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ESCURECIMENTO ENZIMÁTICO x Ocorre em muitas frutas e vegetais x Quando o tecido é cortado, os compostos fenólicos que estão no vacúolo são expostos ao O2, ocorrendo a conversão destes em pigmentos marrons (melaninas). O produto inicial da oxidação é a quinona, que se condensa gerando pigmentos escuros chamados melaninas. x A cor é um atributo muito importante, pois o consumidor geralmente julga inicialmente a qualidade de um produto pela aparencia DESEJÁVEL: folha de chá, cacau/chocolate, café, ameixa seca INDESEJÁVEL: frutas/vegetais (Suco) (pós-colheita, processamento, transporte, armazenamento, preparo doméstico) ASPECTO ECONÔMICO: 50% da produção mundial de frutas tropicais é perdida (diminuição da vida útil) ASPECTO DA QUALIDADE: Nutricional: podem haver perdas de nutrientes. As o-quinonas (compostos altamente reativos) reagem entre si e também com a vitamina C e tocoferol e também há perda dos compostos fenólicos (compostos bioativos) Sensorial: sabor (odor, gosto) e aparência SUBSTRATO + PPO +O2ĺ�ESCURECIMENTO Substrato: compostos fenólicos PPO: enzima polifenoloxidase O2 Reação de oxidação dos compostos fenólicos catalisados pela PPO Após a formação de quinonas, as reações subsequentes ocorrem espontaneamente, e não dependem da enzima e de O2 SUBSTRATOS Compostos fenólicos – presentes nos vegetais, estruturalmente contém um anel aromático com um ou mais grupos hidroxilas, ligados a outros compostos PPO PPO – Polifenoloxidase: é uma proteína que contem sobre como grupo prostético. presente em: x praticamente em todos os tecidos vegetais; x em algumas bactérias e fungos; x em mamíferos, e o substrato é a tirosina, responsável pela cor da pele (melanina) FRUTAS/VEGETAIS COM ALTO TEOR DE PPO: maçã, pêra, banana, folhas de chá, cogumelo, manga, batata doce e inglesa, café, pêssego, berinjela, abacate, cacau CARACTERÍSTICAS GERAIS DA PPO x Faixa ótima de pH= 6,0–7,0 x Inativação pH Com o amadurecimento= Ļatividade da PPO (participam do processo de respiração) Atividade em função de: variedade, estágio de maturação, condições de cultivo (colheita) Devido à especificidade de vários substratos, a enzima PPO é às vezes denominada tirosinase, polifenolase, fenolase, catecol oxidase, catecolase e cresolase AS ENZIMAS Ao grupo de enzimas responsável pelo escurecimento enzimático tem-se dado vários nomes, tais como fenolase, polifenolase e polifenoloxidase. Esta classe de enzimas é caracterizada por possuir o cobre como grupo prostético e engloba um n° de fenolases. Tirosinase: é uma monofenol oxidase capaz de oxidar o aa tirosina a toquinona-fenillalanina. A tirosina sofre inicialmente uma hidroxilação, dando formação a 3,4 – dihidrofenil-alanina que é então oxidada. Catecolase: é uma polifenoloxidase que catalisa a oxidação do catecol e outros compostos fenólicos semelhantes Lacase: uma polifenoloxidase que catalisa a oxidação do lacol, uma substancia fenólica que se torna escura após oxidação. Ácido ascórbico oxidase: enzima que contém cobre e catalisa a oxidação do ác. Sóbrico a ác. dehidroascórbico. MÉTODOS DE CONTROLE DO ESCURECIMENTO ENZIMÁTICO substrato + enzima + oxigênio Substrato: remoção Enzima: x Inativação térmica x Abaixamento de pH x Adição de substâncias que inibam a ação da PPO ou previnam a formação da melanina Oxigênio: remoção Se qualquer um desses fatores (substrato, O2 e enzima) estiver ausente ou for impedido de participar da reação, não haverá oxidação e, assim, não ocorrerá o escurecimento. Métodos: x Emprego da temperatura (frio ou calor) x Emprego de agentes químicos x Aplicação de dióxido de enxofre ou sulfito (SO2) x Aplicação de ácidos x Outros agentes químicos x Remoção do O2 INATIVAÇÃO TÉRMICA DA PPO Emprego do frio: A utilização de temps baixas (refrigeração e congelamento) apenas diminuem a intensidade da ação enzimática, ñ conseguindo paralisa-la totalmente e, quanto + baixa for a temp + lentamente a reação ocorre, ñ impedindo assim, a formação de compostos escuros. Emprego do calor: A inativação da enzima pelo calor é, quase sempre, devido a uma desnaturação das proteínas. Branqueamento: x Utiliza temp entre 70–90°C por um tempo de 1 a 5 min (inativam as PPO) x Utilizado em pré-tratamentos de frutas e vegetais para enlatamento, congelamento e desidratação x Pode ser feito em uma câmara de vapor ou mergulhando a fruta devidamente preparada em água fervente por um tempo adequado. x desvantagens: frutas/vegetais cozidos e alteração da textura e “flavor” – principalmente em frutas + delicadas. APLICAÇÃO DE ÁCIDOS x cítrico, fosfórico, málico e ascórbico x Efeito inibitório duplo: os ác tem propriedade de abaixar o pH e complexar- se com o cobre do centro ativo da PPO; x ĻpH = Ļ velocidade da reação x Abaixamento do pH em duas ou mais unidades do pH ótimo (6,0) x Muito utilizado: ácido cítrico + ácido ascórbico + sulfito de sódio Suco de maçã x centrifugação ou filtração; x imersão da maçã fatiada em solução 1% de ácido ascórbico x embalado com o mínimo de espaço livre - Quantidades de até 300mg de ác. ascórbico/500mg controlam o escurecimento em frutas enlatadas Ex: Batata 0,2% de sorbato de potássio 0,3% a 1,0% de ác. cítrico 0,3% a 1,0% de ác. ascórbico Imersão das batatas na sol/1min. Podem ser armazenadas a 4 °C em embalagens plásticas por até 20 dias APLICAÇÃO DO DIÓXIDO DE ENXOFRE E SULFITO x Inibição direta sobre a enzima (centro ativo) x Interação direta com intermediário, podendo combinar com a quinona, formando sulfoquinona x Atua como agente redutor: redução da o- benzoquinona de volta para a forma o- difenol; x São consumidas no processo, tem efeito temporário x A quantidade depende: natureza do substrato; a concentração de SO2 deve evitar dar gosto desagradável ao produto e ao msm tempo permitir um controle eficiente da reação enzimática. x Ex.: quando somente monofenóis, como a tirosina estão presentes, quantidades menores de sulfito é o bastante, como em batatas; x Ex.: quando difenóis (ác. Clorogênico) estão presentes, concentrações mais elevadas são necessárias, como no abacate; x Desvantagem: destruição da vitamina B1; corrosão da embalagem (lata); aparecimento de algumas formas de asma REMOÇÃO DE OXIGÊNIO x Embalagens impermeáveis ao O2 (atmosfera modificada) x Embalagens herméticas (a vácuo) x Exclusão de O2 em sucos e bebidas pelo nitrogênio
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