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Resumo Substratos para processos fermentativos Fonte de carbono: Glicose, sacarose, frutose, amido, celulose; Fonte de nitrogênio: (NH4)2SO4, ureia, aminoácidos; Fonte de fósforo: Monoamônio fosfato (MAP), diamônio fosfatp (DAP); Outros substratos: Ca, Na, K, Fe, Cu, Mg, Mn MATERIAS PRIMAS QUE PODEM SER UTILZADAS COMO SUBSTRATOS EM PROCESSOS FERMENTATIVOS Produtos naturais ou seus derivados de natureza orgânica, produtos ou subprodutos da agricultura e do processamento de vegetais. Meios de cultivo/substratos o Meios em que devem conter todos os nutrientes de forma adequada para crescimento para síntese do material celular e produção dos produtos metabólicos Produtos químicos puros: pesquisa iniciais em laboratório; Subprodutos/coprodutos/substratos complexos: fermentações industriais; Podem ser adicionados fatores de crescimento; Matérias complexo: extrato de levedura, extrato de carne, etc; Problemas: Custo, composição, lote e fabricação; Matérias-primas naturais: caldo de cana-de-açúcar, melaço, farinha (trigo, milho), água de maceração de milho; Problemas: composição desconhecida, safra, clima solo; O meio de cultivo deve sempre deslumbrar o aumento de escala. Características e funções Conter nutrientes necessários para o micro-organismo; Baixo custo; Alto rendimento; Meio que não dificulte a separação do produto; Pequena quantidade de impurezas; Não dificultar o sistema de fermentação/cultivo. Classificação Matérias açucaradas: cana, beterraba, melaço, frutas, mel; Matérias amiláceas e feculentas: amido de frãos, fécula de raízes, tubérculos; Matérias celulósicas: Palhas, madeiras, resíduos sufíticos de fábrica de papel. Carboidratos Principais matérias-primas da fermentação/cultivo; Importante para o metabolismo da célula; Sacarização Determinam o rendimento dos processos; Carboidratos diretamente fermentáveis: energéticos; Carboidratos que necessitam ser hidrolisados: reserva ou estrutura. Substratos diretamente fermentáveis (Sucos de frutas, melaço de cana, caldo de beterraba) Nutrientes disponíveis para os M.O.; Alguns substratos necessitam que os M.O. possuam enzimas específicas SACAROSE ↔SACAROSE OU INVERTASE Substratos indiretamente fermentáveis (Matérias-primas amiláceas e celulósicas) Nutrientes não estão disponíveis para os M.O.; Aumento de etapa(s) na fase de upstream; Aumento do custo, mas da para utilizar resíduos de outras indútriais; Tratamento moderado e rigoroso SACARIZAÇÃO Hidrólise de açúcares, pode ser ácida, enzimática ou mista Açúcar indiretamente fermentável Açúcar diretamente fermentável Hidrólise ácida o Problemas de reprodutibilidade; o Uso de temperaturas altas; o Corrosão dos equipamentos. Hidrólise enzimática o As enzimas podem estar purificadas, no malte e farelo fúngico. MATÉRIAS-PRIMAS AMILÁCEAS Mandioca, milho, arroz, farelos; Amido é um polissacarídeo extraído das partes aéreas comestíveis dos vegetais. Quando o m.o possui amilase, ele pode utilizar o amido diretamente. AMIDO = AMILOSE + AMILOPECTINA Amilose: cadeia longa, não ramificada, massa molecular variável Amilopectina: muito ramificada, com comprimento entre 24 e 30 resíduos de glicose. Hidrólise ácida do amido Ocorre quando uma alta concentração de amido é tratada com ácido sob temperatura inferior as de gelatinação durante 1 ou mais horas de reação. Hidrólise enzimática do amido A enzima alfa-amilase catalisa a hidrólise de algumas ligações do amido, o que resulta em moléculas menores, que são os oligossacarídeos. Etapas de preparo de matérias-primas amiláceas Necessária somente quando o m.o não consegue hidrolisar o amido; o Pré-hidrólise: hidratação das macromoléculas; o Os grânulos de amido se ligam a água, incham e rompem; o Torna o amido mais suscetível a ação dos ác. Nucleicos e das enzimas Fatores que afetam a liquefação Granulometria dos grânulos após a moagem; Temperatura de cozimento; Tempo de cozimento; Agitação e distribuição do calor; Cozimento: pode ser feito em processo contínuo ou descontínuo; Modificação da viscosidade nesta etapa, deve ser sob agitação; Cozimento em pressão atmosférica deve ser realizado em duas etapas: Aquece até temperatura de gelatinação (66 a 75°) e depois até temperatura de cocção (97 a 100 °C); Cozimento em processo contínuo sob pressão: 160 a 180 °C, 6 a 10 atm, 2 a 6 min. Enzimas: alfa e beta amilase, amiloglicosidade. EFICIÊNCIA DA SACARIFICAÇÃO É DADA POR % Conversão = Açúcar redutor após sacarificação Açúcar total na matéria-prima ∙100 MATÉRIAS-PRIMAS CELULÓSICAS Celulose natural sempre está associada a lignina, hemicelulose e pectinas; Fonte: Cascas de grãos, bagaços de cana, resíduos de vegetais e grãos oleaginosos; Celulose: Componente de células de plantas, insolúvel em água, molécula grande não ramificada. Etapa do preparo de matérias-primas celulósicas Pré-tratamento: liberar celulose de suas associações poliméricas; Processos químicos de delignificação: ácidos e álcalis em meio aquoso, agentes oxidantes em meio aquoso; Processo Kraft: Digestão de cavacos em solução de NaOH e Na2SO4, em temperatura de 150 a 175 °C, durante cerca de 6 h; Processo soda: Digestão de cavacos em solução de NaOH2N, a 170 °C durante 3 h; Processos Físicos de Delignificação: tratamento com vapor, redução de tamanho e irradiação; Tratamento com vapor: vapor a alta pressão desintegra materiais lenhosos, quando o material é expandido rapidamente à pressão atmosférica após autoclavagem; Redução do tamanho: Aumenta a superfície de contato do material. São usados moinhos de bolas e rolos. A desvantagem é o alto custo; Irradiação: Economicamente inviável. COPRODUTOS COMO MATERIA-PRIMA PARA BIOPRODUTOS Água de maceração de milho o Excelente fonte de nitrogênio; o Fonte equilibrada de C, N, S e sais minerais; o Aminoácidos, polipeptídios e vitaminas do complexo B; o Exemplos utilização: ácidos (lático e succínico); enzimas. Melaço o Subproduto/coproduto da indústria açucareira; o Produto abundante e barato; o Subproduto complexo com alto teor de açúcares; o Contém substâncias nitrogenadas, vitaminas e elementos traços; o Exemplo utilização: ácidos, antioxidantes, etanol, aminoácidos, proteínas unicelulares, enzimas, etc. Melaço o Subproduto/coproduto do processo de produção de biodiesel, serve como fonte de carbono para os m.o.; o Produção de vários produtos por fermentação (enzimas, álcoois, ácido cítrico); Melaço o Mosto de cerveja, soro, suco de frutas, leite, malte, palha, bagaço.
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