Aula_4_m_todos_identifica__o

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UNIDADE 1 INTRODUÇÃO À QUALIDADE
1.1 Histórico da Evolução do Conceito de Qualidade
1.2 ? Definições e importância da prática de qualidade
1.3 Conceitos e definições de Gestão de Qualidade, Garantia da 
Qualidade e Controle de Qualidade
1.4 Ferramentas de gestão da qualidade 
UNIDADE 2 ASSUNTOS REGULATÓRIOS NA GARANTIA E NO 
CONTROLE DE QUALIDADE
2.3 Apresentação das principais resoluções relacionadas ao controle 
de qualidade (BPF, BPM, Validação, estudos de estabilidade, etc)
2.4 Apresentação das Farmacopéias: estrutura, monografias e suas 
aplicações
5.3 Registro de produtos farmacêuticos e Renovação de registro de 
produtos farmacêuticos
Controle de qualidade 
medicamentos: 
ensaios identificação
Prof Arthur Luiz Corrêa
6ª Edição (publicada em 15/08/2019)
RDC nº 298, de 12 de agosto de 2019 - dispõe
sobre a aprovação da Farmacopeia Brasileira, 6ª
edição.
• Volume 1
• Volume 2 - Monografias:
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• CONTROLE DE 
QUALIDADE:
– Conjunto de operações com o objetivo de
avaliar a conformidade de matérias-primas,
materiais de embalagem e do produto
acabado, com as especificações
estabelecidas
– Farmacêutico: matérias-primas, produto
acabado, embalagens, água, etc
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IDENTIFICAÇÃO PUREZA
POTÊNCIA/
DOSEAMENTO
FÍSICO 
QUIMICO
MICROBIOLÓGICO
• MATÉRIAS-PRIMAS:
– As matérias-primas de uso farmacêutico são substâncias
que têm como função a produção de medicamentos.
– Portanto, a aquisição de insumos químicos e o seu controle
de qualidade é uma das primeiras e mais importantes etapas
na cadeia de produção de medicamentos em geral.
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Ácido Acetil 
Salicílico
(AAS)
Fármaco (IFA) Medicamento
Excipientes
Toda matéria prima que é comprada precisa ser analisada?
Posso usar somente a informação do laudo de análise do 
fabricante?
Quais ensaios preciso fazer? (qualitativo/quantitativo?)
• Boas Práticas de Manipulação da
ANVISA, em relação às matérias-primas:
• RDC Nº 658, DE 30 DE MARÇO DE 2022: boas
práticas de fabricação de medicamento
• Art. 190. Os fabricantes de produtos acabados são
responsáveis por quaisquer testes de matérias-primas
conforme descrito no dossiê de registro.
• Parágrafo único. Podem ser utilizados resultados
parciais ou totais do fabricante de matéria-prima
aprovado, porém, em cada lote, minimamente, deve
ser realizado o teste de identificação.
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Art. 191. Quando da utilização de resultados parciais ou
totais do fabricante de matéria-prima aprovado no
certificado de análise do fabricante do produto acabados, os
seguintes itens devem ser avaliados:
I - deve ser dada atenção especial ao controle da cadeia de
distribuição, ... transporte, distribuição, armazenamento e
recebimento;
II - o fabricante do medicamento deve realizar auditorias... em
intervalos apropriados...a fim de assegurar a conformidade com
as Boas Práticas de Fabricação
III - o certificado de análise fornecido pelo fabricante /
fornecedor da matéria-prima deve ser assinado por uma pessoa
designada com qualificação e experiência apropriadas
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Art. 191. Quando da utilização de resultados parciais ou 
totais do fabricante de matéria-prima aprovado no 
certificado de análise do fabricante do produto acabados, os 
seguintes itens devem ser avaliados: 
IV - o fabricante do medicamento deve ter uma experiência 
adequada ao lidar com o fabricante da matéria-prima 
(qualificação)
V - o fabricante do medicamento também deve realizar uma 
análise completa ...em intervalos apropriados,
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São métodos analíticos de natureza qualitativa,
destinados á confirmação da identidade da matéria-
prima ou de determinado componente de um
produto.
