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Tecnologia de Alimentos TEÓRICA Escola de Nutrição – DTA Prof. Flávio Cardoso Alteração em Alimentos – Atividade Enzimática ATIVIDADE ENZIMÁTICA • Causas Bioquímicas de Alteração na Qualidade – Enzimas: • Reações ao longo do processamento/ armazenamento • Perda de qualidade do produto final • Rejeição pelo consumidor • IMPORTANTE – Identificar as enzimas responsáveis – Desenvolver tecnologias de inativação FATORES QUE INFLUENCIAM A ATIVIDADE ENZIMÁTICA • Efeito do pH – As diferentes formas de ionização dos AA interferem: • Na conformação da enzima • Na ligação E+S • Na capacidade da enzima de realizar a reação Fenilalanina Tirosina Lisina Ácido Glutâmico Efeito da Temperatura Veloc. Temp. destruição térmica T ótima ATIVADORES DE ENZIMAS • INIBIDORES DE ENZIMAS – Inibição irreversível – Inibição reversível As principais classes de Enzimas 1. Oxiredutases: realizam reações de oxi-redução 2. Transferases: transferem grupos químicos de uma substância para outra. 3. Hidrolases: realizam reações de hidrólise 4. Liases: quebram ligações químicas gerando uma dupla ligação em um dos compostos 5. Isomerases: transformam um isômero em outro 6. Ligases: formam ligações químicas com auxílio da lise de ATP. Alterações Bioquímicas na Qualidade dos Alimentos • Alterações da Cor – Escurecimento Enzimático – Polifenol Oxidase • Alterações de Aroma – Rancidez Hidrolítica • Lipase – Rancidez Oxidativa • Lipoxigenase • Alterações de Textura/Turbidez – Pectinases Atividade Enzimática • 1. Alteração da cor – Escurecimento Enzimático: • surgimento de cor escura em certos vegetais, fungos e crustáceos quando seus tecidos são cortados e expostos ao ar. • Pigmentos escuros rejeição do consumidor • Formação de odores indesejados (“off-flavor”) e perda nutricional – principalmente por destruição de aminoácidos (tirosina, por ex.). Polifenol Oxidase • Formação de pigmentos em 3 Etapas 1. Rompimento dos tecidos → encontro enzima + substratos (fenólicos + O2) 2. Etapa Bioquímica PFO – oxidação de fenóis a quinonas 3. Etapa Química – quinonas (incolores) → formação de Melaninas (escuras) Escurecimento Enzimático OH OH OH O O O2 PPO O2 PPO H2O Monofenol orto-difenol orto-quinona Etapa Química Escurecimento Enzimático • Polifenol oxidases são enzimas de baixa especificidade: catequinas, ácido clorogênico, ácido caféico, tirosina, antocianinas. • Dependem apenas do contato com o oxigênio molecular. Escurecimento Enzimático • Formas de evitar o escurecimento enzimático: • Por tratamento térmico (ou branqueamento): – pH ácido reduz tempo/temperatura – Desvantagens: • Pode alterar o sabor de produtos vegetais (sabor de cozido); • Permite que as reações aconteçam até que a temperatura acabe por desnaturar a enzima. O escurecimento causado neste período é irreversível. – Usos • Produtos que sofrerão outros tratamentos – enlatados; secos, etc. Escurecimento Enzimático • Por acidificação do meio: polifenol oxidases são inativadas em valores de pH inferiores a 4,0. • Para garantia da eficiência do método, a acidificação deve ser rápida após o descascamento/corte. Escurecimento Enzimático • Este método depende de dois fatores: – o produto deve ser compatível com a acidez desejada (sabor); – o produto deve ser de um tamanho tal que o acidulante seja capaz de penetrar até o centro. Escurecimento Enzimático • Por adição de inibidores químicos: • Sulfitos: – Atuam no sítio ativo de polifenol oxidases, inibindo sua ação; – Reagem com quinonas impedindo que elas polimerizem; – São de baixo custo; – Apresentam atividade anti-microbiana. Por adição de inibidores químicos: • Ácidos orgânicos: os mais aplicados são o cítrico, o ascórbico e o málico. – Atuam como inibidores enzimáticos e contribuem para o abaixamento do pH do meio. – O ácido ascórbico: • Capaz de se oxidar, reduzindo orto-quinonas de volta a difenóis. • Apresenta alto custo • Sua forma oxidada pode se degradar gerando escurecimento não enzimático no produto. Por adição de inibidores químicos: • Sais: polifenol oxidases são inibidas na presença de halogenetos. – NaCl – ZiCl2 e CaCl2 com ácido ascórbico • Agentes redutores: substâncias que reagem preferencialmente com as quinonas gerando compostos incolores. – Produtos aplicados: • cisteína, • N-acetil-cisteína • Glutationa reduzida • Uso é limitado pelo alto custo. 2. Alterações no Aroma • Rancidez Hidrolítica – Formação de odor desagradável – Produtos ricos em lipídeos – Liberação de ác. graxos voláteis • Óleos e gorduras – contaminação microbiana • Leite e laticínios – enzima nativa Rancidez Hidrolítica • Esterases que atuam sobre substratos insolúveis em água • Produzidas por animais, vegetais e microrganismos Rancidez Oxidativa • Odor característico de ranço • Oxidação de ác. graxos insaturados • Formação de hidroperóxidos • Decomposição e liberação de produtos voláteis Rancidez • b) Rancidez oxidativa: processo de oxidação de ácidos graxos que leva à formação de hidroperóxidos. • Pode ser iniciado pela ação de lipoxigenases. • Lipoxigenases são específicas para ácidos graxos com ao menos dupla insaturação e que apresentam um grupo metileno no carbono 8 (ác. linoléico, linolênico). Rancidez Oxidativa • Soja, milho, trigo e ervilha: formação de odor desagradável e destruição de vitaminas lipossolúveis e de ácidos graxos essenciais. • Lipoxigenase: – não é afetada pela presença de anti-oxidantes – enzimas termolábeis (branqueamento). 3. Alterações na Textura • Amolecimento excessivo • Perda da textura desejável • Fim da vida-de-prateleira - Frutas e vegetais in natura • Separação de fases em sucos • Enzimas Pectinolíticas – Pectina Metilesterase (PME), Poligalacturonase (PG) e Pectina-Liase (PL) Pectinases • Pectina Metilesterase • Poligalacturonase • Pectina Liase • Em Frutas e Hortaliças in natura – Amolecimento • Amadurecimento → Perda de vida-de-prateleita • Espécie/variedade – produção de etileno – atmosfera de armazenamento • Em sucos e néctares – Remoção de turbidez – Formação de precipitado Pectinases • Enzimas Termolábeis – Inativadas por tratamento térmico (Branqueamento) • Aplicação na Indústria de Alimentos – Extração de sucos – aumento rendimento – Redução de viscosidade – concentração – Filtração – vida útil de filtros – Vinhos – melhores cor e aroma
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