DETERMINAÇÃO DE CARBOIDRATOS ÁCIDO-DIGERÍVEIS

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��LB.001 – CONFECÇÃO, ARQUIVAMENTO E RECUPERAÇÃO DE DADOS E REGISTROS��Elaborado por:��Revisão:�Data de Emissão:�Data da Primeira Versão:�Pág. ��
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��Elaborado:�Édela Boufleuer�Ass:��Data :�20/10/2010���Verificado:�Flávia Potrich�Ass:��Data :�20/10/2010���Aprovado:�Márcia Maluf�Ass:��Data :�24/10/2010���Próxima. Revisão:�09/2011�Versão:
�01�Página:�� PAGE �3� de � NUMPAGES �3���Determinação de Carboidratos�CÓD.�POP FQ 07-29��
 OBJETIVO
Garantir a padronização do método para determinação de Carboidratos Ácido-Digeríveis. 
 RESPONSABILIDADE
Diretor do Laboratório;
Responsável pela Garantia da Qualidade;
Analistas do Laboratório;
Técnicos do Laboratório.
 CAMPO DE APLICAÇÃO
Laboratório físico-químico
 DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA OU DOCUMENTOS RELACIONADOS
RQ - Registro de análise de Carboidratos;
POP FQ-07-07-Estufa de secagem; 
POP FQ-07-21-Banho-maria; 
POP FQ-07-30-Espectrofotômetro colorimétrico;
POP FQ-07-01-Balança analítica; 
POP FQ-07-31-Condensador de “Liebig”;
POP FQ-07-11-Micropipeta automática.
DEFINIÇÕES
Carboidratos ácido-digeríveis consiste em deixar amostras de alimentos em contato com ácido clorídrico diluído, em ebulição, por duas horas e meia. Após essa hidrólise ácida, os monossacarídeos resultantes são determinados colorimetricamente pelo reagente de Teles. Esse método é usado em alimentos como milho, sorgo, mandioca e rações concentradas (Silva, Queiroz, 2009).
 PROCEDIMENTO
Este procedimento é aplicável para determinação de carboidratos.
Equipamentos
Estufa de secagem;
Balança analítica;
Banho-maria;
Espectrofotômetro colorimétrico;
Condensador de “Libig”;
Materiais 
Espátulas;
Balão de fundo redondo de 100 ml;
Papel filtro;
Dessecador;
Micropipeta automática
Tubos de “Folin-wu”
Reagentes
Ácido clorídrico;
Ácido Pícrico;
Bissulfito de sódio;
Fenol cristal;
Glicose;
Hidróxido de sódio.
Descrição do método
Pese cerca de 0,5 g de amostra seca ao ar (12 hs a 65º C) e 0,5 g de glicose anidra (ou amido p.a.) em papel impermeável. A glicose servirá como padrão (2 mg/mL).
Transfira as amostras e o padrão para balão de fundo redondo, 100 mL com boca esmerilhada (a transferência tem que ser quantitativa);
Adicione aos balões 50 ml de ácido clorídrico 0,6 N, lavando bem a boca destes com o reagente;
Adapte ao aparelho de refluxo (condensador e manta) e refluxe por duas horas e meia, deixe em ebulição, agitando ocasionalmente;
Após resfriamento, filtre o hidrolisado para balões volumétricos de 250 ml (numerados), lavando bem os balões e funis. Complete o volume com água destilada;
Transfira 0,5 mL do Hidrolisado diluído para tubos de “Fulin-wu” de 25 mL, numerados. A alíquota poderá variar (0,5 a 1,5 mL), dependendo da riqueza da amostra em carboidratos. Um tubo extra, contendo água (0,5 a 1,5 mL), será usado como “branco”.
Adicione 3 mL do reagente de Teles, inclusive no “branco”, e tampe com rolha de borracha. Leve ao banho-maria, em ebulição, e deixe-os reagir durante seis minutos. Esfrie rapidamente, por imersão em água fria, e complete os volumes até a marca desejada (12,5 ou 25,0 mL).
Faça a leitura, 30 minutos após completar os volumes com água destilada, no espectrofotômetro colorimétrico no comprimento de onda de 540 nm, ajustado para 0% de absorbância (100% de transmitância), utilizando o “branco”. Obtenha os valores de transmitância, absorbância ou concentração e faça os cálculos, tomando como base os valores das leituras das soluções-padrão de glicose.
 Calculo:
 % Cad = Aa x % PP x Pp
 Ap Pa
	Número de Cópias
1
	Original: Arquivo Digital
Cópia: Laboratório Físico-químico 
Onde: 
	 Aa = Absorbância da Amostra. 
 Ap = Absorbância do Padrão.
	 PP = Pureza do Padrão. 
 Pp= Peso do Padrão.
 Pa= Peso da Amostra.
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