Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia - UESB Departamento de Ciências e Tecnologias - DCT EXTRAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE CARBOIDRATO Relatório apresentado ao curso de Ciências Biológicas na disciplina de Bioquímica prática, pelos discentes Gleiciane Gonçalves, Pedro Allan, Rafael Brito e Raiane Pereira do II semestre letivo, sob orientação da professora Luzia Aparecida Pando. Jequié-Ba 2021 SUMÁRIO INTRODUÇÃO…………………………...............................1 OBJETIVO……………………………...................................2 MATERIAIS E REAGENTES ……......................................3 PROCEDIMENTO..................................................................4 RESULTADO E DISCUSSÃO...............................................5 CONCLUSÃO…………………………….........................…6 REFERÊNCIAS………...........................................................7 1.Introdução Os carboidratos são chamados de açúcares e são a principal fonte de energia do nosso organismo. O amido também é carboidrato, é uma reserva vegetal de energia. Com tudo, este experimento consiste em estudar os polissacarídeos, através do amido da batata e identificá-lo como carboidrato, através de reações de coloração e precipitação. As cadeias de polissacarídeos são formados por dez ou mais monossacarídeos. São eles: amido (presente em vegetais e fungos), glicogênio (que fica acumulado no fígado) e a celulose (componente da parede celular e mais abundante na natureza, presente em hortaliças, grãos, cascas de sementes e frutas). O amido é utilizado para vários fins principalmente na alimentação para obtenção de energia . Mas também economicamente o amido é muito utilizado principalmente na indústria alimentícia e na indústria têxtil ,metalúrgica e farmacêutica. O amido é encontrado em grande quantidade na natureza e é formado por cadeias de amilose e/ou amilopectina. A amilose é formada por unidades de glicose unidas por ligações glicosídicas a- 1,4, e a amilopectina é formada por unidades de glicose unidas por ligações glicosídicas a-1,4 e a-1,6 . Assim sendo, pode-se dizer de maneira curta que o amido é uma molécula complexa formada por várias moléculas de glicose . Por tanto o amido é indispensável na alimentação humana , pois muitos vegetais e derivados que consumimos como o arroz, a mandioca e o trigo que são os mais conhecidos contém amido . 2. Objetivo Demonstrar a extração e caracterização do amido da batata. Identificar o amido como carboidrato. Evidenciar o amido através de reações de precipitação e coloração. 3.Materiais e reagentes 1° Parte do experimento Materiais 1- Faca. 1- Lâmina de vidro . 2- beckers . 1- Pisseta. 1- bastão de vidro. 1- Gaze ( para a filtração da solução). 1- Conta gotas de 10 ml . 1- Funil . 1- Agitador magnético . 2- Tubos de ensaio. 1- Estante para tubo de ensaio ( utilizado para o apoio dos tubo de ensaio). Reagentes ½ - De uma batata . 130ml de água fria destilada . 50 ml de água destilada quente . 3 Gotas do reativo de Molisch, o Alfa Naftol . 2 ml de ácido sulfúrico, H2SO4 concentrado. 3 Gotas de solução de Lugol o Iodeto de Potássio. 4. Preparação do Experimento ● Preparo da solução de grânulos de amido - Primeiramente com auxílio de uma faca cortou-se uma batata e logo depois com uma lâmina de vidro a metade da batata foi raspada dentro de um becker . - Depois no mesmo becker com uma pisseta foi adicionado 50 ml de água destilada fria e logo depois agitou a solução com um bastão de vidro para liberar os grânulos de amido da batata . - Em sequência foram utilizados o funil , um segundo becker e um gaze para fazer a filtração e a separação dos pedaços da batata que ainda restavam , logo depois a solução ficou parada por 10 minutos para que os decanters se afundassem . - Após o último período da solução, a solução aquosa foi colocada cuidadosamente no primeiro becker que foi utilizado no início do experimento para que assim ficasse somente os grânulos de amido insolúveis no fundo deste segundo becker. - Com um conta gotas foi adicionado novamente 50 ml de água destilada fria nesse segundo becker . Em seguida foi adicionado mais 50 ml de água destilada quente aos poucos sob agitação do agitador magnético . - Logo depois o equipamento (agitador magnético) foi desligado e notou-se que a solução ficou com característica opalescente, como foi citado no vídeo do experimento. ● Teste Molisch ( colorimétrico) - Em um tubo de ensaio foi adicionado 2ml da reação do amido que foi solubilizado com característica opalescente. - Logo depois foi adicionado 3 gotas do reativo de Molisch, é uma solução alcoólica mais o alfa naftol . - Em seguida pelas bordas do tubo é adicionado também 2ml de ácido sulfúrico concentrado o H2SO4 , pois ele é mais denso que a água destilada ficando assim no fundo do tubo . Após os procedimentos, o tubo com a solução Molisch ficou em repouso por 3 minutos na estante para tubo de ensaio . ● Teste reação do Lugol ( colorimétrico) - Em um novo tubo de ensaio é adicionado 2 ml da solução do amido que foi solubilizado na primeira etapa do experimento. - No mesmo tubo são adicionadas 3 gotas da solução de Lugol. A solução de lugol é composta de iodo e iodeto de potássio. - Após o procedimento notou-se que a solução de Lugol ficou com coloração azulada bem forte. ● Detecção de amido pelo reativo de Lugol No vídeo do experimento, o tubo de ensaio com a solução de Lugol foi colocado em banho-maria na temperatura de 100 °C para aquecer por alguns minutos , logo depois o tubo foi retirado. No mesmo processo foi colocado ao redor do tubo água destilada fria fazendo assim o resfriamento da solução. 2° Parte do experimento Materiais utilizados 4- tubos de ensaio. 2- Funil. 