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1 Fração nitrogenada (proteica) As proteínas vão se diferenciar dos outros nutrientes por serem a única molécula orgânica que contém o nitrogênio em sua composição. As proteínas tem aproximadamente 16% de nitrogênio em sua composição. Método de Kjeldahl: ele vai quantificar a quantidade de nitrogênio da amostra, é um método antigo e oficial para essa determinação, é um método volumétrico, dado a partir de uma titulação. Esse método é composto por três etapas distintas: • Digestão; • Destilação; • Titulação. Digestão: a nossa matéria orgânica vai passar por um processo chamado de digestão, usando dois catalisadores químicos. • O primeiro catalisador é o sulfato de potássio (K2SO4), essa reação acontece em meio ácido, usando o ácido sulfúrico, esse sulfato de potássio vai aumentar o ponto de ebulição do ácido sulfúrico, que vai de 180°C para 400°C, tornando a digestão mais eficiente. No fim, essa matéria orgânica vai ser transformada em matéria inorgânica, o sulfato de amônio (cristais). • O outro catalisador é o sulfato de cobre (CuSO4), que vai acelerar a oxidação pela ativação do oxigênio. Destilação: para esse processo, vamos utilizar o destilador de nitrogênio, onde vamos esquentar a solução, de forma que o sulfato de amônio junto com o hidróxido de sódio vai se transformar em gás amônia, que vai ser condensado se juntando ao ácido bórico, formando o produto borato de amônio, na solução com ácido bórico, utilizamos o indicador vermelho de metila + azul de metileno, indicando realmente a presença de nitrogênio caso a amostra fique verde. 2 Titulação: para a titulação, vamos pegar o borato de amônio e misturar com ácido clorídrico, deixando o meio ácido novamente, usar o mesmo indicador, saindo da cor verde e chegando à cor rosa novamente. Método de Kjeldahl (explicação): é um método de volumetria, que usa a titulação para forma de análise, esse método é baseado na equivalência entre o conteúdo de N na amostra e o volume de HCl usado na titulação. Onde vamos ver a quantidade de ácido clorídrico que eu vou usar para titular a amostra. • Aplicável a todos os alimentos; • Método simples; • Barato; • Oficial para determinar proteínas. Desvantagens do método de Kjeldahl: • Mede o nitrogênio orgânico total, não apenas o N das proteínas, por exemplo se essa amostra tem a presença de DNA, RNA, posso estar medindo outro N, podendo ter um resultado falso positivo; • Método demorado; • Menos preciso do que o método de Biureto, que é um método onde temos uma precisão maior devido trabalhar com grupos de aminoácidos; • Utiliza reagentes corrosivos. Conteúdo de proteínas em alimentos específicos: de acordo com o alimento, posso ter uma diferença de porcentagem de nitrogênio na amostra, sendo importante para a realização do cálculo.
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