Ensaios de identificação:
 Químicos
 Físicos
 Instrumentais
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Baseado em reações químicas de grupos funcionais.
Esses ensaios não são confirmatórios, mas sim
eliminatórios.
Dependendo da seletividade:
- Identificação do fármaco na matéria
prima/produto acabado
- Não aplicável a fármacos com grupos comuns.
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Misturar pequena quantidade da amostra com água, aquecer 
por alguns minutos. Resfriar. Adicionar uma ou duas gotas 
de cloreto férrico SR. 
Desenvolve-se coloração vermelho-violeta 
AAS
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A solução aquosa a 5% da amostra satisfaz às reações do íon 
sódio 
Colocar solução da amostra, acidulada, com ácido clorídrico 
SR, na zona redutora da chama; esta
adquire cor amarela intensa. 
Dipirona
Qual das seguintes substâncias podem ser diferenciadas por 
ensaio de identificação de grupamento funcional (pesquisa de 
íon sódio)? 
Dexametasona
Pantoprazol
AAS
O pantoprazol sódico (matéria prima e produto acabado) 
podem ser sempre identificados pelo ensaio de teste de chama 
que identifica a presença do íon sódio?
Considere os excipientes do medicamento (produto acabado): 
Excipientes: celulose microcristalina, copovidona, crospovidona, 
dióxido de silício, estearato de cálcio, lactose, laurilsulfato de 
sódio, talco, dióxido de titânio, hipromelose+macrogol, óxido de 
ferro amarelo, polimetacrilicocopoliacrilato de etila, citrato de 
trietila, água purificada e álcool etílico.
Teste de Scott – Identificação Cocaína
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• CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS
• Percebidas pelos sentidos humanos:
• Cor: branco, amarelado, límpido
• Odor: amadeirado, cítrico
• Aparência (aspecto visual): pó, cristal, pellet, pó
higroscópico, fluído, viscoso, cremoso
• Sabor: não testa em produto químico
• Caráter subjetivo
• Sem fins analíticos
• Indicativo da integridade e qualidade do material
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8Paracetamol
Características físicas: pó cristalino branco
Dipirona
Características físicas: pó cristalino quase branco
Albendazol
Características físicas: pó cristalino, untuoso ao tato, branco
ou quase branco
Salicilato de metila
Características físicas: Líquido incolor ou levemente
amarelado, de odor característico
Nistatina
Características físicas: Pó higroscópico, fino, amarelo ou
castanho
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• SOLUBILIDADE
• Ensaio complementar de identificação: baixa especificidade
• Solubilidade em solventes: água álcool etílico absoluto,
metanol, etc.
O procedimento consiste na adição de porções crescentes de
amostra a volumes constantes de solvente, até obtenção de
suma solução saturada.
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Paracetamol: Moderadamente solúvel em água, solúvel em 
água fervente, facilmente solúvel em álcool etílico. Solúvel 
em hidróxido de sódio M
Dipirona
Solúvel em água e álcool metílico, pouco solúvel em álcool 
etílico 
Albendazol
Praticamente insolúvel em água e em álcool etílico, facilmente 
solúvel em ácido fórmico anidro 
Salicilato de metila
Pouco solúvel em água, miscível com álcool etílico, 
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• SOLUBILIDADE
Termo descritivo de solubilidade 
Muito solúvel (Menos de 1 parte*) 
Facilmente solúvel (1 a 10 partes*) 
Solúvel (10 a 30 partes*) 
Moderadamente solúvel (30 a 100 partes*) 
Pouco solúvel (100 a 1000 partes*) 
Muito pouco solúvel (1000 a 10000 partes*) 
Praticamente insolúvel ou insolúvel (> 10000 
partes*) 
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• TEMPERATURA OU INTERVALO DE FUSÃO
Análise indicativa de:
- Grau de pureza
- Substância pura: temp permanece constante
durante fusão
- Amostra impura: observa variação temp durante a
fusão, alargamento da faixa do PF
- Identificação de compostos
- (cada estrutura possui um faixa de PF
característica
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Paracetamol:
Faixa de fusão (5.2.2): 168 °C a 172 °C 
Albendazol
Faixa de fusão (5.2.2): 208 ºC a 210 ºC 
Ácido acetilsalicílico
Faixa de fusão (5.2.2):em torno de 143ºC
Em relação a determinação do PF do paracetamol 
(Paracetamol: 168 °C a 172 °C), o que se espera observar se:
 A matéria prima estiver impura?
