Infecções oportunistas - exames parasitológicos

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EXAMES PARASITOLÓGICOS
AULA 2 - INFECÇÕES OPORTUNISTAS: CRYPTOSPORIDIUM PARVUM, ISOSPORA
BELLI, CYCLOSPORA CAYETANENSIS
INTRODUÇÃO
Infecções oportunistas são aquelas que não ocorrem muito em pessoas
imunocompetentes, mas que frequentemente podem chegar a matar pessoas
imunodeprimidas. Elas estão entre as principais causas de morbimortalidade em
pessoas com AIDS, principalmente aqueles com baixa contagem de células TCD4.
CRIPTOSPORIDIOSE/CRIPTOSPORIDÍASE
● É uma doença causada por protozoários coccídios do gênero Cryptosporidium.
● A coloração álcool-acidorresistente modificada é utilizada para corar esse
parasito.
Morfologia
● Os oocistos são arredondados e medem cerca de 5mm, podendo ser
confundidos com leveduras. Nem sempre são visíveis, mas quando maduros
apresentam 4 esporozoítos em seu interior, circundados por uma parede cística
espessa. Não possuem esporocistos. As outras fases evolutivas não são
encontradas em fezes de pacientes.
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Diagnóstico laboratorial
● A amostra de escolha são as fezes. Pode ser corado pelo lugol ou pela
coloração álcool-acidorresistente.
● Lâminas fixadas em formalina e coradas com Giemsa também podem mostrar os
oocistos.
● Eles podem, ainda, ser identificados por meio de ELISA ou imunofluorescência
indireta. Merozoítos e gametócitos só são vistos em amostras de biópsia.
● Das 27 espécies catalogadas, C. parvum e C. hominis são as principais
causadoras de doenças em humanos.
Transmissão
● Ocorre pela ingestão de água ou por fezes (de humanos ou animais) infectadas
com oocistos esporulados
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● São destruídos por amônia 5%, H2O2 e formol 10%
● Grupos de risco:
a. Ocupacional: médico veterinário, fazendeiros, manipuladores de animais,
médicos, enfermeiros
b. Contato com pessoas/animais infectados
c. Viajantes
d. Imunodeprimidos
● Em pessoas com HIV, ela geralmente se manifesta quando os níveis de linfócito
TCD4 são inferiores a 100 células/mm³. Nesse caso, pode causar alterações
hepáticas, pancreáticas, biliares, respiratórias e articulares.
● Entre crianças e indivíduos HIV+ foram relatados casos de diarreia, náuseas,
vômitos, dores articulares, cefaléia e dor nos olhos causados pela C. hominins,
em contraste com a C. Parvum, que apresenta somente relatos de ocorrência de
diarreia.
● Não existe um tratamento medicamentoso, apesar da espiramicina ter se
mostrado eficaz em alguns casos.
Ciclo de vida
Existem estágios sexuados e assexuados, mas realizados em um único hospedeiro.
1. Quando a pessoa ingere o oocisto esporulado, ele libera quatro
esporozoítos por excistação. Esse processo acontece devido a variação
de temperatura, de pH, pela quantidade de CO2, pelas enzimas
pancreáticas, entre outros.
2. Os esporozoítos invadem as células da mucosa intestinal (principalmente
jejuno e íleo). Todos os estágios seguintes acontecem em um
compartimento ao mesmo tempo intracelular e extracitoplasmático, com
os vacúolos parasitóforos sendo formados a partir da membrana da
célula hospedeira.
3. Dentro da célula, o esporozoíto matura a trofozoíto. Depois, há
reprodução assexuada (merogonia ou esquizogonia), formando merontes
do tipo I.
4. Eles maturam a merozoítos do tipo I e são liberados no lúmen, podendo
infectar outros enterócitos e formar merontes tipo I (recomeçando a
merogonia) ou infectá-los e formar merontes tipo II.
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5. Os merontes tipo II
podem produzir até quatro merozoítos e
se diferenciam, formando
microgametócito e macrogametócito.
Esses, após o período de fertilização e de
maturação, irão originar o zigoto.
6. O zigoto, após dois
ciclos de esporogonia, origina o oocisto, o
qual contém quatro esporozoítos. Os
oocistos podem apresentar paredes
delgadas ou paredes espessas.
7. Oocistos de
paredes grossas são as formas
infectantes que são liberadas nas fezes
do hospedeiro infectado, permanecendo
viáveis por muitos meses.
8. Oocistos de
paredes finas são responsáveis pela auto
infecção, pois se rompem dentro do
organismo hospedeiro, iniciando um novo
ciclo.
Sintomas
● Os principais sintomas em pessoas imunossuprimidas são diarréia crônica,
caquexia, distúrbios eletrolíticos, podendo haver acometimento estomacal e
pulmonar. No geral, tem-se diarréia autolimitada com média de 2 semanas,
febre, vômitos, náusea, perda de peso e dores abdominais.
ISOSPORÍASE
● Isospora belli é o principal agente etiológico
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● A doença é mais comum em áreas tropicais e subtropicais, sendo endêmica em
algumas regiões da África, do sudeste asiático e da América do Sul.
● Está diretamente associada à precarização do saneamento e higiene.
Morfologia:
● o oocisto é oval (elíptico, extremidades afuniladas) e transparente, medindo, em
média, 30mm de comprimento por 12mm de largura (maior que o do
Cryptosporidium sp.)
