológicas em funcionamento. 1. De acordo com o procedimento executado como podemos precipitar as proteínas. As proteínas se precipitaram tanto pelo aumento ou diminuição de concentrações de sais, uso de solventes, por calor e ph. 2. Cite três agentes desnaturantes: Calor, luz e agitação CONCLUSÃO A desnaturação é o evento primário e importante. Outros efeitos como floculação ou coagulação são manifestações visíveis das alterações causadas pelos agentes desnaturantes. Estas reações de precipitação com desnaturação, além de serem úteis para caracterizar a presença de proteínas em solução, também são úteis para se fazer a desproteinização de líquidos biológicos para análise de componentes não protéicos.
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