 O medicamento (produto acabado) for associado a 
codeína?
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• pH
• Fita indicadora de pH: pouca
sensibilidade
• Equipamento: Peagâmetro (pHmetro)
• Eletrodo de vidro: solução de KCl 3M
• A determinação do pH em produtos
acabados é útil como ensaio de qualidade:
relação biocompatibilidade, estabilidade e
biodisponibilidade.
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• Cuidados com o eletrodo do
pHmetro
• Deixar imerso em solução de KCl 3M
para não ressecar
• Limpar, delicadamente, entre as
análises, utilizando água destilada, para
evitar contaminação da amostra e
soluções padrão para calibração
• Secar, delicadamente, com gaze ou
papel macio para evitar danos
• Cuidado ao segurar na mão. Optar pelo
suporte
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• DENSIDADE
• Relação entre a massa de um material
e o seu volume (d = m/V) em uma
dada temperatura e pressão
• g/mL ou g/cm3
• Sólidos: teste com proveta
(farmacopeico)
• Líquidos: picnômetro (25ºC), pesa-xarope
d = m
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8• Cálculo de densidade com o Picnômetro
• m1 = massa do picnômetro vazio
• m2 = massa do picnômetro cheio com a amostra
• m3 = massa do picnômetro cheio com água destilada
• ma = m2 – m1
• mb = m3 – m1
M picnômetro com amostra - M picnômetro vazio
M picnômetro com água- M picnômetro vazio
D=
Efetuar a correção da temperatura, d = d’ x dH2O 
(tabelado para a temperatura)
Um picnômetro de 100 mL foi utilizado para calcular a densidade 
de duas formulações de xarope simples.
Considere os dados abaixo:
Massa picnômetro vazio: 50g
Massa picnômetro contendo xarope 1= 180g =130
Massa picnômetro contendo xarope 2= 155g 105
Massa picnômetro contendo água= 151g 101
Sabe-se que xarope simples devem apresentar uma densidade 
relativa de
Qual das formulações apresenta valor de densidade relativa 
compatível com xarope simples? Densidade padrão xarope1,20 a 
1,32g/mL)
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As interações da radiação eletromagnética com a matéria 
podem ser amplamente classificadas em: 
 Absorção: A radiação eletromagnética de uma fonte é 
absorvida pela amostra e resulta em uma diminuição na 
energia radiante que atinge um detector. 
 Emissão: A radiação eletromagnética emana da amostra, 
resultando em um aumento na potência radiante que 
atinge um detector.
Ultravioleta - Visível (UV-Vis)
Todas as moléculas absorvem radiação UV-Vis? 
Quanto mais ligações duplas conjugadas existirem em uma
substância, menor a energia requerida para a transição eletrônica
Termos utilizados em espectroscopia
Cromóforo – É um grupo insaturado covalente, responsável pela 
absorção eletrônica (por exemplo: C=C, C=O ou NO2).
Auxocromo – É um grupo saturado que, quando ligado a um
cromóforo, altera tanto o comprimento de onda como a 
intensidade de absorção (OH, NH2 e Cl).
Deslocamento batocrômico – É o deslocamento de uma 
absorção para um comprimento de onda maior devido a efeitos de 
substituição ou de solvente
Deslocamento hipsocrômico – É o deslocamento de uma 
absorção para um comprimento de onda menor devido a efeitos 
de substituição ou de solvente
Efeito do solvente: pH, ionização
Que tipo de deslocamento ocorre no UV quando a procaína é 
tratada com meio:
Ácido ?
Básico ?
Substituintes com elétrons não ligantes podem causar deslocamentos nas 
bandas de absorção. Por meio de ressonância, esses elétrons podem aumentar 
o comprimento do sistema Pi. Quanto mais disponíveis esses elétrons 
estiverem para interação com o anel aromático, maiores serão os 
deslocamentos.
Que tipo de deslocamento ocorre no UV quando a procaína é 
tratada com meio:
Ácido ?