● Dentro do oocisto está o esporoblasto, uma estrutura arredondada que contém
uma célula em seu interior. Ele se divide em 2 durante sua maturação e,a o final,
origina dois esporocistos.
● Os esporocistos contém 4 esporozoítos em forma de meia-lua em seu interior.
Tanto o esporoblasto quanto o esporocisto é envolvido por uma membrana lisa,
incolor e com duas camadas: a parede cística.
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Diagnóstico laboratorial
● As amostras mais indicadas são fezes frescas e conteúdo duodenal.
● Nas amostras de fezes podem ser encontrados oocistos maduros (esporulados),
parcialmente maduros (em processo de esporulação) ou imaturos (não
esporulados). Isso porque ele é liberado nas fezes na forma imatura com apenas
um esporoblasto e depois sofre maturação, formando dois esporoblastos e
posteriormente dois esporocistos.
● Quando o paciente tem baixa parasitemia, uma biópsia intestinal pode mostrar
parasitos (e seus estados morfológicos), embora nas fezes eles não estejam
presentes.
● Os oocistos podem ser vistos em preparações úmidas diretas ou naquelas feitas
após concentração ou flutuação. Por serem transparentes, podem ser difíceis de
identificar em preparações úmidas com salina, sendo mais visíveis naquelas com
lugol.
● A coloração permanente mais indicada é a coloração álcool-acidorresistente
modificada (Ziehl-Nielsen modificada), também podendo ser feita com a
coloração auramina-rodamina.
● PCR e imunofluorescência podem ser realizadas para o diagnóstico devido a
dificuldade de identificação por MO.
Patogenia e quadro clínico
● Reduz as vilosidades intestinais, diminuindo a superfície de absorção do intestino
delgado e gerando hiperplasia no local devido a inflamação.
● Há diarreia aguda autolimitante em indivíduos imunocompetentes apesar da baixa
prevalência.
● Em pessoas imunocomprometidas, há diarreia grave ou crônica, liberando as
formas infectantes do parasita. Pode haver febre, náusea, dores abdominais,
cefaléia, perda de peso, vômito e fezes meteóricas.
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Ciclo de vida
1. Excreção de oocistos não
esporulados nas fezes.
2. Esporulação (maturação) do
oocisto no ambiente e sua ingestão
pela pessoa
3. Ocorre excistação, com
liberação dos esporozoítos maduros.
Eles se multiplicam, originando o
esquizonte produtor de merozoítos, e
depois rompem as células.
(reprodução assexuada).
4. Esses merozoítos podem
invadir novas células (repetindo a
etapa assexuada), etapa chamada de
merogonia, ou podem realizar
gamogonia, que é a produção de micro
e macrogametas.
5. Os microgametas rompem os
enterócitos e nadam até os macro para
realizar a fecundação. Depois, há a
esporogonia, onde o zigoto se
transforma em oocisto, que é liberado
nas fezes.
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CICLOSPOROSE
● Agente etiológico é o Cyclospora cayetanensis, um protozoário (coccídeo
intestinal) patogênico para o ser humano.
Morfologia
● Oocistos arredondados medindo entre 7 e 10mm de diâmetro, maiores que o C.
parvum e menores que o I. belli.
● Oocistos não esporulados, quando liberados nas fezes, precisam de 2 semanas
para se tornarem maduros.
● Oocistos maduros apresentam dois esporocistos ovais, cada um contendo dois
esporozoítos.
● A parede cística é evidente e bem definida, contendo glóbulos refratáriosde
membrana espessa (coram de castanho com o iodo). Pode ser, ainda, ondulada
ou rugosa em algumas preparações.
● Não apresentam morfologia interna bem definida, variando na intensidade da
cor (rosa, vermelho, púrpura). O fundo azul também possui intensidade variável.
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Diagnóstico laboratorial
● Amostras de fezes (concentradas ou não) com ou sem o uso de formalina.
● Adição de dicromato de potássio a 2,5% aumenta as chances de esporulação do
oocisto.
● Pode-se usar a coloração áclool-acidorresistente ou fazer flutuação seguido de
microscopia de contraste de fase ou de campo.
● Usa-se, ainda, autofluorescência com luz UV e coloração safranina modificada.
Patogenia e quadro clínico
● Também causa atrofia das microvilosidades e hiperplasia das cristas devido à
inflamação.
● Em pessoas imunocompetentes, o quadro é passageiro, acontecendo diarreia,
febre, mialgia, vômitos, fadiga e perda de peso.
● Em pacientes imunocomprometidos, os sintomas são os mesmos, mas a diarreia
é mais persistente. em alguns casos, pode haver acometimento biliar.
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Ciclo de vida
1. A pessoa contaminada elimina
o oocisto imaturo nas fezes
2,3,4. Ele precisa de cerca de 2
semanas para esporular e contaminar
água e alimentos.
5. e 6. A pessoa ingere o oocisto
esporulado e ocorre o
desencistamento, liberando os
esporozoítos no duodeno e jejuno.
Quando infectam essas células, os
esporozoítos originam trofozoítos.
7. Os trofozoítos irão realizar
merogonia e formar merontes, os
quais contém merozoítos. Esse
merozoítos irão infectar novas células
A fase sexuada acontece com
diferenciação de micro e
macrogametócitos, que são
fecundados e originam o zigoto
(oocisto).
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