2- papel de filtro (para a filtração da solução). 1- Estante para tubo de ensaio ( utilizado para o apoio do tubo de ensaio). Reagentes - Sulfato de Amônio (NH4)2 SO4 saturada . - Álcool etílico etanol . - Reativo de Lugol o Iodeto de Potássio. Preparação do experimento Precipitação do polissacarídeos (Precipitação do amido) Formatado: Cor da fonte: Automática - Com a solução de amido pronta em um becker, foi adicionado 5 ml da solução de amido em cada tubo de ensaio, sendo que em um dos tubos foi inserido 5 ml de solução de sulfato de amônia (NH4)2 SO4 e no segundo tudo foi incorporado 5 ml de solução de álcool etílico (Etanol). - Em seguida foi agitado os tubos de ensaio para acontecer a homogeneização das soluções. Após a agitação das soluções foi deixado os tubos em repouso por 10 minutos. - Passado o tempo de repouso foi observado os polissacarídeos precipitados. Posteriormente, foi feita a filtração de ambas as soluções que estavam presentes nos tubos de ensaio com auxílio de dois funis para as duas soluções. - Logo após a filtragem foi realizado o teste do lugol no material eluído (filtrado) para a detecção de amido. Sendo acrescentado Três gotas de lugol em ambos os tubos. 5. Resultado e discussão - preparo da solução de grânulos de amido Nessaprimeira etapa do experimento foi uma das etapas mais importantes , pois a solução foi utilizada em todos os procedimentos como forma de testes durante determinados processos . É importante ressaltar que o preparo dessa solução mostrou resultado positivo por que foi seguido todos os padrões corretamente ,no fim foi solubilizada e apresentou características opalescentes . Compatíveis com os resultados propostos . - Teste de molisch (colorimétrico) Nesse procedimento foi notado que o experimento teve resultado positivo, pois depois de ter adicionado ácido sulfúrico concentrado o H2SO4 e a solução ter ficado 3 min em repouso. O experimento apresentou uma forma de anel de cor roxa púrpura na interface da solução . Mostrando que a água destilada seria mais densa que o ácido sulfúrico concentrado, ficando assim no fundo do tubo de ensaio . - Teste de reação do Lugol (colorimétrico) Também apresentou resultado positivo porque , quando foi adicionado a solução de Lugol que é composta por iodo e iodeto de potássio, foi notado que surgiu a coloração azulada forte significando que ali existia amido ou amilose . Porque as moléculas de iodo foram capturadas pela estrutura helicoidal da amilose apresentando assim a coloração azulada. - Detecção de amido pelo reativo de Lugol Nessa etapa a solução de Lugol foi colocada em banho-maria em 100 °C , nesse processo a solução perdeu a sua coloração azulada para uma cor um pouco opaca e transparente . Essa troca de cor aconteceu por que com o aumento da energia térmica da solução o amido perdeu a sua estrutura helicoidal e liberou as moléculas de iodo causando essa reação. Depois no mesmo processo foi adicionada água destilada fria ao redor do tubo de ensaio da solução e a cor azulada apareceu novamente , mostrando que o resultado poderia ser reversível . Isso aconteceu porque a temperatura diminuiu ,o amido retomou a sua estrutura helicoidal e consequentemente capturou novamente as moléculas de iodo na solução de Lugol.. - Precipitação do polissacarídeos (processo detecção do amido) No segundo experimento foi realizado com o intuito de obter o resultado da precipitação de proteínas do amido, através da filtração da solução com adição de lugol que é uma substância específica para identificar amido. Com auxílio de dois funis e papel, a devida solução foi filtrada e em seguida foi feita a colocação de gotas de lugol para chegar ao tal resultado desejado. Foi observado logo após a adição do lugol que a solução ficou com a coloração laranja, não ficando com a cor azul significando que não há presença de amida após a filtragem, no entanto, quanto foi adicionado lugol no papel do filtro foi constatado a coloração azul significando a presença de amido no papel da filtração. Ou seja, logo após a filtragem o amido ficou precipitado no papel, por tanto, o sulfato de amônia foi eficaz na precipitação do amido. No mesmo experimento foi realizado com segunda amostra, no entanto com a precipitação da solução etanólica e foi observado a coloração laranja, ou seja, negativo para presença de amido e em seguida, foi também realizado no papel do filtro, tendo a coloração azul testando positivo para a presença de amido que ficou retido no papel do filtro. Concluímos que logo após os dois atos contínuos do experimento realizado tanto o etanol ,quanto o sulfato de amônia são eficientes na precipitação do amido. 6. Conclusão Levando em conta os procedimentos, pode se dizer que os objetivos foram atingidos, desde a extração do amido , o preparo das soluções como foi mostrada no vídeo do e as reações também como a troca de coloração . Ambos tiveram os seus resultados positivos durante o experimento . Além de que todos os reagentes foram essenciais para que o resultado fosse alcançado ou seja indispensáveis como por exemplo a água destilada utilizada no preparo da solução de grânulos de amido e ativação na troca de coloração, o reativo de Lugol , o de Molisch, o sulfato de amônio e o etanol que foram utilizados também para detectação do amido ou amilose na solução junto com os materiais envolvidos durante o experimento . 7. Referências bibliográficas Aula #10 - Extração e Caracterização do Amido . Bioquímica Prática UFPR. You tube. 7 de nov. de 2020. 26 min 15s. Disponível em <https://www.youtube.com/watch?v=3uWhsz6NDUg> . Acesso em 03 de ago. de 2021. http://www.scielo.br/pdf/cta/v29n4/14.pdf https://www.youtube.com/watch?v=3uWhsz6NDUg http://www.scielo.br/pdf/cta/v29n4/14.pdf
Compartilhar