Básico ?
Escolha do solvente
A escolha do solvente a ser usado na espectroscopia UV é 
muito importante:
- Não deve absorver radiação UV na mesma região que o 
analito.
Sinvastatina (239nm) Hidrocortisona (242nm)
Espectroscopia no Infravermelho
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As ligações covalentes em moléculas estão 
constantemente vibrando.
Deformação axial
Deformação angular
Quando uma substância é bombardeada com radiação em uma 
frequência que atinge exatamente a frequência de uma de suas 
deformações, a molécula irá absorver energia. 
Um espectro de infravermelho é obtido através da passagem de 
radiação infravermelha através de uma amostra de substância.
Cada sinal descendente no espectro de IV representa absorção de 
energia.
Cafeína
Paracetamol
Ensaios de identificação por cromatografia
A cromatografia permite a separação de substâncias, cujas 
características de polaridade e/ou peso molecular são distintas. 
Ess separação ocorre em função das diferenças de afinidade que 
as substâncias tem pela fase móvel ou fase estacionária.
PROCEDIMENTOS E APLICAÇÕES DA CROMATOGRAFIA LÍQUIDA
- Seleção de acordo com o PM, solubilidade, polaridade e
grau de ionização das substâncias.
FN
Partição
FR
Troca
Iônica
Exclusão
Permeação
em gel
Filtração
em gel
Adsorção
Polaridade
Polar não-iônico
Apolar Iônico
Insolúvel em água Solúvel em água
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104
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fase estacionária foi usada placa de sílica
fase móvel escolhida foi tolueno com acetato de etila (93:7).
CCF. CCD, TLC
Simples, baixo custo rapidez, reprodutibilidade
Análise qualitativa
Ensaios de identificação por cromatografia
Elevada capacidade separação
Rapidez/reprodutibilidade de análises
Amostras não são destruídas pelo detector 
e podem ser coletadas e utilizadas puras.
2) Considere o cromatograma por cromatografia líquida de alta 
eficiência (CLAE) a seguir, a fase móvel utilizada e as 
estruturas químicas dos compostos analisados. 
fluoxetina
clomipramina
Substâncias voláteis (PE<300ºC)
Termicamente estáveis
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CROMATOGRAFIA EM FASE GASOSA
Elevada resolução
Alta sensibilidade
Análise quantitativa e qualitativa (MS)
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• DOSEAMENTO
• Para forma farmacêuticas contendo ativos é necessário estabelecer
e garantir o teor do ativo presente no produto.
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• MÉTODOS DE DOSEAMENTO:
• Volumetria: reações químicas específicas
• Espectrometria no UV-visível
• Cromatografia
• Descritas nas monografias e compêndios oficiais.
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• ESPECTROFOTOMETRIA
• Método instrumental de doseamento
• Método mais utilizado nas análises de rotina de
laboratório de controle de qualidade na
farmacopeia brasileira:
• Método mais acessível
• Custo mais baixo
• Fácil operação
• Rápido resultado
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4• LEI DE BEER
• A absorvância é proporcional ao caminho percorrido pela radiação
no meio e a concentração das espécies absorventes
• A = ɛbc
• A = absorvância
• b = caminho óptico: tamanho da cubeta
• ɛ = absortividade molar: intrínseco da substância (L mol-1 cm-1)
• LIMITAÇÕES DA LEI DE BEER
• Aplicada a sistemas com baixas concentrações de espécies
absorventes: lei limitada
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5• EQUIPAMENTO
• FONTES:
• Lâmpadas de filamento de tungstênio: fonte mais comum de
radiação visível
• Lâmpada de deutério: leitura na região do UV
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6• SELEÇÃO DO COMPRIMENTO DE ONDA
• Varredura: região com maio absorção
• Cuidado ao selecionar o comprimento de onda: verificar se o
solvente, excipientes ou outro fármaco absorvem nesta região:
Evitar interferência
Amostra
Solvente
Sobreposição: overlapping
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7• ESPECTROFOTOMETRIA - DOSEAMENTO
• Requer calibração com padrões químicos: determina a relação entre a
resposta analítica e a concentração do analito
• Um padrão externo é preparado separadamente da amostra
• Preparo da amostra: diluições
• Preparo da curva de calibração: pesa-se massas conhecidas e crescentes do
padrão ou realiza-se o preparo com uma solução estoque e realiza-se as
diluições
• Preparodo branco
Após uma cápsula ser diluída em balão volumétrico de 100,0ml, 
deste foi retirada uma alíquota de 3,0ml para balão volumétrico de 
10,0ml e, deste último, foi realizada a leitura no espectrofotômetro, 
obtendo-se 0,602 de absorbância
Qual a massa de medicamento presente em uma cápsula? 
