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2 UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAÍBA - CAMPUS I CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE – CCBS DEPARTAMENTO DE ENFERMAGEM ELLEN CRISTINA CORDEIRO LIMA HELLEN ANAÍDH DE OLIVEIRA Relatório: Aula Prática de Laboratório CAMPINA GRANDE, 2022 ELLEN CRISTINA CORDEIRO LIMA HELLEN ANAÍDH DE OLIVEIRA Relatório: Aula Prática de Laboratório Trabalho apresentado ao curso de Enfermagem da Universidade Estadual da Paraíba, como requisito para obtenção de nota na Unidade I do 1º período da Graduação. Prof. Dra. Danielle Franklin de Carvalho CAMPINA GRANDE, 2022 SUMÁRIO 1. INTRODUÇÃO 4 2. OBJETIVOS 5 2.1 OBJETIVO GERAL 5 2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 5 3. MATERIAIS 6 4. METÓDOS 7 5. RESULTADOS 8 6. CONCLUSÃO 9 7. ANEXOS 10 1. INTRODUÇÃO O presente trabalho busca analisar e relatar os resultados obtidos a partir da Cultura de amostras de Orofaringe realizada durante as aulas práticas no laboratório de Microbiologia da Universidade Estadual da Paraíba, que ocorreram em 25 de abril e 01 de junho de 2022, na presença da Prof. Dra. Danielle Franklin, na turma do primeiro período de Enfermagem. A cavidade bucal possui propriedades que a tornam um local distinto em comparação com outras regiões do corpo humano, este ecossistema não pode ser considerado homogêneo, cada uma de suas estruturas como: língua, sulco gengival, tonsilas, amigdalas e região da garganta, abrigam diversas microbiotas. Além disso, as condições bucais se modificam ao longo da vida, e essas mudanças alteram a flora desses arranjos. A cultura da secreção de orofaringe é um exame que auxilia na detecção de processos infecciosos presentes na cavidade bucal, contribuindo para a avaliação da microbiota local e detecção de microrganismos patogênicos, como o Streptococcus pyogenes (estreptococo beta-hemolítico do grupo A), ou potencialmente patogênicos, como os Streptococcus beta-hemolíticos dos grupos C e G, S. 1. OBJETIVOS 2.1 OBJETIVO GERAL Apresentar para os alunos o laboratório de microbiologia e demonstrar a técnica de cultura de secreção na orofaringe. 2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS - Conhecer o laboratório de microbiologia, sua estrutura e seus equipamentos principais. - Entender como é realizada e realizar a cultura de secreção na orofaringe de alguns alunos. - Semear amostras em ágar e observar as características e classificações de determinadas bactérias, como por exemplo, baseado em seu grau de hemólise. 2. MATERIAIS · Afastador de língua · Ágar sal Manitol · Ágar sangue · Alça microbiológica · Caldo de enriquecimento · Estufa a 37°C · Lamparina · Luvas · Placa Petri · Swab · Tesoura · Tubo de ensaio 4. METÓDOS Na aula prática do dia 25/05/2022 foi apresentado aos alunos do primeiro período de enfermagem o laboratório de microbiologia, assim como sua estrutura e alguns equipamentos, sob orientação da Prof. Dra. Danielle Franklin. Em seguida, foi demonstrado pela mesma a técnica de cultura de secreção na orofaringe. O primeiro passo na realização desse processo foi selecionar um dos alunos como voluntário para a demonstração. Em seguida, a professora utilizou um afastador de língua para facilitar o acesso na via oral, e foi realizada a extração de uma amostra na região das tonsilas, com auxílio de um swab estéril, tomando cuidado para não encostar em outras áreas da cavidade oral, como bochechas e língua. Em seguida, após a realização da coleta, o swab é inserido em um tubo de ensaio contendo um caldo de enriquecimento. A parte sobressalente da haste do swab é cortada com o auxílio de uma tesoura, e em seguida o tubo de ensaio foi fechado, objetivando o seu crescimento in vitro. O mesmo processo foi repetido entre os alunos, onde alguns realizaram a cultura e outros se dispuseram a ter suas amostras coletadas. Algum tempo depois, houve o crescimento das bactérias dentro dos tubos de ensaio, e então o líquido foi semeado pelo monitor da disciplina em placas de Petri contendo ágar sangue e ágar sal Manitol e em seguida levado para uma estufa a 37ºC. A segunda aula de laboratório foi realizada no dia 01/06/2022, onde os alunos retornaram ao laboratório para observar, a partir do desenvolvimento das bactérias, suas características, como: capacidade de hemólise, capacidade de crescimento em cloreto de sódio, estrutura da colônia, entre outros. Após a análise dos resultados das culturas dos próprios alunos, também foram apresentadas outras placas Petri com culturas de bactérias que estavam à disposição no laboratório. Um exemplo, foi a Escherichia Coli (Figura 1). Por fim, os alunos também tiveram a oportunidade de realizar o procedimento de semeadura com estrias sinuosas (Figura 2), que consiste em realizar estrias em uma placa Petri (que contém ágar) com auxílio da alça microbiológica, aplicar o material presente no tubo de ensaio (caldo de enriquecimento e amostra presente no swab) e logo após levar para a estufa. 5. RESULTADOS Na segunda aula, foi possível observar bem as características visuais desenvolvidas pelas colônias. Inicialmente, em alguns dos tubos de ensaio o caldo nutritivo se encontrou mais turvo, sugerindo uma possível maior concentração de micro-organismos. Em seguida, observou-se no ágar sangue a classificação das bactérias Streptococcus cultivadas, baseado em sua capacidade de realizar hemólise (Beta-hemolítico, Gama-hemolítico ou Alfa-hemolítico). E no ágar Sal Manitol, que identifica Staphylococcus aureus. A tabela a seguir apresenta alguns dos resultados das semeaduras resultantes das amostras extraídas dos alunos: ALUNO RESULTADO Aluno A e B Bactérias Gram-Positivas e Beta Hemolíticos Aluno C Bactérias sugestiva de Gram-Negativa e Gama Hemolítica Aluno D Sugestivo de bactéria do trato gastrointestinal Aluno E Sugestivo de Staphylococcus aureus Aluno F Bactérias Gram-Positivas Aluno G Bactérias Gama-Hemolíticos e sugestivo de Staphylococcus aureus 6. CONCLUSÃO Compreender como realizar a Cultura de secreção de Orofaringe é de suma importância para a nossa formação, visto que desenvolvemos técnicas na prática de como efetuar tal procedimento. Por isso, os objetivos propostos em aula foram alcançados com sucesso. A elaboração desse relatório teve por finalidade descrever as práticas executadas durante as aulas de laboratório de microbiologia. Que envolveram o reconhecimento das bactérias, podendo diferencia-las de acordo com sua capacidade de hemólise e reação no sal manitol. Todos os procedimentos descritos neste relatório ocorreram dentro das normas de biossegurança, prezando sempre a boa conduta e a indispensável organização para que as etapas fossem finalizadas com êxito. 7. ANEXOS Figura 1: Escherichia Coli Fonte: Nalenkia Ferrei Figura 2: Placa Petri com Ágar Fonte: Nalenkia Ferreira
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