(Apresente todos os passos para chegar à resposta)
Um composto X deve ser determinado por espectrofotometria 
UV/visível. Uma curva de calibração é construída (y=0,115x 
+0,1785).
Uma amostra de X forneceu uma absorbância igual a 0,500
nas mesmas condições de medida dos padrões.
a) Determine a concentração da amostra (R=2,79mcg/mL).
b) Uma solução concentrada do composto X, no mesmo solvente, 
foi diluída a partir de um volume inicial de 10,00 mL para um 
volume final de 100,00 mL e a seguir uma alíquota de 1mL foi 
novamente diluído em balão volumétrico de 25mL e em seguida a 
absorvância obtida foi de 0,750. Qual a concentração da solução 
concentrada? (R=1240mcg/mL)
Uma solução 0,000396 M de um composto A apresentou uma 
absorvância de 0,624 em 238 nm numa cubeta de 1,000 cm de 
caminho óptico. Uma solução em branco, contendo apenas o 
solvente, apresentou uma absorvância de 0,029 no mesmo 
comprimento de onda. Determine aabsortividade molar do 
composto A
(Resp: 1502,5)
a) A absorvância de uma solução de concentração desconhecida 
do composto A, no mesmo solvente e usando a mesma cubeta, é 
de 0,375 em 238 nm. Determine a concentração de A na solução 
desconhecida (Resp: 0,000230 M).
Uma solução concentrada do composto A, no mesmo solvente, 
foi diluída a partir de um volume inicial de 2,00 mL para um 
volume final de 25,00 mL e a seguir teve uma absorvânciade 
0,733. Qual é a concentração de A na solução concentrada? 
(Resp: 0,00586 M)
Determinação espectrofotométrica de albendazol
Amostra concentrada de albendazol foi dissolvida em 25 mL de 
ácido clorídrico 2% (p/v) em álcool metílico. Completou-se o 
volume para 50 mL com água. Transferiu-se 5 mL para balão 
volumétrico de 50 mL e completou-se o volume com ácido 
clorídrico 0,1 M . Absorvância medida da amostra foi de 0,602
Y=0,0515x + 0,0036
Determine a concentração da amostra.(R=19946,6 mcg/mL)
Determinação espectrofotométrica de Amitriptilina
Transferir cloridrato de amitriptilina para balão volumétrico de 
100 mL. Adicionar 75 mL de ácido clorídrico 0,1 M, agitar 
mecanicamente por 15 minutos e deixar em banho de ultrassom 
por 15 minutos. Completar o volume com o mesmo solvente. 
Filtrar. Transferir 5 mL do filtrado para balão volumétrico de 50 
mL e completar o volume com o mesmo solvente, Determinar as 
absorvâncias das soluções resultantes em 239 nm, utilizando 
ácido clorídrico 0,1 M para ajuste do zero.
Absorvância medida da amostra foi de 0,602
y = 3,5398x - 0,0027
Determine a concentração da amostra. (R=170,8 mcg/mL)
Determinação espectrofotométrica de prometazina
Transferir amostra para balão volumétrico de 100 mL e completar 
o volume com ácido clorídrico 0,01 M. Diluir 10 mL para 100 mL 
com ácido clorídrico 0,01 M e, em seguida, diluir 10 mL para 50 
mL com o mesmo solvente
Medir as absorvâncias da solução em 249 nm, utilizando ácido 
clorídrico 0,01 M para ajuste do zero.
Absorvância medida da amostra foi de 0,357
Y = 3,2560 * X + 0,0002861 
Determine a concentração da amostra. (R=545mcg/mL)